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关键词： 干眼   结膜上皮细胞   泪液   缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)   白细胞介素-17(IL-17)  

摘要： 目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、白细胞介素-17(IL-17)在干眼患者结膜上皮细胞及泪液中的表达水平及临床意义。方法:回顾性研究。选取2021-02/2023-03在本院收治的干眼患者183例183眼,选择同期在本院体检健康的181例181眼作为对照组(均选取左眼入组)。检测两组参与者结膜上皮细胞和泪液中HIF-1α、IL-17表达水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析结膜上皮细胞和泪液中HIF-1α、IL-17检测对干眼检测的诊断价值。结果:与对照组相比,干眼组患者结膜上皮细胞中HIF-1α、IL-17表达水平升高(均P<0.01);泪液中HIF-1α、IL-17表达水平升高(均P<0.01)。Pearson相关性分析显示,干眼组患者结膜上皮细胞和泪液中HIF-1α、IL-17均与BUT及泪液分泌试验Ⅰ(SⅠt)负相关,与角膜荧光素染色评分正相关(均P<0.05);干眼组患者结膜上皮细胞和泪液中HIF-1α、IL-17表达水平呈现正相关(均P<0.001)。ROC曲线下面积显示,结膜上皮细胞中HIF-1α、IL-17联合检测诊断的AUC显著大于结膜上皮细胞中HIF-1α单独检测诊断的AUC(Z=5.574,P<0.001),结膜上皮细胞中IL-17单独检测诊断的AUC(Z=4.351,P<0.001),泪液中HIF-1α、IL-17联合检测诊断的AUC显著大于HIF-1α单独检测诊断的AUC(Z=3.583,P<0.001),IL-17单独检测诊断的AUC(Z=4.303,P<0.001)。结论:干眼患者结膜上皮细胞及泪液中HIF-1α、IL-17表达水平升高,联合检测HIF-1α、IL-17表达水平对干眼的诊断具有重要价值。

关键词： 牛乳腺炎   粪肠球菌   溶血素cylA基因   细胞因子   p38 MAPK  

摘要： 为研究牛乳腺炎粪肠球菌β溶血素cylA基因对牛单核巨噬细胞(BMC-7)吞噬功能和免疫调节的分子机制,利用牛乳腺炎粪肠球菌临床分离的野生型菌株(BME1708)及cylA基因缺失突变株(BME1708△cylA)对牛巨噬细胞进行侵染,利用MTT检测法检测细胞活性;在明确细胞活性不受影响的条件下,提取被侵染的BMC-7总mRNA,利用RT-qPCR检测细胞因子IL-4、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α以及NOS2的转录水平差异,采用ELISA法检测相应表达水平;利用Western blot检测牛乳腺炎粪肠球菌cylA基因对BMC-7的p38 MAPK信号通路磷酸化水平的影响;利用p38 MAPK信号通路抑制剂(PD 169316)孵育BMC-7,ELISA法检测相应细胞因子表达水平,以明确cylA基因调控该信号通路的分子机制。结果显示:与BME1708组相比,BME1708△cylA组在IL-10和TNF-α转录水平下调,IL-4、IL-8、IL-12以及NOS2转录水平上调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与BME1708组相比,BME1708△cylA组IL-10表达水平下调,IL-4、IL-8、IL-12表达水平上调,差异均具有统计学意义(P<0.05);TNF-α的表达水平降低,但是差异不显著;对p38 MAPK磷酸化检测结果显示,粪肠球菌cylA基因可以激活p38 MAPK信号通路并使其磷酸化;在PD 169316孵育后,与未添加抑制剂组相比,添加抑制剂组的IL-10、TNF-α的表达水平下调,IL-4、IL-8、IL-12的表达水平上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。上述结果表明,p38 MAPK信号通路为粪肠球菌β溶血素cylA基因发挥免疫调节机制的重要通路,该结论为奶牛乳腺炎的治疗及防控提供新的靶位,可通过其毒力的钝化以及对p38 MAPK信号通路进行识别及信号通路封闭,对粪肠球菌感染进行有效防控。

