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关键词： 伪狂犬病病毒(PRV)   gB蛋白   单克隆抗体   ELISA  

摘要： 【目的】制备猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)gB蛋白单克隆抗体并建立竞争ELISA检测方法,为PRV的抗体检测及试剂盒开发提供参考。【方法】本研究使用PRV gB蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,使用PEG1500将小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,用间接ELISA方法筛选出阳性杂交瘤细胞,采用有限稀释法经过2轮亚克隆,将阳性杂交瘤细胞通过体内诱生法制备腹水,并通过饱和硫酸铵法对腹水进行纯化制备单克隆抗体,用单克隆抗体建立竞争ELISA检测方法。使用棋盘法对反应条件进行优化,对阴性血清进行检测,计算该方法的临界值,并进行特异性、灵敏性和重复性试验,最后与商品化试剂盒同时对临床血清样品进行检测,比较二者的符合率。【结果】获得2D6、2D8两株杂交瘤细胞均为IgG1型,轻链为κ链,建立的竞争ELISA方法单克隆抗体最佳稀释度为1∶400,蛋白最佳包被浓度为1μg/mL,待检血清最佳稀释浓度为1∶4,最佳封闭液为1%BSA,酶标二抗的最佳稀释度为1∶4000。与其他临床常见的猪病病原不发生交叉反应,具有良好的特异性。阳性血清稀释至1∶256仍为阳性,证明该方法灵敏性好。批内和批间的变异系数均<10%,证明建立的竞争ELISA方法具有良好的重复性。与商品化试剂盒比较,总体符合率达93.3%。【结论】本研究成功制备针对PRV gB蛋白的单克隆抗体,并应用单克隆抗体建立了PRV gB抗体竞争ELISA检测方法。

关键词： 多囊卵巢综合征   中性粒细胞与淋巴细胞比值   血小板与淋巴细胞比值   肥胖  

摘要： 目的探讨外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)与多囊卵巢综合征(PCOS)肥胖的相关性。方法回顾性选取2021年12月至2022年12月桂林市妇幼保健院收治的200例PCOS患者,根据体质量指数(BMI)分为PCOS肥胖组(117例,BMI≥25 kg/m 2)和PCOS非肥胖组(83例,BMI<25 kg/m 2),另选取同期100例月经及排卵正常、体质量在标准范围内的非妊娠女性作为对照组。比较三组NLR、PLR、性激素、生化指标及炎性反应标记物水平,采用Pearson检验分析PCOS患者NLR、PLR水平与腰臀比(WHR)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)以及炎性反应标记物的相关性。结果对照组、PCOS非肥胖组、PCOS肥胖组雌二醇(E2)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、FINS水平依次降低,WHR、NLR、PLR、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、FBG水平依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、PCOS非肥胖组、PCOS肥胖组白细胞介素(IL)-13、IL-10、IL-17、降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson检验结果显示,PCOS患者外周血NLR与WHR、FBG、IL-13、IL-10、IL-17、PCT、hs-CRP呈正相关(r=0.512、0.351、0.364、0.411、0.523、0.443、0.336,P<0.05),与FINS呈负相关(r=-0.333,P<0.05);PLR与WHR、FBG、IL-13、IL-10、IL-17、PCT、hs-CRP呈正相关(r=0.426、0.436、0.3327、0.433、0.528、0.551、0.318,P<0.05),与FINS呈负相关(r=-0.453,P<0.05)。结论PCOS患者外周血NLR、PLR水平升高,其中PCOS肥胖患者NLR、PLR水平高于非肥胖患者,且与WHR、FBG、FINS密切相关。

关键词： MRI   前列腺健康指数   前列腺特异性抗原   前列腺癌   模型  

摘要： 目的分析MRI定性及定量参数联合前列腺健康指数(PHI)鉴别前列腺特异性抗原(PSA)阳性前列腺病灶良恶性的价值。方法选取华北理工大学附属医院2022年4月~2024年6月收治的行前列腺MRI检查的346例PSA阳性患者,前列腺影像报告数据系统(PI-RADS)3~5分。以穿刺病理结果作为金标准,分为良性组(良性前列腺病变,n=118)和恶性组(前列腺癌,n=228)。比较2组的PI-RADS评分、表观扩散系数(ADC)、慢速ADC(D)、快速ADC(D*)、灌注相关体积分数(f)和PHI。采用Logistic回归和决策树分类法构建上述参数的模型,用ROC曲线、校准曲线和决策分析曲线比较各模型的诊断效能。结果恶性组的PI-RADS 5分占比、前2肽PSA和PHI均高于良性组,ADC、D、D*和f均低于良性组(P<0.05)。模型4B(决策树分类模型,纳入PI-RADS、PHI、ADC、D、D*和f,最终保留PHI、ADC、D和D*)的ROC曲线下面积与模型3B(决策树分类模型,纳入PI‑RADS、ADC、D、D*和f)差异无统计学意义(P>0.05),但高于其他模型(模型1A~4A、1B、2B,P<0.05)。模型3B和模型4B的校准曲线与对角线重合度高,其他模型的校准曲线与对角线重合度偏低。模型4B的净收益在全阈值范围内均高于其他模型。结论由PHI、ADC、D和D*构建的决策树分类模型在鉴别PSA阳性且PI-RADS 3~5分的前列腺病灶良恶性方面表现出较高的区分度、校准度和临床应用价值。

