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关键词： 维持性血液透析   中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白   中性粒细胞/淋巴细胞比值   甲状旁腺素   病原菌   预后  

摘要： 目的:探讨维持性血液透析(MHD)患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、甲状旁腺素(PTH)水平变化及并发感染病原菌分布和预后分析。方法:选取MHD患者189例为MHD组,按感染情况分为感染组(n=103)和非感染组(n=86),感染组依据预后情况分为预后良好组(n=78)和预后不良组(n=25),另选85例同期健康体检者为对照组。比较各组血清NGAL、NLR、PTH水平及病原菌分布情况,Logistic回归分析MHD患者预后不良的危险因素。结果:MHD组患者血清NGAL、NLR、PTH水平明显高于对照组(均P<0.05),感染组患者血清NGAL、NLR、PTH水平明显高于非感染组(均P<0.05)。103例感染患者共检出94株病原菌,以革兰阴性菌为主,革兰阴性菌、革兰阳性菌分别有59株(62.77%)、29株(30.85%),真菌6株,占比6.38%。与预后良好组比较,预后不良组患者糖尿病、多重耐药菌感染患者占比及血清NGAL、NLR、PTH水平明显升高(均P<0.05)。糖尿病、多重耐药菌感染、高血清NGAL、NLR、PTH水平是MHD患者预后不良的危险因素(均P<0.05)。结论:MHD患者血清NGAL、NLR、PTH水平明显升高,感染致病菌以革兰氏阴性菌为主,糖尿病、多重耐药菌感染、高血清NGAL、NLR、PTH水平是MHD合并感染患者预后不良的危险因素。

关键词： CD19/CD73   慢性淋巴细胞白血病   诊断   脾肿大   临床特征  

摘要： 目的:探讨CD19/CD73在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中的表达及与临床特征的相关性。方法:回顾性分析2022年1月至2023年11月我院收治的60例CLL患者以及40例同期健康志愿者(对照组)的临床资料,流式细胞术检测CLL患者外周血CD19、CD73的水平,并用Kaplan-Meier法对患者进行生存分析。结果:CLL组的血红蛋白、CD19/CD73均显著低于对照组,而CD19、CD73、β_(2)-MG显著高于对照组(均P<0.001)。经ROC曲线分析,CD19/CD73对CLL诊断的AUC值为0.980(95%CI:0.949-1.000,P<0.05),特异度为92.50%,敏感度为98.30%。脾肿大的CLL患者的CD19/CD73明显小于非脾肿大的患者(P<0.01)。CLL患者CD19/CD73与血红蛋白无显著相关性(r=0.056,P>0.05),与β_(2)-MG存在正相关性(r=0.837,95%CI:0.7402-0.8996,P<0.01)。根据CD19/CD73的中位数12.84将患者分为高、低表达两组,Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,低表达组18个月的总生存率和无进展生存率分别为87.08%、93.25%,高表达组分别为96.41%、99.90%,两组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:CD19/CD73在CLL患者机体中呈低水平,可作为CLL临床诊断的辅助指标,CD19/CD73与患者脾肿大密切相关,CD19/CD73低表达预示预后不良。

关键词： acrodermatitis continua   Hallopeau   nail   nail disorders   psoriasis   pustular psoriasis   pustules   treatment   ACH   acrodermatitis continua of Hallopeau   AIKD   autoinflammatory keratinization disease   GPP   generalized pustular psoriasis   IL   interleukin   PP   pustular psoriasis   PPP   palmo-plantar pustolosis   PsA   psoriatic arthritis   PV   psoriasis vulgaris   TNF- α   tumor necrosis factor-α  

