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关键词： 中国花鲈   IgMH   MHCⅡβ   表达调控   蛋白纯化  

摘要： 【目的】进一步了解中国花鲈适应性免疫机制在病害防治中的作用。【方法】本研究通过荧光定量PCR(RT-PCR)和快速扩增c DNA末端(RACE)技术克隆获得了免疫球蛋白M重链(IgMH)和主要组织兼容性复合体MHC Ⅱβ基因的全长;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测其在中国花鲈各组织的分布情况以及LPS、Poly(I:C)刺激及迟缓爱德华氏菌人工感染后其对应mRNA水平的表达变化情况;实验构建了IgMH-pET21d、IgMCH1-2-pET21d和MHCⅡβ-pET21d原核重组表达质粒,进行重组蛋白表达,并通过分子筛层析技术纯化中国花鲈IgMH、IgMCH1-2和MHCⅡβ重组蛋白,进而制备了抗中国花鲈IgMH的多克隆抗体。【结果】中国花鲈IgMH和MHCⅡβ的cDNA全长分别为1977 bp和1242 bp;二者在鳃、脾脏和头肾等免疫相关组织中对应mRNA表达量较高;LPS、Poly(I:C)刺激及迟缓爱德华氏菌人工感染中国花鲈导致鳃、脾脏和头肾中这两个基因的表达水平发生显著变化,表明IgMH和MHCⅡβ均参与了中国花鲈的抗感染免疫反应;此外,抗中国花鲈IgM的多克隆抗体能与中国花鲈全血清发生强烈反应,与鳜全血清弱反应,与大口黑鲈和草鱼血清不发生反应,推测其反应强度反映了物种间亲缘关系的远近。【结论】本研究首次克隆了中国花鲈的IgMH和MHCⅡβ基因全长,表达了IgMH和MHCⅡβ原核重组蛋白,制备了抗中国花鲈IgM的多克隆抗体,揭示了IgMH和MHCⅡβ参与中国花鲈的抗感染免疫应答,为深入研究中国花鲈的免疫调控机制和疾病防控策略奠定了基础。

关键词： 肾移植   肾功能延迟恢复   淋巴细胞   滤泡辅助性T细胞   血肌酐  

摘要： 目的探讨外周血CD4^(+)T淋巴细胞亚群与肾移植受者肾功能延迟恢复(DGF)及近期预后的相关性,以期帮助优化肾移植术前评估并为DGF免疫机制研究提供参考。方法回顾性分析2022年6月—2023年10月于苏州大学附属第一医院进行肾移植的103例受者的临床资料。最终纳入61例受者,根据术后肾功能恢复情况分为DGF组(20例)和肾功能正常恢复(IGF)组(41例)。采用流式细胞术检测受者肾移植术后第7天外周血中两组CD4^(+)T淋巴细胞亚群的比例和绝对值,比较两组受者临床资料及外周血淋巴细胞亚群差异;针对存在差异的亚群,进一步分析在DGF组受者中,外周血Tfh及PD-1+Tfh细胞亚群比例和绝对值与术后第7天血肌酐(Scr)水平的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC),评估与术后第7天Scr水平相关性最强的CD4^(+)T淋巴细胞亚群的比例及绝对值对近期肾功能的预测效能。结果DGF组和IGF组的Th1、Th2、Th17和调节性T细胞(Treg)等细胞的比例和绝对值比较差异无统计学意义(P>0.05);DGF组滤泡辅助性T细胞(Tfh)及PD-1+Tfh细胞的比例及绝对值均高于IGF组(P<0.0001)。DGF组较IGF组术后1个月及1年的Scr水平更高(P<0.01)、估算肾小球滤过率(eGFR)更低(P<0.01,P=0.02)。Spearman相关性分析显示:DGF组受者Tfh及PD-1+Tfh细胞亚群比例和绝对值与肾移植术后第7天Scr水平呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,PD-1+Tfh细胞比例预测受者术后1个月Scr、eGFR的AUC分别为0.73(95%CI:0.61~0.86)、0.75(95%CI:0.62~0.88),预测受者术后1年Scr、eGFR的AUC分别为0.72(95%CI:0.59~0.86)、0.70(95%CI:0.58~0.83)。结论Tfh及PD-1+Tfh细胞比例及绝对值升高与肾移植受者术后DGF有关,PD-1+Tfh细胞比例可能有助于预测受者近期肾功能。

关键词： herpes zoster   nemolizumab   prurigo nodularis   pruritus   IL   interleukin   PN   prurigo nodularis  

摘要： Chest of patient 1: clearance after 2 months of nemolizumab therapy. Left arm of patient 2: prurigo nodularis before nemolizumab therapy. Left arm of patient 2: complete response after 2 months of nemolizumab therapy. Introduction Prurigo nodulari...

