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关键词： glycoprotein gp130   HepG2   interleukin-6   mitochondria   non-alcoholic fatty liver disease   oxidative stress  

摘要： Abstract: Objective: The dualistic role of IL-6 in diseases associated with metabolic disorders (including non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD) under oxidative stress has been repeatedly demonstrated in various studies. The aim of this work was to investigate the combined effect of IL-6 and glycoprotein 130 (gp130) on cell death pathways and mitochondrial dynamics in the HepG2 cell line in the oxidative stress model. Methods: The HepG2 cell line was used to create a model of oxidative stress in hepatocytes (hepatocytes without any additives are hereafter referred to as control) by adding tert-butyl hydroperoxide (tBHP). IL-6 (variant 1) or IL-6 + gp130 (variant 2) were added to the experimental model of oxidative stress. Cell viability was determined by flow cytometry and the expression and production of key markers of mitochondrial biogenesis, apoptosis, mitophagy and antioxidant defense were analyzed by RT-qPCR and Western blotting, respectively. Results and Discussion: The addition of IL-6 alone (variant 1) increased the relative percentage (%) of viable cells and decreased the number of dead and apoptotic cells. In the cell model, IL-6 contributed to an increase in the expression of the TFAM, MFN2, DNM1L and NF-kB1 genes and the production of MFN2 protein and, on the contrary, led to a decrease in the expression of HSP70, HSF1, BCL2L1 and SQSTM1. The addition of gp130 + IL-6 to the model of oxidative stress in hepatocytes (variant 2) increased the expression of the genes TFAM, MFN2, DNM1L, NF-kB1 and MAPLC3B, while the expression of HSP70, HSF1 and BCL2L1 decreased. Conclusions: Addition of IL-6 to the model of oxidative stress in hepatocytes promotes activation of mitochondrial dynamics, decreases apoptosis and stimulates cell viability, while gp130 mediates stimulation of the expression of genes responsible for mitoautophagy. © Pleiades Publishing, Ltd. 2025.

关键词： 巨噬细胞   血吸虫病   肝纤维化   间充质干细胞   M2巨噬细胞极化  

摘要： 【目的】探讨共激活的间充质干细胞(MSCs)是否通过调节巨噬细胞极化发挥治疗血吸虫病的作用。【方法】取20只成年Balb/c雄性小鼠,随机分为四组,分别为未感染组、感染组、MSC组和MSCTLR4+IFN-γ组。通过腹部敷贴尾蚴法建立日本血吸虫感染模型。在感染后第5周,经灌胃给予小鼠吡喹酮进行抗虫治疗;感染后第6周,分别给予不同处理的MSCs治疗或未治疗。每周监测各组小鼠体质量变化率。采用HE染色和Masson染色观察肝组织病理变化,通过RT-q PCR检测肝组织中α-SMA和胶原蛋白m RNA水平,以评估肝纤维化程度;检测肝脏炎症因子和基质金属蛋白酶(MMP)的m RNA水平,分析纤维化相关机制;通过RT-q PCR检测肝组织中i-Nos和Arg-1表达,并利用免疫荧光染色检测M1或M2巨噬细胞的比率,分析MSCs治疗与巨噬细胞极化的相关性;采用体外共培养体系,研究MSCs对巨噬细胞极化的直接调控作用。【结果】与感染组相比,MSCTLR4+IFN-γ组小鼠体质量增加(P<0.01),肝脏虫卵肉芽肿面积显著减少(P<0.001),α-SMA、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ在RNA水平表达下降(P<0.01)。此外,MSCTLR4+IFN-γ组小鼠肝组织中炎症因子TNF-α和IL-1β表达下降(P<0.05),基质金属蛋白酶MMP2、MMP9和MMP13表达增高(P<0.01)。MSCTLR4+IFN-γ组较感染组显示M2标志物Arg-1 m RNA高表达(P<0.001),而M1标志物i-Nos表达下降(P<0.05);免疫荧光结果显示MSCTLR4+IFN-γ组肝脏i-Nos+细胞比率较感染组显著降低(P<0.05),而F4/80+CD206+细胞比率升高(P<0.0001)。体外共培养实验进一步验证了这一现象:和MSCTLR4+IFN-γ共培养后,骨髓来源巨噬细胞中Arg-1在RNA水平表达升高,且促炎因子i-Nos和TNF-α的表达下降,ELISA结果与之相符。【结论】本研究表明,TLR4与IFN-γ协同激活的MSCs可减轻日本血吸虫感染小鼠的肝纤维化,该作用可能与激活MSCs调节巨噬细胞向M2型极化,发挥抗炎作用并促进肝脏细胞外基质降解相关。

