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关键词： 量子点   免疫荧光技术   过敏原   特异性抗体   体外诊断  

摘要： 目的 探讨基于量子点免疫荧光技术的过敏原特异性IgE抗体快速检测方法的灵敏度、特异性。方法 实验以125例临床血清样本(过敏原特异性IgE抗体阳性患者65例,过敏原特异性IgE抗体阴性患者60例)为研究对象,采用量子点免疫荧光技术检测不同浓度过敏原特异性IgE抗体的荧光信号强度,测定荧光信号强度与IgE抗体浓度的相关性,评估方法的灵敏度、特异性及检测结果一致性。结果 荧光信号强度与IgE抗体浓度呈正相关,过敏原特异性IgE抗体阳性组相关系数r为0.556~0.678,过敏原特异性Ig E抗体阴性组相关系数r为0.375~0.922。检测灵敏度达到100%,特异性为100%。结论 基于量子点免疫荧光技术的过敏原特异性IgE抗体检测方法具有灵敏度高、特异性好、检测限低的显著优势,为过敏性疾病的诊断和个体化治疗提供了精准可靠的技术路径,具备广阔的临床应用前景。

关键词： 细胞因子IL-2   肿瘤   免疫   动力学模型   基本再生数  

摘要： 患者在接受白细胞介素-2(IL-2)免疫疗法时会经常出现一定的副作用,这些副作用不仅影响了治疗效果,而且对患者生命产生了严重的威胁。为了探究IL-2对免疫系统杀伤肿瘤细胞的影响,建立了一类包含细胞因子IL-2的肿瘤-免疫动力学模型。计算了模型的无肿瘤平衡点和基本再生数,并从数值上刻画了模型的动力学性态。数值模拟结果表明:IL-2诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CD8+T细胞)的增殖分化是免疫系统更有效地杀伤肿瘤细胞的主要原因;IL-2诱导的CD8+T细胞增殖率的增加虽然会促进免疫细胞更快地发挥作用但同时也会增加肿瘤复发的几率;过多IL-2的存在反而会促进肿瘤的生长。本文通过大量的数值模拟表明,对癌症患者进行IL-2免疫疗法时,存在IL-2注射的最佳剂量。然而,肿瘤细胞的种类纷繁复杂,针对不同的肿瘤细胞,选取不同的参数进行模拟,才会得出更具有现实意义的结论。

关键词： 急性髓性白血病   T淋巴细胞亚群   复发   危险因素  

摘要： 目的 分析急性髓性白血病(AML)患者T淋巴细胞亚群表达水平及其与疾病复发的关系。方法 选择2020年1月至2023年1月在河南科技大学第一附属医院就诊的88例AML患者为研究对象,随访1年,根据是否复发分为未复发组(n=48)与复发组(n=40)。比较两组T淋巴细胞亚群指标,Logistic回归分析AML复发的危险因素,绘制受试者工作曲线(ROC),分析T淋巴细胞亚群指标对AML复发的预测效能。结果 复发组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均低于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05),复发组CD8^(+)与未复发组比较,差异未见统计学意义(P>0.05)。CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、慢性移植物抗宿主病、血小板计数、白细胞计数是AML复发的危险因素(P<0.05)。CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)联合预测AML复发的AUC为0.859,95%CI为0.812~0.938,CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)联合预测AML复发的灵敏度(93.08%)高于单独检测(76.82%、70.34%、64.36%),差异有统计学意义(P<0.05),联合检测的特异度(80.32%)与单独检测(80.43%、82.26%、78.86%)比较,差异未见统计学意义(P>0.05)。结论 AML复发与CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)降低联系密切,联合检测CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)可提高对AML复发的预测灵敏度。

