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关键词： 化学发光免疫分析   细胞因子   精密度   正确度   线性区间   参考区间   方法学比对  

摘要： 目的:评估KunLun i6800全自动化学发光免疫分析仪定量检测细胞因子的性能。方法:依据相关实验室质量管理标准的规定,运用KunLun i6800全自动化学发光免疫分析仪及其配套试剂,针对白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-2受体(IL-2R)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)展开定量分析,对检测系统结果在精密度、正确度、线性区间、检出限、可报告范围以及参考区间等性能维度进行评价。特别针对白细胞介素-6(IL-6)的定量检测数据结果,与参比系统进行方法学比对。结果:在对上述六种细胞因子(IL-1β、IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α)进行定量检测时,KunLun i6800全自动化学发光免疫分析仪在精密度、正确度、线性区间、检出限、可报告范围、参考区间这些性能方面的表现,均与厂家声明以及相应标准的要求契合。该系统针对IL-6的检测结果数据与参比系统相比,二者相关系数高达R 2=0.9954,远超R 2≥0.95的标准,展现出了高度的一致性。结论:KunLun i6800全自动化学发光免疫分析仪在对上述细胞因子进行定量分析时,其检测性能与厂家声明相符,能够充分满足临床检测的要求。

关键词： 下呼吸道感染   肺炎支原体   C-反应蛋白   降钙素原   白细胞介素-6  

摘要： 目的探讨下呼吸道肺炎支原体感染患者血清CRP、PCT、IL-6水平变化及临床意义。方法选择河源市源城区人民医院2023年5月—2024年5月收治的50例下呼吸道肺炎支原体感染患者作为研究对象,纳入试验组;根据病情严重程度将试验组患者分为轻症组(35例)和重症组(15例);另外选择同期50例在该院参与体检的健康体检者纳入对照组。使用电化学发光免疫分析仪检测白细胞介素-6(IL-6),采用免疫比浊法测定C-反应蛋白(CRP),使用电化学发光免疫分析仪测定降钙素原(PCT);比较试验组和对照组以及不同病情严重程度下呼吸道肺炎支原体感染患者上述指标的水平差异。结果试验组的CRP、PCT、IL-6水平均显著高于对照组〔CRP(mg/L):8.17±0.94比3.52±0.44;PCT(ng/L):2.04±0.34比0.45±0.11;IL-6(μg/L):49.42±5.45比21.36±2.58;均P<0.05〕;重症组患者的CRP、PCT、IL-6水平均显著高于轻症组〔CRP(mg/L):8.27±0.92比7.24±0.76;PCT(ng/L):2.14±0.26比1.95±0.21;IL-6(μg/L)50.59±5.67比43.25±4.67;均P<0.05〕。结论下呼吸道肺炎支原体感染患者进行CRP、PCT、IL-6水平检测可为疾病诊断和病情严重程度评估提供一定参考依据,值得在临床推广应用。

关键词： 重症肺炎   中性粒细胞   淋巴细胞   血红蛋白  

摘要： 目的对比分析不同免疫炎症参数对重症社区获得性肺炎(severe community-acquired pneumonia,SCAP)不良结局的预测价值。方法选取2021年5月至2024年4月郑州大学第二附属医院收治的196例重症肺炎患者作为研究对象,根据28d住院结局分为预防良好组(n=107)与预后不良组(n=89),收集实验室指标并计算中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、NLR与血红蛋白比值(NLR to hemoglobin ratio,NLR/Hb)等炎症指标。采用Logistic回归分析SCAP预后不良的独立危险因素,并构建回归模型。使用受试者操作特征曲线评价NLR/Hb对SCAP发生预后不良的诊断效能。结果预防良好组患者住院期间NLR均高于预后不良组。预防良好组血红蛋白(hemoglobin,Hb)均高于预后不良组,且入院患者的Hb值整体呈下降趋势。预防良好组患者住院期间血小板计数(platelet,PLT)值整体呈升高趋势,预后不良组则呈下降趋势。NLR/Hb 7d在多模型的多因素Logistic回归分析表现的最为稳定(P<0.001)。将有差异的指标纳入多因素Logistic回归模型中,结果显示NLR/Hb 7d、D-二聚体、有创机械通气是预后不良的危险因素,血小板计数7d是预后不良的保护因素(P<0.05)。结论临床动态监测血常规十分必要,NLR/Hb有望成为判断重症肺炎患者预后不良的有效指标。