摘要：

关键词： 活动性肺结核   γ干扰素诱导蛋白10   白细胞介素-2   单核细胞趋化因子-1   干扰素-γ  

摘要： 目的探讨γ干扰素诱导蛋白10(interferonγ-inducible protein-10,IP-10)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、干扰素-γ(interferon-γ,INF-γ)血液浓度检测在活动性肺结核(active tuberculosis,ATB)诊断中的应用。方法回顾性分析2023年11月~2024年11月在洪雅县中医医院就诊的110例ATB患者的临床资料作为观察组,另选择同期90例其他肺部疾病患者作为肺病组,60例健康体检者作为对照组。对比3组的IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ血液浓度,分析IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ与ATB的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线探讨IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ诊断ATB的价值。结果观察组的IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ高于肺病组、对照组(P<0.05);肺病组的IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ高于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ联合诊断ATB的效能(AUC:0.813,95%CI:0.784~0.842)优于IP-10(AUC:0.663,95%CI:0.645~0.681)、IL-2(AUC:0.627,95%CI:0.611~0.643)、MCP-1(AUC:0.721,95%CI:0.685~0.757)、INF-γ(AUC:0.734,95%CI:0.692~0.776)单一指标(P<0.05)。Logistic分析显示IP-10升高(OR:3.435,95%CI:1.874~4.996)、IL-2升高(OR:1.314,95%CI:1.264~6.178)、MCP-1升高(OR:3.691,95%CI:2.521~5.561)、INF-γ升高(OR:3.710,95%CI:1.584~5.836)是ATB发生的独立危险因素(P<0.05)。结论IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ在ATB中呈高表达,IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ水平升高为ATB发生的危险因素,将IP-10、IL-2、MCP-1、INF-γ联用于ATB诊断中能提高结果的准确性。

摘要：

关键词： 妊娠期糖尿病   社交行为   细胞因子  

摘要： 目的探究妊娠期糖尿病(GDM)对子代社交行为的影响。方法4周龄雌性SD大鼠,根据体重随机分为空白对照(CON)组和妊娠期糖尿病(GDM)组,各组孕鼠受孕后,GDM组采用高脂膳食(HFD)辅以小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg·bw)注射的方法建立疾病模型。各组孕鼠自然分娩,子代分别在分娩后第21天(PND 21,断乳)、PND 56(性成熟期)、PND 98(成年期)三个时期开展旷场实验(OFT)、高架十字迷宫实验(EPM)、新物体识别实验(NOR)和三箱社交实验(3-CST)来评估大鼠的社交行为,并在各个时期测定子代海马组织中的关键蛋白表达情况,以及白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-4、IL-6、IL-10等细胞因子浓度。结果与CON组相比:GDM雌性子代在PND 98的旷场实验自主活动得分显著降低(P<0.05);GDM雄性子代在PND 98的高架十字迷宫实验中,开放臂停留时间百分比显著降低(P<0.05)。新物体识别实验中GDM雌性子代在PND 21的新物体偏爱指数显著降低(P<0.05);三箱社交实验中,GDM雌性子代在PND 21和GDM雄性子代在PND 98的社交倾向指数显著降低(P<0.05);GDM雌雄子代在PND 98的社交新奇偏好指数也显著降低(P<0.05)。与CON组相比:GDM雌性子代在PND 21的p-ERK、p-CREB表达显著上调,BDNF表达显著下调(P<0.05),在PND 56的p-TrkB表达显著下调(P<0.05),在PND 98的p-ERK、BDNF表达显著下调(P<0.05);GDM雄性子代在PND 21的p-ERK表达显著上调(P<0.05),p-CREB表达显著下调(P<0.05),在PND 56的p-TrkB表达显著下调(P<0.05),在PND 98的p-ERK表达显著下调(P<0.05)。与CON组相比:GDM雌性子代在PND 21的海马IL-1β、IL-4、IL-6浓度显著下降(P<0.05),在PND 56的海马IL-6浓度显著升高(P<0.05),在PND 98的海马IL-4浓度显著降低,IL-10浓度显著升高(P<0.05);GDM雄性子代在PND 21的海马IL-4、IL-6、IL-10浓度显著下降(P<0.05),在PND 56的海马IL-1β、IL-10浓度显著升高(P<0.05),在PND 98的海马IL-4浓度显著降低,IL-6浓度显著升高(P<0.05)。结论GDM子代的社交行为在生命早期无明显改变,在成年期出现较为明显的社交障碍,且该种作用不具有明显的性别特异性。