关键词： 心肺转流术   心脏手术   小剂量甘露醇   心脏保护   炎症标志物   心肌损伤  

摘要： 目的:探讨小剂量甘露醇缓慢静脉滴注对心肺转流术(CPB)心脏术后心肌肌钙蛋白T(cTnT)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平的影响,以评估该治疗策略对减轻术后不良反应的有效性。方法:将2020年6月至2022年3月新乡医学院第三附属医院就诊的71例接受CPB心脏手术患者纳入研究。患者随机分为对照组和试验组,对照组采用常规治疗,试验组在常规治疗基础上采用小剂量甘露醇静脉滴注治疗。比较2组患者术后不同时间点cTnT、CRP、TNF-α、IL-6水平。结果:2组患者cTnT、CRP、TNF-α和IL-6在术后均呈现先升高后降低的趋势,达到峰值的时间分别为术后36 h、术后2 d、术后6 h和术后12 h,组间比较、时间效应和变化趋势差异均有统计学意义(P<0.05);试验组各指标的峰值水平更低,且下降速度更快。结论:小剂量甘露醇缓慢静脉滴注能有效降低CPB心脏术后cTnT、CRP、TNF-α、IL-6水平,减轻术后不良反应,具有临床推广价值。

关键词： 乙型脑炎病毒   三结构域蛋白25   固有免疫   抗病毒作用  

摘要： 目的研究三结构域蛋白25(tripartite motif-containing protein 25,TRIM25)对细胞中乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)复制的抑制作用及机制。方法JEV感染人神经胶质瘤细胞(U251细胞)和昆明种小鼠,采集细胞和小鼠脑组织样本,real-time PCR检测6种TRIM基因的转录水平,Western blot检测细胞中TRIM25蛋白的表达。构建TRIM25过表达U251细胞和A549细胞,TRIM25基因敲除U251细胞。JEV感染细胞后,用病毒蚀斑试验、real-time PCR和Western blot检测JEV的复制。real-time PCR和ELISA检测过表达TRIM25细胞IFN-β的水平。用免疫共沉淀(Co-IP)与间接免疫荧光试验研究TRIM25与病毒蛋白的相互作用。结果JEV感染上调细胞与小鼠脑组织中TRIM25的表达。TRIM25过表达抑制了JEV在U251和A549细胞中的复制,敲除TRIM25促进了JEV的复制。TRIM25过表达可上调细胞中IFN-β的水平。TRIM25与JEV的衣壳蛋白相互作用,并促使衣壳蛋白降解。结论TRIM25蛋白可以通过上调IFN-β和促使JEV衣壳蛋白降解来抑制细胞中JEV的复制。

关键词： 早发性卵巢功能不全   自身抗体   细胞因子   淋巴细胞亚群   自身免疫性疾病  

摘要： 早发性卵巢功能不全(POI)是女性提前出现卵巢功能衰退,不仅降低了患者的生育能力,同时还带来一系列更年期临床症状,对女性的生殖和心理健康产生不良的影响。半数以上的POI患者病因不明,自身免疫性疾病、遗传、压力等因素都可能成为致病因素,其中自身免疫性因素在POI患者中占比较高,值得我们的重视。研究表明,自身免疫性抗体的产生、促炎因子和抗炎因子的失衡、淋巴细胞的紊乱都在POI的发病中起着关键作用,且POI可能与某些自身免疫性疾病相关,例如自身免疫性艾迪生病、自身免疫性多内分泌腺病综合征等。目前POI的免疫学干预等治疗方法仍在积极探索中,本文通过总结近年来POI与自身免疫的相关研究,希望为POI的生殖免疫机制提供参考,为临床治疗开拓思路。