关键词： 单克隆抗体   单抗药物的制备   单抗药物的质量控制  

摘要： 相较传统药物而言,单抗药物以其出色的特异性脱颖而出。它不仅能够特异性地识别并结合目标抗原,精准地定位到病变部位,还能针对特定的疾病过程进行干预,减少药物对其他部位的损伤,降低其副作用。单抗药物在疾病预防和治疗中扮演着重要角色,其结构功能独特,制备流程严谨,安全性得到广泛认可。本文介绍了单抗药物的结构功能以及制备流程等内容,并着重论述了单抗药物在治疗肿瘤疾病、自身免疫疾病和感染性疾病方面的贡献。

关键词： PRRSV   抗原   抗体   细胞因子   复方中药  

摘要： 为了考察替米考星联合复方中药对母猪蓝耳病的治疗效果,本试验选择福建省莆田市某猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)阳性猪场,将3栋PRRS阳性猪舍分为3组(对照组、试验Ι组、试验Ⅱ组),每组80头,共240头。试验Ι组、试验Ⅱ组母猪分别给予低剂量复方中药提取物+替米考星、高剂量复方中药提取物+替米考星,从产前21 d连续拌料饲喂至分娩。统计试验组母猪的生产性能,包括发病率、死亡率、产仔率等。于给药前和给药结束后,分2次对母猪采血,分娩后采集仔猪脐带血,测定母猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原、抗体、细胞因子(IL-6、IL-1β、IL-10、TNF-α)以及氧化应激因子(MDA、SOD、GSH-Px)水平,并通过qPCR方法检测仔猪脐带血中PRRSV载毒量。结果显示,试验Ⅱ组母猪发病率和死亡率低于对照组,分娩率、产仔数和健仔数高于对照组,但均差异不显著(P>0.05);试验Ⅱ组母猪抗原阳性率和抗体(PRRSV N蛋白抗体)离散度低于对照组(P>0.05);试验Ⅱ组母猪血清中IL-6(P<0.01)、IL-1β(P<0.05)、TNF-α(P<0.05)水平均显著或极显著低于对照组,IL-10(P<0.05)、SOD(P<0.01)和GSH-Px(P<0.01)水平均显著或极显著高于对照组;仔猪脐带血中均未检测出PRRSV。综上所述,替米考星联合复方中药可更好改善母猪的生产性能,降低PRRSV载量和促炎细胞因子含量,从而防止由PRRSV引起的继发感染和细胞因子风暴。

关键词： Ferritin   IL-10   IL-6   umbilical cord   vitamin D  

摘要： A worldwide issue, vitamin D deficiency affects pregnant mothers and babies everywhere, including Indonesia. It involves the adaptive immune system by controlling the production of pro-and anti-inflammatory cytokines and the balance between humoral (Th2) and cell-mediated (Th1) immunity. The aim of this study was to investigate the relationship between vitamin D and the cytokines IL-6 and IL-10 in infants. It also examined the relationship between ferritin and IL-6/IL-10 in newborns. The study collected 114 umbilical cord blood samples from term-born mothers without clinical symptoms. IL-6 and IL-10 were among the cytokine profiles measured by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). SPSS was used for statistical analysis, and an in-silico investigation was carried out to examine the molecular relationships between vitamin D and IL-6/IL-10. Using the 20 ng/mL as the cut-off for vitamin D insufficiency suggested the insignificant association of vitamin D with IL-6 (p=0.42), IL-10 (p=0.76), and ferritin (p=0.47). When the umbilical cord vitamin D level was categorized into four quartiles, the association with the highest statistical significance (quartile 4 versus quartile 2) was observed for IL-6 (p<0.001), IL-10 (p<0.001), and ferritin (p<0.001). However, the linear regression did not suggest the significant correlations of vitamin D with IL-6 (p=0.40) and IL-10 (p=0.45). A significant correlation based on the linear regression was found between ferritin and IL-10 (p=0.03). Molecular docking studies demonstrated binding affinities of-8.04 kcal/mol for IL-6-vitamin D and-8.53 kcal/mol for IL-10-vitamin D complexes, with stable root mean square deviation throughout the simulations. This study contributes valuable insights into the clinical and computational analysis of the relationship of vitamin D with IL-6 or IL-10. © 2024, Narra Sains Indonesia. All rights reserved.