关键词： 轮状病毒性腹泻   降钙素原   白细胞介素-6   C反应蛋白   白细胞计数  

摘要： 探讨轮状病毒性儿童腹泻诊断中降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)联合白细胞计数(WBC)检测的意义。方法 本次研究的方法主要是采用了回顾性分析法,即对2021年2月至2024年2月期间的轮状病毒性腹泻患儿80例和非感染性腹泻患儿80例进行回顾性的对比分析:两组采集空腹静脉血进行PCT、IL-6、CRP、WBC检测,比较两组各指标水平,比较观察组不同腹泻程度患儿各指标水平,并以轮状病毒感染抗原检测结果为金标准,评估PCT、IL-6、CRP、WBC单一检测及联合检测对轮状病毒性腹泻的诊断有效性。结果 通过对两组患儿的数据对比发现:观察组患儿的PCT、IL-6、CRP、WBC水平明显高于对照组(P<0.05)。观察组患儿不同腹泻程度的PCT、IL-6、CRP、WBC水平差异明显,而且重度>中度>轻度(P<0.05)。PCT、IL-6、CRP、WBC联合检测诊断轮状病毒性腹泻的敏感度91.25%、特异度93.75%、准确度92.50%高于 PCT、IL-6、CRP、WBC单一检测(P<0.05)。结论 轮状病毒性腹泻患儿PCT、IL-6、CRP、WBC超出正常范围,可通过联合诊断可保证高度的敏感度、特异度和准确度,同时各指标水平与腹泻程度成正比。

关键词： 重症肺炎   白细胞介素⁃6   降钙素原   白蛋白   白细胞介素⁃1β  

摘要： 目的 探讨老年重症肺炎患者(SP)血清IL-6、PCT/ALB、IL-1β水平与预后的关系。方法 选取2021年1月至2024年1月昆山市第五人民医院重症医学科诊治的88例老年SP患者,根据患者28 d后的转归情况,分为存活组64例和死亡组24例。比较两组患者血清IL-6、PCT/ALB、IL-1β水平,分析IL-6、PCT/ALB、IL-1β与预后的相关性,应用单因素和多因素Logistic分析老年SP患者死亡的影响因素,采用ROC曲线分析血清IL-6、PCT/ALB、IL-1β水平对老年SP患者预后的诊断价值。结果 死亡组PCT/ALB、IL-6、IL-1β、CRP水平及APACHE Ⅱ评分高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析显示,IL-6、PCT/ALB、IL-1β水平与预后呈线性正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,APACHE Ⅱ评分上升及IL-6、PCT/ALB、IL-1β、CRP高表达为老年SP患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。血清IL-6、PCT/ALB、IL-1β水平及三项联合预测重症肺炎患者死亡的曲线下面积AUC分别为0.781、0.729、0.736、0.911(P<0.05)。结论 血清IL-6、PCT/ALB、IL-1β水平与老年SP患者的发生和发展关系密切,三者联合检测对老年SP患者预后评估具有较高的临床价值,可作为重症肺炎的预测指标。