关键词： SiO_(2)   矽肺   细胞因子   外泌体  

摘要： 目的构建小鼠矽肺模型,在动物实验中开展矽肺生物标志物的研究。方法通过气管滴注二氧化硅构建矽肺小鼠模型,在第28天收集小鼠血浆和肺组织,采用肺组织HE染色观察肺纤维化的程度,采用蛋白质印记的方法检测纤维化指标α平滑肌肌动蛋白(Alpha smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白1(Fibronectin1,FN1)的相对表达量,采用液相芯片技术在小鼠血浆中检测细胞因子CXCL2、CXCL10、血小板衍生生长因子-AB(Platelet-derived growth factor AB,PDGF-AB)的水平。提取小鼠血浆外泌体,通过平行反应监测(Parallel reaction monitoring,PRM)方法验证从矽肺人群血浆外泌体中筛选出的差异表达蛋白。结果HE染色结果显示,矽肺模型组肺组织有明显的纤维化病变,Ashcroft评分显著高于对照组(t=9.971,P<0.01),肺组织中α-SMA和FN1表达水平显著高于对照组(t=3.770,P<0.05;t=9.128,P<0.01);在透射电镜下小鼠血浆外泌体呈现均匀的杯型,纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA)分析显示其平均直径为101.5 nm,Western blot检测到外泌体标志蛋白肿瘤易感基因101(Tumor susceptibility gene 101,TSG101)、脂筏蛋白(Flotillin)和Alix呈阳性,钙联蛋白(Calnexin)呈阴性;小鼠血浆细胞因子检测结果显示,矽肺模型组的小鼠血浆中CXCL2的浓度高于对照组,CXCL10的浓度显著升高(t=4.461,P<0.01),PDGF-AB的浓度升高(t=3.549,P<0.01)。PRM分析显示,血浆外泌体蛋白载脂蛋白C1(Apolipoprotein C1,APOC1)(t=3.207,P<0.01)、载脂蛋白A2(Apolipoprotein A2,APOA2)(t=2.449,P<0.05)、间-α-胰蛋白酶抑制剂重链H4(inter-alpha-trypsin inhibitor H4,ITIH4)(t=2.468,P<0.05)、分泌型磷蛋白2(Secreted phosphoprotein 2,SPP2)(t=2.231,P<0.05)和玻连蛋白(Vitronectin,VTN)(t=3.206,P<0.01)的表达水平低于对照组。蛋白质印记结果显示外泌体蛋白ITIH4的表达量在矽肺模型组显著低于对照组(t=3.084,P<0.05)。结论矽肺模型组小鼠血浆中的细胞因子CXCL10、PDGF-AB的浓度显著高于对照组,血浆外泌体蛋白APOC1、APOA2、ITIH4、SPP2和VTN显著低于对照组,它们可能具有成为矽肺生物标志物的潜能。

关键词： 肝细胞癌   细菌外膜囊泡   细胞穿膜肽   口服疫苗  

摘要： 目的:利用负载肿瘤抗原的细菌外膜囊泡(OMVs)作为口服疫苗,以探究其抑制肝细胞癌的效果。方法:首先,利用超速离心法收集益生菌EcN 1917来源的OMVs,并通过电镜和DLS表征其形态及粒径;其次,利用考染和流式检测TAT介导蛋白负载于OMVs内部的效率及抗胃蛋白酶消化的能力;利用transwell实验模拟肠上皮屏障,评估OMVs透过肠上皮屏障诱导树突状细胞(DC)活化的能力;最后,在表达模式识别抗原OVA的小鼠肝细胞癌皮下瘤Hepa1-6-OVA模型上,评估经口服OMVOVA疫苗诱导的肿瘤特异性免疫应答效应。结果:OMV为球形脂质双层纳米囊泡,平均直径为37.8 nm;流式检测结果显示:TAT细胞穿膜肽可介导GFP荧光报告蛋白在OMVs内部高效负载并可保护GFP蛋白不被消化降解;体外模拟肠上皮实验结果证明:OMVs可穿过肠上皮屏障并激活DC,上调共刺激分子CD80/CD86表达(t=5.571、57.64,均P<0.01);在表达OVA抗原的Hepa1-6肝细胞癌皮下瘤小鼠模型中,口服OMVOVA可有效抑制肿瘤生长,肿瘤体积(t=4.288,P<0.01)和肿瘤质量(t=5.812,P<0.01)均显著降低,肠系膜淋巴结中DC活化(t=10.08,P<0.01)及对抗原肽的提呈(t=5.853,P<0.01)均显著增高,显著激活抗原特异性T细胞数量(t=7.863,P<0.01)。结论:口服内部负载肿瘤抗原肽新型OMV疫苗,可有效抑制小鼠肝细胞癌皮下瘤生长,激活黏膜免疫诱导抗原特异性免疫应答。

