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关键词： Cancer   High dose therapy   Immune-related toxicities   Immunotherapy   Interleukin-2 mutein   Safety issues   Toxicity  

摘要： The potential toxicity, safety and anti-drug antibody production of the novel IL-2 “no-alpha” mutein is in need of investigation as it may be a critical candidate for cancer therapy. The design of this mutein is meant to reduce toxicity compared to the IL-2 wildtype by disrupting interactions with the alpha receptor (CD25) and increasing the efficacy of the treatment. This was assessed following administration to Sprague-Dawley rats intravenously (IV), and it occurred over three cycles of five days each with daily dosing, with a 9-day washout period between each cycle. For the mutein dose groups, animals were dosed via IV at dose levels of 600, 6000, 18,000 U/kg. This dosing regimen is equivalent to 1x, 10x, and 30x the proposed first human dose, respectively. This study also assessed the progression or regression of any effects following a 14-day treatment-free recovery period for the control and high dose groups. Rats that were administered the “no-alpha” mutein at 600 and 6000 U/kg were well-tolerated with no apparent abnormal observations in general health, behaviour and autonomic function. There was no evidence of systemic toxicity based on evaluations in clinical pathology, gross necropsy and histopathology. At 18,000 U/kg (30x), abnormal clinical signs were observed at the injection sites consisting of localized swelling, discoloration, scabbing and necrosis. These animals showed a significant recovery in abnormal localized clinical signs following the treatment free period. Additionally other parameters did not indicate any significantly detrimental effects at this dose level. Therefore, the IL-2 mutein “no-alpha” seems to hold promise as a valuable addition to the current array of cancer therapy strategies, especially at the proposed dose level. © 2025 The Authors

关键词： 溶瘤病毒   癌症治疗   单纯疱疹病毒Ⅱ型   肿瘤细胞   细胞因子  

摘要： 目的 通过同源重组技术构建表达人源IL-12的溶瘤单纯疱疹病毒Ⅱ型(oHSV2-hIL-12),并评估其体外和体内的抗肿瘤活性。方法 体外检测IL-12生物学活性,细胞计数试剂盒(CCK-8)和实时无标记细胞分析法确定杀伤效果;体内通过人黑色素瘤(A375)小鼠模型,瘤内注射oHSV2-hIL-12研究其抗肿瘤活性。结果 成功构建并表达oHSV2-hIL-12,该病毒能够在体外正常复制,对肿瘤细胞具有良好的杀伤效果。oHSV2-hIL-12表达的人源IL-12能增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,在A375黑色素瘤小鼠模型中有效抑制了肿瘤生长甚至使其完全消退。结论 构建的oHSV2-hIL-12所携带的IL-12可持续表达,同时激活T细胞的抗肿瘤活性,在体内外均有良好的溶瘤效果。

关键词： 流感病毒   β-actin   免疫层析   抗原检测  

摘要： 目的:以β-actin蛋白为内参,建立流感病毒抗原荧光免疫层析双质控检测方法。方法:使用荧光微球标记流感病毒单克隆抗体、β-actin单克隆抗体,将配对流感病毒单克隆抗体、β-actin单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体依次包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线、内参线、质控线,试纸条组装后进行检测。优化样品垫处理液配方和喷球量后,考察试纸条线性范围、准确度、精密性,并与江苏硕世流感病毒抗原检测试剂盒(铂金法)进行方法学比对,通过ROC曲线计算试纸条敏感度、特异度、阳性和阴性预测值。结果:结合垫最佳喷球量为8μL/cm;甲、乙型流感病毒线性范围分别为2.50×10^(3)~320.00×10^(3)和6.25×10^(5)~800.00×10^(5) TCID_(50)/L;批内、批间变异系数均小于15%;与新型冠状病毒等其他呼吸道病毒无交叉反应;与江苏硕世流感病毒抗原检测试剂盒平行检测临床样本,二者检测阳性预测值可达98%,自制试纸条检测敏感度达到90.63%。结论:建立了高敏感度的流感病毒抗原荧光免疫层析双质控检测方法。

关键词： 儿童   复发/难治急性淋巴细胞白血病   贝林妥欧单抗   鞘内化疗   不良事件  

摘要： 目的:回顾性分析15例使用贝林妥欧单抗治疗的急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿的临床特点,总结贝林妥欧单抗治疗儿童B-ALL的疗效及安全性。方法:2022年2月至2023年1月期间接受贝林妥欧单抗治疗的15例患儿纳入本研究。除2例为衔接仓位行造血干细胞移植术且未联合鞘内化疗,1例因经济问题而缩短疗程,其余患儿均按照标准方案予1个疗程(28d)的贝林妥欧单抗同步鞘内化疗,对疗效和安全性进行评估。结果:从疗效来看,对于治疗前骨髓已达完全分子学缓解(CMR)的患儿,贝林妥欧单抗治疗可全部有效维持CMR状态;对于未达CMR的患儿,1个标准疗程贝林妥欧治疗后的CMR率可达66.7%(4/6);对于有微小残留病(MRD)的复发/难治ALL(R/RALL)患儿,MRD清除率可达75.0%(3/4)。对不良事件发生率的统计结果显示,13.3%(2/15)的患儿未发生任何不良事件;最常见的不良事件为细胞因子释放综合征(73.3%,11/15)及转氨酶升高(26.7%,4/15);33.3%(5/15)的患儿出现3级及以上不良事件;所有不良事件均在对症治疗后痊愈。对IgG水平进行检测发现,其于贝林妥欧用药起4-7周明显下降,8周起逐渐恢复。结论:贝林妥欧单抗可作为诱导R/R-ALL患儿达深度缓解及化疗不耐受患儿的过渡治疗方案,安全有效。