关键词： 过敏性鼻炎   鼻黏膜   信号通路   作用机制   治疗  

摘要： 过敏性鼻炎是上呼吸道慢性炎症性疾病,鼻黏膜上皮损伤是过敏性鼻炎的重要病理事件,其可加重炎症等。最新研究强调,炎症小体在过敏性鼻炎中发挥关键作用,尤其是核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(nucleotide-binding domain leucine-rich repeat and pyrin domain-containing receptor 3,NLRP3)/胱天蛋白酶-1(cysteinyl aspartatespecificproteinase-1,caspase-1)/白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)信号通路。本文解析过敏性鼻炎中上皮屏障受损机制;详细阐述NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路的活化和调控机制,特别关注该信号通路在疾病上皮屏障破坏中的作用;并探讨其潜在治疗策略,旨在促进该信号通路在过敏性鼻炎及其他过敏性疾病研究及临床中的应用。

关键词： 中性粒细胞/淋巴细胞比率   单核/高密度脂蛋白胆固醇比率   突发性耳聋发病   预后   相关性分析  

摘要： 目的探索中性粒细胞/淋巴细胞比率(NLR)和单核/高密度脂蛋白胆固醇比率(MHR)与突发性耳聋(SSNHL)发病及预后的相关性。方法选取2022年1月至2024年5月于医院治疗的138例突发性耳聋病患者为研究组,另选取116例正常健康体检者为对照组,比较两组及不同分型SSNHL患者NLR及MHR的变化。采用logistic回归探讨SSNHL患者预后影响因素。结果研究组NLR和MHR显著高于对照组(P<0.05)。不同分型SSNHL患者平均听阈、总胆固醇(TC)、纤维蛋白原(FIB)、血小板计数(PLT)、皮质醇(COR)、NLR、MHR差异有统计学意义(P<0.05)。NLR、MHR和SSNHL呈现显著相关性(P<0.05),NLR和MHR增高是SSNHL患者预后不良的危险因素。结论NLR和MHR与SSNHL的发病关系密切,是导致SSNHL患者预后不良的重要因素。

关键词： 支气管肺炎   吸入用布地奈德混悬液   硫酸特布他林   炎症因子   免疫功能  

摘要： 目的:观察硫酸特布他林联合吸入用布地奈德混悬液治疗支气管肺炎患者的疗效及对细胞因子、免疫功能的影响。方法:选取2023年1月至2024年6月前来我院诊治的64例支气管肺炎患者作为研究对象,按照随机数表法将其分为对照组和联合组,各32例。对照组患者吸入用布地奈德混悬液治疗,联合组患者在此基础上联合硫酸特布他林治疗。比较两组患者治疗效果,治疗前后炎性因子[C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)、白细胞(White blood cell,WBC)]水平、免疫指标(T淋巴细胞CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))水平及不良反应。结果:联合组治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者CRP、WBC水平均明显下降,且联合组均明显低于对照组(P<0.05);两组患者CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均明显升高,且联合组均明显高于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应发生率无明显差异(P>0.05)。结论:硫酸特布他林联合吸入用布地奈德混悬液治疗支气管肺炎患者疗效较好,能降低患者炎症因子水平,提高免疫能力,安全性好。