关键词： 重症肺炎   肺泡灌洗液   Toll样受体4   可溶性髓样细胞触发受体-1   白细胞介素-17A   白细胞介素-8  

摘要： 目的探讨重症肺炎患者肺泡灌洗液(BALF)中Toll样受体4(TLR4)、可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-8(IL-8)水平与疗效和预后的关系。方法选择2022年2月至2024年2月湖北省麻城市人民医院收治的100例重症肺炎患者纳入观察组,收集同期于湖北省麻城市人民医院治疗的124例普通肺炎患者纳入对照组。采集所有患者BALF,采用酶联免疫吸附试验检测2组患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8水平。根据治疗效果将重症肺炎患者分为有效组、无效组;根据急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ评分)将重症肺炎患者分为非危重组、危重组;根据重症肺炎患者入院28 d的生存情况,将其分为生存组及死亡组。分析重症肺炎患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A、IL-8水平与APACHEⅡ评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估重症肺炎患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8预测预后的价值。结果观察组BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8水平均高于对照组(P<0.05)。非危重组54例,危重组46例。危重组患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8水平均高于非危重组(P<0.05)。有效组56例,无效组44例。无效组患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8水平均高于有效组(P<0.05)。100例重症肺炎患者入院28 d,转院3例,共有97例患者有完整的预后数据,其中死亡组30例,存活组67例。死亡组患者重症监护室(ICU)总监护时间长于存活组(P<0.05),发生误吸、发生谵妄的比例高于存活组(P<0.05)。死亡组BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8水平均高于存活组(P<0.05)。重症肺炎患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.312、0.343、0.331、0.306,均P<0.05)。重症肺炎患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8单独及联合预测预后的曲线下面积(AUC)均较大,其中联合检测的AUC最大,当约登指数为0.788时,预测重症肺炎患者死亡的AUC为0.875,灵敏度为96.67%,特异度为82.09%。结论重症肺炎患者BALF中TLR4、sTREM-1、IL-17A及IL-8水平较高,且均可作为评估重症肺炎病情严重程度、疗效及预测预后的有效指标。

关键词： 溃疡性结肠炎   加味芍药汤   络病学说   艾灸   中性粒细胞与淋巴细胞比值   血小板与淋巴细胞比值  

摘要： 目的:“络病学说”指导艾灸联合加味芍药汤对(湿热型)溃疡性结肠炎(UC)患者外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)的影响。方法:选取UC患者100例为研究对象,按随机数字表法分为对照组与研究组,各50例。对照组接受美沙拉秦,研究组在对照组基础上采用加味芍药汤联合艾灸治疗。比较两组临床效果及中医症候积分、血常规(NLR、PLR)水平、肠道黏膜屏障功能[二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)和内毒素(ET)]。结果:治疗后两组总有效率比较,研究组(90.00%)高于对照组(70.00%,P<0.05);治疗后,中医症候积分比较两组均有所降低,且研究组低于对照组(P<0.05);治疗后,NLR、PLR水平比较,两组有所下降,且研究组低于对照组(P<0.05);治疗后,DAO、D-LA和ET水平比较,两组有所下降,且研究组低于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:“络病学说”指导艾灸联合加味芍药汤可有效减轻UC(湿热型)患者临床症状,提高治疗效果,降低炎症水平。