关键词： 直肠癌   新辅助治疗   淋巴细胞亚群   疗效预测  

摘要： 目的探讨直肠癌新辅助治疗对患者外周血淋巴细胞亚群绝对数和百分比的影响, 及淋巴细胞亚群与新辅助治疗效果的关系。方法回顾性分析2020年1月1日至2023年12月31日就诊于复旦大学附属肿瘤医院的局部晚期直肠癌患者外周血淋巴细胞亚群检测结果。入组患者均进行术前新辅助治疗[短程放疗序贯PD-1(程序性死亡受体1)单抗联合Xelox化疗4个疗程], 在治疗前和新辅助治疗结束后都采用流式细胞术检测外周血中淋巴细胞各亚群(CD3^(+)T、CD4^(+)T、CD8^(+)T、B、NK)的绝对数和比例(%)以及CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞(Treg)占CD4^(+)T细胞的百分比(CD4^(+)Treg%)、功能性CD8^(+)T占总T细胞的百分比(CD8^(+)CD28^(+)T%)。根据上述条件共有58例患者符合要求, 并在完成新辅助治疗后, 根据临床或病理诊断进行疗效判断, 分为完全缓解(CR)组和非CR组, CR组男20例, 女7例, 年龄(52.89±9.95)岁;非CR组男17例, 女14例, 年龄(57.26±11.05)岁。采用配对t检验比较分析淋巴细胞各亚群在新辅助治疗前后的变化, 通过两样本独立t检验分析CR组和非CR组各淋巴细胞亚群治疗后变化程度和治疗前基础水平的差异, 并通过受试者工作特征(ROC)曲线评估相关亚群的基础水平对直肠癌患者新辅助治疗疗效的预测效能。把应用相同治疗方案但仅有治疗前淋巴细胞各亚群基础水平的患者(n=104)作为验证组, 分析相关预测指标的符合率。结果与新辅助治疗前比较, 治疗后所有患者CD3^(+)T、CD4^(+)T、CD8^(+)T、B、NK细胞绝对数均减少(P<0.05), CD8^(+)T%和NK%均升高(P<0.05), B%下降(P<0.05), CD3^(+)T%、CD4^(+)T%、CD4^(+)Treg%和CD8^(+)CD28^(+)T%差异无统计学意义, 上述变化与疗效无关, 但CR组患者新辅助治疗前CD3^(+)T、CD4^(+)T、CD8^(+)T绝对数, CD3^(+)T%、CD8^(+)T%以及CD8^(+)CD28^(+)T%高于非CR组患者(P<0.05)。ROC曲线分析显示, 上述疗效相关指标治疗前基础值预测直肠癌患者新辅助治疗完全缓解与否的曲线下面积(AUC)分别为0.838、0.756、0.839、0.659、0.702、0.858;其中, CD3^(+)T绝对数联合CD8^(+)CD28^(+)T%检测的AUC为0.886, 敏感度和特异度分别为81.5%和90.3%。在验证组中, 上述预测指标的阳性符合率为69.4%~97.5%, 阴性符合率为69.8%~84.4%。结论直肠癌新辅助治疗影响淋巴细胞的组成比, 使具有抗肿瘤效应的免疫细胞比例增加, 且可通过患者治疗前的淋巴细胞亚群数量和组成比预测新辅助治疗的疗效。