关键词： 脑膜炎,病毒性   脑膜炎,细菌性   γ干扰素   白细胞介素-4   γ干扰素/白细胞介素-4   神经系统并发症   诊断效能  

摘要： 目的探讨γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)及IFN-γ/IL-4在不同类型脑炎脑脊液及血清中的表达差异及其对神经系统并发症的诊断效能。方法纳入2019年3月至2021年3月河北省儿童医院收治的40例病毒性脑炎病儿作为病脑组和40例化脓性脑膜炎病儿纳入化脑组,另选取40例中枢神经系统脱髓鞘疾病病儿作为对照组,分别采集三组病儿的脑脊液和血清标本备用,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)对脑脊液和血清中IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4含量进行检测,分析IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4在不同类型脑炎脑脊液及血清中的表达差异。而后根据病儿有无神经系统并发症再次将其分为有并发症组(n=21)和无并发症组(n=99),采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)曲线下面积(AUC)分别评价IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4对化脓性脑膜炎发生神经系统并发症的效能的预测价值。结果病脑组病儿脑脊液、血清IFN-γ水平分别为[(9.63±1.04)ng/L、(29.08±3.79)ng/L],均明显高于化脑组[(5.74±1.62)ng/L、(14.73±4.25)ng/L]和对照组[(3.44±0.76)ng/L、(11.13±2.05)ng/L](P<0.05),化脑组高于对照组(P<0.05),且血清中IFN-γ浓度高于脑脊液。化脑组病儿脑脊液、血清IL-4水平分别为[(42.17±5.24)ng/L、(91.05±10.91)ng/L],较病脑组[(21.36±1.73)ng/L、(53.26±8.18)ng/L]和对照组[(9.76±1.15)ng/L、(40.08±4.63)ng/L]均偏高(P<0.05),病脑组高于对照组(P<0.05),血清中IL-4含量较脑脊液偏高。病脑组脑脊液和血清中IFN-γ/IL-4最高0.51±0.05、0.49±0.12,化脑组最低0.38±0.06、0.29±0.03,三组组间对比数据差异有统计学意义(P<0.05)。有并发症组病儿脑脊液和血清中IFN-γ[(7.73±0.83)ng/L、(25.13±3.17)ng/L]、IL-4[(38.83±2.35)ng/L、(73.48±7.67)ng/L]及IFN-γ/IL-4(0.42±0.03、0.43±0.09)水平均明显高于无并发症组[(4.15±0.58)ng/L、(12.56±2.08)ng/L、(16.77±4.12)ng/L、(60.13±4.33)ng/L、0.21±0.04、0.19±0.07](均P<0.05)。ROC曲线研究结果显示,IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4及联合检测的AUC分别为0.84[95%CI:(0.72,0.96)]、0.87[95%CI:(0.76,0.97)]、0.76[95%CI:(0.62,0.90)]、0.93[95%CI:(0.85,1.00)],三项指标联合诊断的AUC显著高于各项指标单因子预测(P<0.05)。预测价值:联合检测>IL-4>IFN-γ>IFN-γ/IL-4。结论IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4在病毒性脑炎和化脓性脑膜炎病儿脑脊液和血清中的表达水平明显升高,且均为血清中水平高于脑脊液中;检测其水平可辅助临床更好地诊断神经系统并发症的发生。

关键词： 胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)   Th2炎症反应   变应性鼻炎   慢性鼻窦炎   哮喘   靶向治疗  

摘要： 胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是一种由上皮细胞产生的类似IL-7的炎症细胞因子,主要参与炎症反应和免疫稳态调节,在机体免疫系统中具有重要作用。近年研究发现TSLP在Th2型气道炎症性疾病中表达水平显著升高,通过促进炎症介质产生、Th2细胞分化并介导各种信号通路转导参与Th2炎症反应过程,同时与该类疾病病理过程等有关,提示TSLP可能是治疗该类疾病的潜在靶点。本文综述TSLP在Th2型气道炎症性疾病中的作用机制及其靶向治疗方面的研究进展,为今后相关疾病诊治提供新的理论依据和思路。

关键词： 猪细小病毒(PPV)   NS基因   原核表达   蛋白纯化   多克隆抗体  

摘要： 通过构建猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)NS蛋白的原核表达载体,表达纯化重组NS蛋白并制备其多克隆抗体,用于阐明NS蛋白的生物学功能及在PPV病毒复制过程中的作用机制。研究通过扩增PPV的NS目的基因,并利用限制性内切酶Bam HI和Xho I进行双酶切,采用分子克隆构建方法构建至pET28a-sumo-NS,通过加入0.5 mol/L IPTG并设置不同诱导温度进行诱导表达,利用Ni-NTA纯化获得约71 ku的重组NS蛋白。以重组NS蛋白为抗原,混合佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,获得抗NS的多克隆抗体,检测抗体效价达到1:32000,这将为后续研究PPV病毒复制机制及PPV疫苗的研发提供基础材料。

摘要： The IL-23-Th17 axis is responsible for neutrophilic inflammation in various inflammatory diseases. Here, we discover a potential pathway to inhibit neutrophilic asthma. In our neutrophil-dominant asthma (NDA) model, single-cell RNA-seq analysis identifies a subpopulation of CD39⁺CD9⁺ interstitial macrophages (IMs) suppressed by IL-23 in NDA conditions but increased by an IL-23 inhibitor αIL-23p19. Adoptively transferred CD39⁺CD9⁺ IMs suppress neutrophil extracellular trap formation (NETosis), a representative phenotype of NDA, and also Th17 cell activation and neutrophilic inflammation. CD39⁺CD9⁺ IMs first attach to neutrophils in a CD9-dependent manner, and then remove ATP near neutrophils that contribute to NETosis in a CD39-dependent manner. Transcriptomic data from asthmatic patients finally show decreased CD39⁺CD9⁺ IMs in severe asthma than mild/moderate asthma. Our results suggest that CD39⁺CD9⁺ IMs function as a potent negative regulator of neutrophilic inflammation by suppressing NETosis in the IL-23-Th17 axis and can thus serve as a potential therapeutic target for IL-23-Th17-mediated neutrophilic asthma. © The Author(s) 2024.