关键词： 乙型肝炎病毒   Th1/Th2细胞因子   肝功能  

摘要： 目的 分析慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者外周血Th1/Th2细胞因子与肝功能的关系。方法 选取312例慢性HBV感染患者,根据HBV感染不同阶段将其分为免疫耐受期组(121例)、免疫清除期组(47例)、免疫控制期组(58例)和再活动期组(86例)。比较患者外周血Th1/Th2细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)、IL-2/IL-10、IFN-γ/IL-10]和肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆红素(TBIL)]水平;采用Pearson相关性分析Th1/Th2细胞因子与肝功能指标之间的关系。结果 慢性HBV患者HBV DNA载量:免疫耐受期组>免疫清除期组>再活动期组>免疫控制期组。IL-10水平:免疫控制期<再活动期<免疫耐受期=免疫清除期(P<0.05);IL-2、IFN-γ、IL-2/IL-10、IFN-γ/IL-10、ALT、AST和TBIL水平比较:免疫控制期组<免疫耐受期组<再活动期组<免疫清除期组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,慢性HBV感染者IL-2、IFN-γ、IL-2/IL-10和IFN-γ/IL-10水平与ALT、AST、TBIL水平均呈正相关,IL-10与ALT、AST、TBIL水平均呈负相关(P<0.05)。结论 HBV感染患者外周血Th1/Th2细胞因子与肝功能具有显著相关性,参与HBV感染的整个过程。

关键词： antiretroviral therapy interruption   biomarkers   inflammation   set point   viral rebound  

摘要： Objective:After analytical treatment interruption (ATI), viral rebound occurs in most people with HIV. The time to viral rebound (TTVR) is likely determined by the properties of the viral reservoir as well as the antiviral immune response. Soluble biomarkers of immune activation may be predictive of TTVR and plasma viral load (pVL) setpoint after ATI. The objective of this study is to identify these soluble ***:A retrospective biomarker analysis of the Primo-SHM trial who were treated 24 or 60 weeks during early HIV ***:Thirty-five biomarkers were measured at ATI in 65 participants. Association between biomarkers and reservoir size, TTVR and pVL at setpoint was ***:SCD14 correlated to pVL setpoint (B = 0.598;P = 0.004) and lower levels of IL-12p70 to a higher level of pVL setpoint (B = -0.448;P = 0.04). SCD163 correlated to levels of total HIV-DNA (B = 0.413;P = 0.007).Conclusion:An increased pVL setpoint was associated with higher sCD14 and lower IL-12p70 at ATI, and increased total HIV-DNA was associated with higher sCD163 at ATI. SCD14 and sCD163 are biomarkers of monocyte activation, whereas IL-12p70, produced by monocytes, is essential for inducing Th1 responses. This underscores the relation between immune activation and diminished immune control of HIV. Our findings indicate that sCD14 and IL-12p70 could serve as predictive biomarkers for favorable outcomes in cure interventions.

关键词： 日本脑炎病毒   prM蛋白   原核表达   单克隆抗体   B细胞表位  

摘要： [目的]本文旨在制备日本脑炎病毒(JEV)prM蛋白的单克隆抗体,为进一步了解prM的结构和功能、建立特异性检测方法以及研究JEV prM蛋白功能奠定基础。[方法]将prm基因克隆至原核表达载体pET-32a,诱导表达并纯化prM蛋白,随后将其免疫小鼠,通过细胞融合和亚克隆得到分泌抗prM单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备腹水并进行效价测定,通过Western blot和IFA验证其特异性,并进行空斑中和试验测定其中和活性,利用原核表达多段截短体蛋白确定单克隆抗体抗原表位并进行保守性分析,将其初步应用于感染检测及亚细胞定位分析。[结果]经细胞融合和3次亚克隆后成功获得1株能稳定分泌抗prM单克隆抗体(mAb)的细胞株,命名为4H6,所制备的腹水效价可达到1∶1 638 400,经鉴定,该prM mAb重链属于IgG2b,轻链为κ型。Western blot以及IFA试验均证明该抗体具有良好的特异性。空斑减少中和试验显示prM 4H6分泌的mAb不具备中和活性。通过表达截短蛋白鉴定出prM 4H6分泌的mAb所识别的抗原表位位于^(30)GENRCWVRAIDVGYMC^(45),结合生物信息学分析发现,该表位位于prM蛋白表面且在JEV不同毒株之间高度保守。成功将prM 4H6分泌mAb初步应用于JEV感染检测及prM蛋白的亚细胞定位分析。[结论]成功制备1株高效分泌抗JEV prM蛋白单克隆抗体细胞株,其分泌的特异性mAb的B细胞表位识别区位于pr表面,为分析prM蛋白在病毒复制过程中的生物学功能以及与其他病毒蛋白(如E蛋白或宿主分子)之间的相互作用提供有效工具。