关键词： 多层螺旋CT   神经元特异性烯醇化酶   细胞角质蛋白19片段抗原21-1   周围型肺癌   转移  

摘要： 目的探讨多层螺旋CT(MSCT)联合血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)对周围型肺癌的诊断价值。方法选取60例周围型肺癌患者作为肺癌组,20例肺部良性肿瘤患者作为对照组。两组患者均经穿刺活检或手术病理检查确诊。比较肺癌组与对照组患者、转移与非转移肺癌患者MSCT征象和血清NSE、CYFRA21-1水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析MSCT联合NSE、CYFRA21-1对周围型肺癌的诊断价值。结果肺癌组患者血清NSE、CYFRA21-1水平及深分叶征、毛刺征比例均高于对照组,肿瘤直径大于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。MSCT、NSE、CYFRA21-1单独及联合检查均对周围型肺癌有诊断价值,其中联合检查的曲线下面积(AUC)最大。转移肺癌患者血清NSE、CYFRA21-1水平均高于非转移患者,肿瘤直径大于非转移患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论周围型肺癌患者MSCT影像多见明显恶性征象,肿瘤标志物NSE、CYFRA21-1异常增高,MSCT联合血清NSE、CYFRA21-1可有效鉴别诊断周围型肺癌与肺部良性疾病,但在转移患者中MSCT征象差异不明显。

关键词： 重症肺炎支原体肺炎   免疫球蛋白   T细胞亚群   补体   细胞因子   免疫制剂  

摘要： 近年来,肺炎支原体肺炎的发病率逐渐增加,儿童重症肺炎支原体肺炎的比例也呈上升趋势。重症肺炎支原体肺炎不仅引起严重的呼吸道症状,还常伴有肺外并发症,极大地危害儿童健康。免疫紊乱与重症肺炎支原体肺炎的发生、发展和预后密切相关,监测患儿的免疫指标有助于评估病情进展并制订合理的治疗方案。该文综述重症肺炎支原体肺炎的免疫功能变化及其临床意义,旨在为其早期识别和个体化治疗提供参考。

关键词： 妊娠晚期   B族溶血性链球菌   宫内感染   白细胞介素-1β   基质金属蛋白酶2   新生儿结局  

摘要： 目的探讨妊娠晚期B族溶血性链球菌(GBS)宫内感染患者血清白细胞介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达及其与新生儿结局的关系。方法采集2020年1月至2023年12月苏州大学附属第二医院140例妊娠晚期GBS宫内感染患者的资料,设为研究组;采集同期140例健康妊娠晚期孕妇的资料,设为对照组,两组入院时行血清IL-1β、MMP-2检查。比较两组血清IL-1β、MMP-2水平;分析血清IL-1β、MMP-2表达水平与患者不良新生儿结局的关系。结果妊娠晚期GBS宫内感染患者血清IL-1β、MMP-2水平均高于对照组(P<0.05)。140例患者发生不良新生儿结局41例,发生率为29.29%。不良结局组血清IL-1β及MMP-2水平均高于良好结局组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,妊娠晚期GBS宫内感染患者不良新生儿结局的发生与血清IL-1β、MMP-2水平表达上调有关(OR>1,P<0.05);血清IL-1β、MMP-2对患者发生不良新生儿结局存在交互作用。结论妊娠晚期GBS宫内感染患者的血清IL-1β、MMP-2表达异常上调可能提示新生儿不良结局风险。

关键词： 益精利浊法   慢性非细菌性前列腺炎   TNF-α   IL-8   NIH-CPSI评分  

摘要： 目的观察益精利浊法治疗慢性非细菌性前列腺炎(chronic non-bacterial prostatitis,CNP)临床效果及对前列腺液肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-ɑ,TNF-ɑ)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等的影响。方法选取2023年1月—2023年12月于该院进行治疗的CNP患者130例,随机分成对照组与治疗组,对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组的基础上增加益精利浊法治疗,观察比较两组患者疗效、前列腺液中炎症因子水平、美国国立卫生研究院慢性前列腺炎积分指数(National Institute of Health-Chronic Prostatitis Symptom Index,NIH-CPSI)评分以及不良反应发生情况。结果治疗组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后两组NIH-CPSI评分均有显著下降,治疗组更低(P<0.05)。治疗后两组IL-8、IL-1β、TNF-ɑ水平较治疗前有所下降,且治疗组更低(P<0.05)。治疗组与对照组不良反应总发生率分别为12.31%(8/65)与10.77%(7/65),差异无统计学意义(P>0.05)。结论益精利浊法治疗CNP患者疗效较好,能明显改善NIH-CPSI评分,调节炎症因子水平,且安全性较高。