关键词： 牛细小病毒   VP1蛋白   Ⅰ型干扰素   宿主细胞  

摘要： 目的:系统研究IFN-β表达水平对牛细小病毒(BPV)VP1蛋白感染宿主细胞的作用与基础机制.方法:设计BPV Haden株(GenBank No:DQ335247)蛋白序列,提取其DNA,PCR扩增,构建BPV VP1和VP2真核表达载体,qRT-PCR检测HEK-293T细胞中VP1和VP2基因表达及细胞活力,Western blotting验证蛋白表达,检测拷贝数.用BPV VP1重组质粒转染HEK-293T细胞,提取RNA,qRT-PCR检测IFN-β水平以及Mx1、OAS1、ISG15、ISG56的mRNA水平、TBK1和IRF3转录水平.应用pCMV-Myc-BPV-VP1蛋白、TBK1、IRF3(5D)、MDA5和MAVS分别转染HEK-293T细胞,进行Western blotting和qRT-PCR,检测其表达水平.结果:对重组质粒进行双酶切鉴定,得到2 022 bp和1 611 bp的VP1和VP2片段,大小与预期相符;VP1和VP2 mRNA表达量比对照组分别增加5.5×104和7.4×105倍(P<0.001),BPV VP1组的病毒拷贝数比对照组增加5.8×104拷贝(P<0.001);BPV VP1显著抑制HEK-293T细胞中VSV介导的IFN-β产生;BPV VP1显著下调Mx、OAS、ISG15、ISG56表达水平,分别达30%、90%、84%和20%(P<0.01);TBK1和IRF3(5D)激活HEK-293T细胞中IFN-β产生,而且BPV VP1可使TBK1和IRF3转录水平下降81%和89%,使IFN-β生成量减少97%和90%. TBK1、IRF3(5D)、MDA5和MAVS均在HEK-293T细胞分布和表达,大小为84 kDa、55 kDa、118 kDa和58 kDa.转染pCMV-Myc-BPV-VP1蛋白后,TBK1、IRF3(5D)、MDA5和MAVS的表达水平均显著降低(P<0.001).结论:BPV VP1和VP2基因在HEK-293T细胞中高表达,BPV VP1蛋白显著促进BPV的体外增殖,并通过抑制ISGs转录水平,减少VSV介导的Mx、OAS、ISG15、ISG56转录水平.此外,显著抑制BK1和IRF3(5D)诱导的IFN-β生成,即BPV VP1蛋白通过IRF3或其通路降低IFN-I的抗病毒作用.pCMV-Myc-BPV-VP1能降低RLRs通路中TBK1、IRF3(5D)、MDA5和MAVS的表达水平.

关键词： SOFA评分   IL-6   CRP   乳酸   重症肺炎  

摘要： 目的 探究序贯器官衰竭估计(SOFA)评分联合血清白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)及乳酸对重症肺炎28d预后的预测效能。方法 选取本院2020年到2023年98例重症肺炎患者,根据其28d后的死亡情况,分为生存组(n=60),死亡组(n=38),收集患者的一般资料,根据中文版的简化SOFA评分计算分数;在入院的次日空腹抽取5 ml静脉血和2 ml外周动脉血,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、CRP水平检测采用透射比浊法进行测定。血乳酸水平用比色法检测;采用Logistic回归分析重症肺炎28d死亡的危险因素;采用ROC曲线分析SOFA评分联合血清IL-6、CRP、乳酸检测水平对重症肺炎28d预后的预测效能。结果 两组患者的性别、年龄、基础疾病个数和体重质量情况均无统计学差异(P>0.05);死亡组的SOFA评分分数以及血清IL-6、CRP、乳酸检测水平均高于生存组,且差异具有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归结果显示,SOFA评分分数以及IL-6、CRP、乳酸检测水平都是重症肺炎患者28d死亡的危险因素(P<0.05);由ROC曲线分析可得,SOFA评分以及血清IL-6、CRP、乳酸检测水平预测重症肺炎28d预后的AUC分别为:0.816,0.719。0.782,0.799;灵敏度分别为:65.8%,57.9%,78.9%,63.2%;特异度分别为:88.3%,80.0%,81.7%,88.3%;四个指标联合预测的AUC为0.917,灵敏度为80.9%,特异度为90.3%。结论 SOFA评分分数以及IL-6、CRP、乳酸检测水平越高的重症肺炎患者,其28d死亡的风险越高;SOFA评分联合血清IL-6、CRP、乳酸检测水平对于重症肺炎28d预后具有较高的预测效能。

关键词： 慢性乙型肝炎   高尔基体蛋白73   白细胞介素-2受体   微小核糖核酸-21   显著肝纤维化   临床价值  

摘要： 目的探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)、白细胞介素-2受体(IL-2R)、微小核糖核酸-21(miR-21)预测慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者显著肝纤维化的临床价值。方法收集2020年1月至2022年12月绵阳四0四医院收治的106例CHB患者为研究对象,根据肝纤维化程度分类和临床数据,将S0~S1期作为轻度肝纤维化组(n=80),S2~S4期作为显著肝纤维化组(n=26)。分析血清GP73、IL-2R、miR-21与CHB患者显著肝纤维化的相关性,以发生显著肝纤维化为因变量,纳入性别、年龄、BMI、血清GP73、IL-2R、miR-21、乙型肝炎DNA载量及抗HBs进行逐步logistic回归分析,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析诊断效能。结果与轻度肝纤维化组比较,显著肝纤维化组GP73、IL-2R、miR-21水平更高,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB患者血清GP73(r=0.472)、IL-2R(r=0.625)、miR-21(r=0.663)水平与显著肝纤维化呈正相关(P<0.001)。多因素分析结果显示,血清GP73、IL-2R为CHB患者显著肝纤维化的独立影响因素(P<0.05),基于GP73≥150.75 ng/mL、IL-2R≥698.6 pg/mL,可对CHB患者显著肝纤维化的发生率进行预测。三者联合诊断显著肝纤维化的AUC最大(0.976),灵敏度(96.2%)和特异度(90.0%)最高。结论血清GP73、IL-2R联合miR-21对显著肝纤维化有较好预测价值。