关键词： 社区获得性肺炎(CAP)   老年   CURB-65评分   全身炎症反应标志物   预后  

摘要： 目的在急诊老年社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)住院患者中建立一个客观、准确的预后模型来评估严重程度以及预后情况。方法回顾性分析2018年6月至2020年12月期间在复旦大学附属闵行医院急诊科住院的老年CAP患者。以老年CAP患者30天住院死亡率为主要结局,将4种全身炎症反应标志物中性粒细胞与淋巴细胞计数比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、单核细胞与淋巴细胞计数比值(monocyte-to-lymphocyte ratio,MLR)、血小板与淋巴细胞计数比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)、系统免疫炎症指数(systemic immune inflammation index,SII)纳入单因素和多因素Logistic回归分析,并比较不同评分系统的预测性能。结果最终纳入421例老年CAP患者。多因素Logistic回归分析结果表明NLR是老年CAP住院患者的独立危险因素。将NLR与CURB-65评分联合优化构建评分系统,根据NLR最佳截断值11.4对该变量进行量化赋后,建立NLR+CURB-65评分。构建ROC曲线来比较3种不同评分系统(NLR、CURB-65、NLR+CURB-65)的曲线下面积,发现NLR+CURB-65评分的曲线下面积明显高于CURB-65评分。根据NLR+CURB-65评分的最佳截断值3,将患者进行分层,≥3分为高危组(n=188),<3分为低危组(n=233)。K-M生存曲线分析表明与高危组相比,低危组患者的死亡率更低、出院率更高。结论对于急诊老年CAP住院患者,NLR+CURB-65评分对其病情严重程度以及预后的预测能力具有较高价值。

关键词： 乳腺癌   淋巴结   癌胚抗原   糖类抗原   细胞角蛋白19  

摘要： 目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)与乳腺癌患者淋巴结转移的关系。方法选择2022年3月至2024年3月我院收治的78例乳腺癌患者,根据病理检查结果,将78例乳腺癌患者分为淋巴结转移组(42例)与未转移组(36例)。所有患者均行血清CEA、CA125、CYFRA21-1检查,比较乳腺癌淋巴结转移组与未转移组上述指标水平。利用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CEA、CA125、CYFRA21-1单项与联合检查诊断乳腺癌淋巴结转移的价值。结果淋巴结转移组CA125(39±6)U/ml、CEA(17.7±4.6)ng/ml、CYFRA21-1(4.8±1.4)ng/ml水平,均高于未转移组(24±4)U/ml、(9.8±1.9)ng/ml、(1.7±0.6)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清CEA、CA125、CYFRA21-1以及联合检查用于诊断乳腺癌淋巴结转移的曲线下面积分别为:0.771、0.859、0.794、0.905,具有一定的诊断性能。结论血清CEA、CA125、CYFRA21-1与乳腺癌患者淋巴结转移有密切关系,监测上述指标水平变化可反映患者病情进展、预后情况,联合检测可提高诊断效能,为临床提供更多有价值的参考信息。

关键词： 沙门氏菌   SifA蛋白   单克隆抗体   应用   分泌  

摘要： 研究旨在制备沙门氏菌SifA蛋白的单克隆抗体,分析其亚类、腹水效价、亲和力和反应性,并初步应用于检测沙门氏菌感染巨噬细胞后SifA分泌的生物学特性。试验通过构建重组表达大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a-sifA和BL21(DE3)/pGEX-6P-1-sifA,表达和纯化得到rHis-SifA和rGST-SifA蛋白,以rHis-SifA作为免疫抗原,rGST-SifA作为检测抗原,采用B细胞杂交瘤技术制备SifA单克隆抗体,并使用鼠源亚类鉴定试剂盒确定其亚类,间接ELISA方法测定其腹水效价和亲和力,Western blot分析其反应性、与肠杆菌科其他细菌交叉反应的特异性和巨噬细胞中沙门氏菌SifA的分泌特性,评价其效果或应用潜力。结果显示:成功制备10株单克隆抗体,其中单克隆抗体10G6亚型为IgG1,其效价达1.0×10^(6)以上,亲和常数为3.66×10^(9)/M,能特异性结合rHis-SifA和rGST-SifA蛋白,Western blot结果显示该单克隆抗体能特异性识别8种不同血清型沙门氏菌,并能确定沙门氏菌感染巨噬细胞后SifA的分泌特性。研究表明,成功制备10株单克隆抗体,其中单克隆抗体10G6具有良好的特性,为沙门氏菌的研究和检测提供生物材料。