关键词： DHAV-3   单克隆抗体   DAS-ELISA   3D蛋白   检测方法  

摘要： 为实现鸭甲型肝炎病毒3型(DHAV-3)的快速检测,本试验首先对DHAV-3的非结构蛋白3D进行原核表达,纯化后免疫BALB/c小鼠,四免后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合制备单克隆抗体,进而利用单克隆抗体建立双抗夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,评估其灵敏性、特异性和重复性,最后将所建方法应用于临床样本的检测,并与RT-PCR方法进行符合性验证。结果显示:DHAV-33D蛋白在BL21(DE3)中高效表达,经Western blot验证,纯化后的蛋白其特异性良好;细胞融合后经3次亚克隆,成功筛选到6株杂交瘤细胞,分别命名为1A3、1B6、1C7、1D9、2A1和3A9,抗体亚型鉴定结果显示1A3为IgG2b,1B6为IgG2a,3A9为IgG3,1C7、1D9和2A1均为IgG1;经筛选,将1B6和1A3两株亲和性高的单抗分别作为捕获抗体与检测抗体,建立DAS-ELISA检测方法,优化反应条件后确定捕获抗体1B6最佳包被质量浓度为1×10^(-3) g/L,检测抗体1A3的最佳稀释度为1∶1000,阴阳临界值(cut-off)为0.256;灵敏性试验显示该方法对3D蛋白的最低检测限度为4.0×10^(-4) g/L;重复性试验显示,该方法批内、批间变异系数(Cv)均小于9%,重复性好;特异性试验显示,该方法对鸭腺病毒(DAdV)、番鸭细小病毒(MDPV)、鸭圆环病毒(DuCV)、鸭瘟病毒(DPV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、鸭疫里默氏杆菌(RA)病原无特异性反应,但与鸭甲型肝炎病毒1型(DHAV-1)具有交叉反应,可以同时检测出DHAV-3与DHAV-1病原;应用该试验建立的DASELISA方法与RT-PCR检测方法同时对186份临床样本进行检测,DAS-ELISA方法可同时识别DHAV-1和DHAV-3,且与RT-PCR检测方法的符合率为98.9%。结果表明,本试验建立的DAS-ELISA方法重复性好、灵敏性高,可用于DHAV-1与DHAV-3的诊断,为我国鸭甲型肝炎的流行病学调查及防控提供了技术支撑。

关键词： 肺癌   PCT   IL-6   CYFRA21-1   SCCA   Pro-GRP   CEA   联合检测  

摘要： 目的分析细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)、癌胚抗原(CEA)、降钙素原(PCT)和白细胞介素(IL)-6联合检测对肺癌诊断的临床价值。方法选取本院90例肺癌患者为肺癌组,90例肺部良性疾病患者为对照组和90例健康体检者为健康组。比较各组血清CYFRA21-1、Pro-GRP、SCCA、CEA、CRP、PCT和IL-6水平。采用多因素Logistic回归分析肺癌发生的影响因素。ROC曲线分析CYFRA21-1、SCCA、Pro-GRP、CEA、PCT和IL-6单独检测和联合检测对肺癌的诊断效能。结果肺癌组CYFRA21-1、Pro-GRP、SCCA、CEA、CRP、PCT和IL-6水平高于健康组或对照组(P<0.05)。肺癌组不同病理分型(肺腺癌、肺鳞癌和小细胞肺癌)CYFRA21-1、SCCA、Pro-GRP、CEA、PCT和IL-6水平差异无显著性(P>0.05)。C YFRA21-1、Pro-GRP、SCCA、CEA、PCT、IL-6是肺癌发生的影响因素。CYFRA21-1、SCCA、Pro-GRP、CEA、PCT和IL-6联合检测的阳性率和AUC均优于单一指标检测。结论血清CYFRA21-1、SCCA、Pro-GRP、CEA、PCT和IL-6联合检测对肺癌具有较高的诊断价值。

关键词： 人类免疫缺陷病毒   结核分枝杆菌   降钙素原   C反应蛋白   CD4^(+)T淋巴细胞  

摘要： 目的:探讨降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)及CD4^(+)T淋巴细胞水平在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者结核分枝杆菌(Mycobaterium tuberculosis,MT)感染早期诊断中的应用价值。方法:选取2021年1月—2024年5月常州市第三人民医院收治的69例HIV感染患者为研究对象,根据是否合并MT感染分为单纯HIV感染组(n=35)和HIV合并MT感染组(n=34)。检测两组患者的PCT、CRP及CD4^(+)T淋巴细胞水平,比较两组以上指标的差异,并对HIV合并MT感染患者的以上指标进行相关性分析。通过受试者操作特征(ROC)曲线评估PCT、CRP及CD4^(+)T淋巴细胞水平在MT感染早期诊断中的效能。结果:HIV合并MT感染组的PCT、CRP水平均显著高于单纯HIV感染组,CD4^(+)T淋巴细胞水平显著低于单纯HIV感染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HIV合并MT感染患者中,PCT与CRP水平呈显著正相关(rs=0.607,P<0.001),CD4^(+)T淋巴细胞水平与PCT、CRP均呈负相关(rs=-0.751、-0.700,P<0.001)。ROC曲线分析显示,PCT、CRP及CD4^(+)T淋巴细胞联合检测MT感染的曲线下面积(AUC)为0.911,特异度为97.1%,均显著高于单独检测。结论:PCT、CRP及CD4^(+)T淋巴细胞水平的联合检测在HIV患者MT感染的早期诊断中有较高价值。