摘要：

关键词： 型草鱼呼肠孤病毒   VP4蛋白   单个B细胞技术   单克隆抗体制备  

摘要： 【目的】Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)严重危害中国草鱼(Ctenoparyngodonidel-lus)养殖业的健康发展。本研究基于单个B细胞抗体制备技术平台,结合哺乳动物表达系统,旨在制备靶向GCRV-ⅡVP4蛋白的基因工程抗体。【方法】通过构建GCRV-ⅡVP4基因表达载体,在真核表达系统中制备重组VP4蛋白;将纯化后的重组蛋白作为免疫原多次免疫新西兰白兔,分离出脾脏单个抗原特异性记忆B细胞;随后通过聚合酶链式反应(PCR)扩增抗体可变区、恒定区基因片段,构建重组表达载体并转染HEK293F细胞进行单克隆抗体表达。最终通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫荧光分析(IF)评估抗体的抗原结合特性。【结果】通过对分离培养的单个B细胞上清液进行筛选,利用ELISA筛选出对VP4蛋白具有较好结合能力的三种B细胞克隆(1D5、1F9、1H1),并结合IF实验验证了其能结合病毒感染组织中的VP4抗原。进一步通过抗体重组表达获得了三株抗VP4重组单克隆抗体(1D5、1F9、1H1),其ELISA效价均达1∶128000。Westernblot分析结果显示,1D5、1F9和1H1单克隆抗体能特异性识别GCRV-YX246感染的脑细胞中65.4kDa的蛋白质条带,该分子量大小与病毒VP4蛋白理论分子量一致。IF实验结果也进一步证实1D5、1F9和1H1可特异性识别GCRV-YX246毒株感染的草鱼头肾组织切片中的病毒抗原。【结论】本研究成功制备并筛选出抗GCRV-ⅡVP4重组单克隆抗体,为GCRV-Ⅱ病毒快速诊断试剂盒的研发和VP4蛋白功能研究奠定基础。

关键词： 儿童急性淋巴细胞白血病   大剂量甲氨蝶呤   浓度监测   药代动力学   药物基因组学  

摘要： 儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是儿童较常见的恶性血液病,占儿童白血病的75%~80%。近年来,随着化疗方案优化和个体化治疗发展,儿童ALL的治愈率已达到80%~90%[1]。甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)是治疗儿童ALL的重要抗代谢药物之一,通过抑制二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR),阻断嘌呤和嘧啶的合成,从而抑制DNA合成和细胞增殖[2]。

关键词： 猪圆环病毒4型(PCV4)   Cap蛋白   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 【目的】通过原核表达系统表达猪圆环病毒4型(Porcine circovirus type 4,PCV4)衣壳蛋白(Cap),并制备其多克隆抗体,为PCV4的防控提供技术支撑。【方法】基于PCV4开放阅读框2(ORF2)基因的免疫原区域设计1对特异性引物,通过PCR扩增获得PCV4 ORF2基因序列,并将其连接至pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET-28a-ORF2;将经PCR和测序鉴定正确的重组质粒pET-28a-ORF2转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经1 mmol/L IPTG诱导表达重组Cap蛋白,利用SDS-PAGE分析诱导的重组蛋白产物。利用尿素纯化重组Cap蛋白并通过Western blotting鉴定;将纯化的重组Cap蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并进行Western blotting鉴定,应用间接ELISA法检测兔血清抗体效价。【结果】PCR扩增出大小为414 bp的PCV4 ORF 2基因片段,成功构建重组表达质粒pET-28a-ORF2。SDS-PAGE分析结果显示,诱导表达的重组Cap蛋白大小为16 ku;Western blotting结果表明制备的兔源多克隆抗体具有良好的免疫原性。间接ELISA检测显示,制备的兔血清抗体效价达1∶12800。【结论】本研究利用原核表达系统成功表达了PCV4 Cap蛋白并制备了多克隆抗体,试验结果为PCV4 Cap蛋白的深入研究以及后续开发PCV4基因工程亚单位疫苗、血清学诊断试剂等提供了物质基础。