关键词： 新生儿败血症   预后   LL-37   MCP-1   IL-10  

摘要： 目的:探讨新生儿败血症(NS)血清抗菌肽-37(LL-37)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-10(IL-10)表达变化与病情程度的关系及对预后的预测价值。方法:选取我院2020年7月—2022年7月收治的99例NS患儿为研究对象,根据小儿危重病例评分法评分将患儿分为非危重组(43例,>80分)、危重组(24例,71~80分)和极危重组(32例,≤70分)。比较3组治疗前血清LL-37、MCP-1、IL-10水平,并分析其与小儿危重病例评分法评分的相关性,比较不同预后患儿治疗前、治疗1周后血清LL-37、MCP-1、IL-10水平,偏回归分析NS预后不良的影响因素,ROC分析治疗前、治疗1周后血清各指标联合检测对NS预后不良的预测价值。结果:治疗前3组血清LL-37、MCP-1、IL-10水平比较:非危重组<危重组<极危重组,且其水平与小儿危重病例评分法评分均呈负相关(P<0.05);治疗前、治疗1周后预后不良组血清LL-37、MCP-1、IL-10水平高于预后良好组(P<0.05),且以上指标是影响预后的危险因素;治疗前、治疗1周后血清LL-37、MCP-1、IL-10水平联合预测NS预后不良的AUC分别为0.735、0.811。结论:血清LL-37、MCP-1、IL-10水平与NS病情危重程度和病情转归有密切联系,可作为判断病情危重程度的有效指标,并可为临床早期预测不同预后情况提供参考。

关键词： 呋喹替尼   替雷利珠单抗   二线治疗   晚期结直肠癌  

摘要： 目的:探讨呋喹替尼联合替雷利珠单抗二线治疗晚期结直肠癌患者应用效果及对血清CEA、CRP、IL-6水平影响。方法:选取2020.3~2023.3的82例晚期结直肠癌,分为观察组与对照组(41例)。患者一线治疗以FOLFOX方案为主,观察组采用呋喹替尼联合替雷利珠单抗二线治疗,对比相关指标。结果:观察组客观缓解率与疾病控制率较对照组高,CRP、IL-6、COX-2、CEA、CA199低于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率对比无差异(P>0.05)。结论:呋喹替尼联合替雷利珠单抗二线治疗晚期结直肠癌疗效显著,可提升客观缓解率、疾病控制率,降低机体炎症反应、肿瘤标志物水平。

关键词： 猫杯状病毒   单克隆抗体   抗原表位   衣壳蛋白  

摘要： 本研究旨在制备并鉴定针对猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)VP1蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibodies,mAbs)。本研究使用SH14株FCV全病毒作为免疫原,通过腹腔注射法免疫BALB/c小鼠,制备了针对VP1蛋白的mAb。通过ELISA筛选,成功获得特异性单克隆抗体3A3C1株。对3A3C1株mAb进行了全面的生物学特性鉴定,3A3C1株mAb确认为IgG_(1)型,轻链为κ链。Western blot和间接免疫荧光检测的结果显示,3A3C1株mAb能特异性地识别并结合FCV SH14株、F9株和GZ22。此外,本研究还深入探究了3A3C1株mAb的线性抗原表位。通过分段表达VP1蛋白并进行详细的Western blot分析,最终确定3A3C1株mAb的线性抗原表位位于VP1蛋白的^(426)PSRLTPAGDYAITSG^(440)区域。本研究制备的3A3C1株mAb不仅是理解FCV免疫学特性的重要工具,也对发展FCV诊断方法和疫苗策略具有潜在应用价值。