关键词： 念珠菌病   甘露聚糖   磁微粒化学发光法   单克隆抗体  

摘要： 建立一种检测念珠菌甘露聚糖(mannan,Mn)的磁微粒化学发光法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay,MPCLIA):采用念珠菌Mn作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体;使用全自动化学发光分析仪,应用双抗体夹心法,在反应体系中形成链霉亲和素-磁微粒-生物素标记抗体-念珠菌Mn-吖啶磺酰胺标记抗体复合物,建立检测念珠菌Mn的MPCLIA。结果表明,空白限(limit of blank,LoB)为2.0 pg/mL,检出限(limit of detection,LoD)为5.0 pg/mL;线性范围10.0~1000.0 pg/mL;可重复性和精密度实验变异系数均小于10%;回收率85%~115%。在检测样本中添加血红蛋白、胆红素或甘油三酯浓度分别为7 mg/mL、300 mg/L和7.5 mmol/L时,对检测结果没有显著影响。该方法与临床诊断结果有较好一致性(κ值为0.79)。该研究建立的念珠菌Mn MPCLIA已达到体外诊断试剂的质量标准,积累足够样本数据后,有望成为念珠菌病的免疫学快速检测方法。

关键词： 白纹伊蚊   rAlb-34kDa-1蛋白   2型登革病毒   免疫调控  

摘要： 目的 探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞(Raw264.7)的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒(Dengue virus type 2,DENV-2)复制的影响。方法 将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入大肠埃希菌(***)BL21(DE3)后,按实验室前期建立的表达纯化条件获取唾液蛋白并通过SDS-PAGE及Western Blot(WB)方法鉴定;以CCK8法分析rAlb-34kDa-1蛋白对Raw264.7细胞的毒性。将0.02、0.20和2.0μg/mL浓度rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞6、12和24 h,采用实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR, qRTPCR)检测细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、趋化因子配体2(chemokine ligand 2, CCL2)、干扰素-β(interferon-β, IFN-β)、干扰素刺激基因15(interferon stimulated gene 15, ISG15)的表达,运用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞培养上清IL-6和TNF-α的分泌;免疫荧光法观察rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞后p65进入细胞核的情况,分析rAlb-34kDa-1蛋白是否通过NF-κB信号通路实现对Raw264.7细胞的免疫调控;按分组(DENV-2作用组、唾液蛋白+DENV-2共孵育组)加不同的处理因素作用6、12和24 h后收集细胞,利用qRT-PCR检测细胞内DENV-2的mRNA表达量及运用流式细胞术(FCM)检测不同处理因素作用24 h细胞内J2(dsRNA)的荧光强度。结果 SDS-PAGE及WB结果显示成功获得rAlb-34kDa-1蛋白且经CCK8法分析该蛋白对Raw264.7细胞无毒性;0.2μg/mL和2.0μg/mL的rAlb-34kDa-1均能诱导Raw264.7细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL2、IFN-β、ISG15的表达;rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞1 h后显著增强Raw264.7细胞核内的p65的荧光强度;rAlb-34kDa-1与DENV-2作用于Raw264.7细胞12 h时,2μg/mL的rAlb-34kDa-1显著增强细胞中DENV-2的mRNA表达量。作用24 h时,0.02、0.20和2μg/mL的rAlb-34kDa-1均能增强Raw264.7细胞中DENV-2的mRNA表达量,2μg/mL的rAlb-34kDa-1与DENV-2共孵育于Raw264.7细胞24h后细胞内J2的荧光信号显著增强。结论 rAlb-34kDa-1蛋白能调节小鼠Raw264.7细胞免疫应答,促进DENV-2在Raw264.7细胞中复制。

关键词： IL-6   冠心病   高尿酸血症   肾衰宁胶囊  

摘要： 冠心病是全球范围内导致死亡和致残的主要原因之一,其发病率和死亡率在过去几十年中持续上升。据世界卫生组织(WHO)2021年的报告,心血管疾病每年导致约1 790万例死亡,占全球总死亡人数的32%^([1])。在中国,冠心病的发病率同样呈现快速增长趋势,2019年《中国心血管健康与疾病报告》显示,中国冠心病患者人数已超过1 100万^([2])。与此同时,高尿酸血症作为一种由嘌呤代谢紊乱引起的慢性代谢性疾病,其患病率在全球范围内逐年增加。