关键词： 无痛诊疗技术   儿童   急性淋巴细胞白血病   生存质量  

摘要： 目的研究无痛诊疗技术对儿童急性淋巴细胞白血病患者生存质量的影响。方法选取2021年7月至2024年2月江西省儿童医院收治的200例儿童急性淋巴细胞白血病患者作为研究对象,采用随机数字表法分为传统组(100例)和无痛组(100例)。传统组采用传统方法治疗,无痛组采用无痛诊疗技术治疗。比较两组的儿童生存质量评价量表4.0(PedsQL 4.0)、儿童生存质量评价量表3.0(PedsQL 3.0)评分。结果两组实施前的生理、心理、社会、学校角色领域PedsQL 4.0评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);无痛组实施后的生理、心理、社会、学校角色领域PedsQL 4.0评分高于实施前,差异有统计学意义(P<0.05),无痛组实施后的生理、心理、社会、学校角色领域PedsQL 4.0评分高于传统组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组实施前的疼痛和伤害、操作焦虑、治疗焦虑、担心、认知问题方面PedsQL 3.0评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);无痛组实施后的疼痛和伤害、操作焦虑、治疗焦虑、担心、认知问题方面PedsQL 3.0评分高于实施前,差异有统计学意义(P<0.05);无痛组实施后的疼痛和伤害、操作焦虑、治疗焦虑、担心、认知问题方面PedsQL 3.0评分高于传统组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论无痛诊疗技术可提高急性淋巴细胞白血病儿童患者生存质量,值得推广应用。

关键词： 自身免疫性脑炎   甲泼尼龙   利妥昔单抗   免疫球蛋白   倾向性评分匹配法  

摘要： 目的 对比甲泼尼龙分别联合利妥昔单抗和免疫球蛋白治疗自身免疫性脑炎的疗效。方法选取2021-03—2024-10聊城市人民医院收治的100例自身免疫性脑炎患者为研究对象,分为利妥昔单抗组和免疫球蛋白组,各50例。利妥昔单抗组采用甲泼尼龙联合利妥昔单抗治疗,免疫球蛋白组采用甲泼尼龙联合免疫球蛋白治疗。采用倾向性评分匹配法平衡组间混杂因素,最终纳入利妥昔单抗组42例,免疫球蛋白组42例。观察2组疗效,使用简易精神状态检查量表(MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)对患者进行评估,对比2组患者治疗前后细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]、T细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))变化,统计不良反应发生情况。结果倾向性评分匹配分析后共42对匹配成功。免疫球蛋白组总有效率高于利妥昔单抗组(97.62%比83.33%,P<0.05)。治疗后,2组患者MMSE及MoCA评分均升高,免疫球蛋白组高于利妥昔单抗组(P<0.05);2组患者TNF-α、IFN-γ、NSE水平均下降,免疫球蛋白组较利妥昔单抗组变化更明显(P<0.05);2组患者CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均上升,CD8^(+)水平均下降,免疫球蛋白组较利妥昔单抗组变化更明显(P<0.05)。结论 与甲泼尼龙联合利妥昔单抗相比,甲泼尼龙联合免疫球蛋白治疗自身免疫性脑炎患者的疗效更好,可更好地改善患者智力状态及认知功能,平衡血清细胞因子及免疫水平。

关键词： 鸡补体受体   表达纯化   多克隆抗体  

摘要： 【目的】补体受体Ⅱ(complement receptor 2,CR2)与其生理学配体C3d相互作用能桥连先天性免疫反应和适应性免疫反应,放大下游信号的转导现象,显著降低抗原刺激B细胞活化的阈值,可将B细胞对抗原的敏感性提高1 000~10 000倍,对于激活B细胞及启动免疫反应至关重要。本研究旨在制备兔源鸡CR2(chCR2)多克隆抗体,为检测chCR2蛋白的表达情况提供工具,也为深入探究chCR2蛋白的功能和作用奠定基础。【方法】将pTT5-His-chCR2-ΔTM重组质粒转染至HEK293F细胞中,在真核表达系统HEK293F细胞中表达重组chCR2蛋白(His-chCR2-ΔTM),经Western blotting对蛋白表达进行分析,利用镍柱亲和层析纯化系统纯化chCR2蛋白并进行SDS-PAGE鉴定。用纯化出的chCR2蛋白免疫新西兰大白兔制备抗chCR2血清多克隆抗体;利用ELISA方法检测chCR2兔血清的效价;利用Western blotting和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测chCR2血清多克隆抗体的特异性和灵敏度。【结果】重组His-chCR2-ΔTM蛋白可在HEK293F细胞系表达,利用镍柱亲和层析法纯化得到的重组His-chCR2-ΔTM蛋白浓度为4.439 mg/mL,分子质量为45 ku。ELISA检测结果显示,chCR2血清多克隆抗体效价最高为1∶32 768 000;Western blotting和IFA结果表明,chCR2蛋白可被chCR2血清多抗体特异性识别;Western blotting检测时,chCR2血清多克隆抗体的稀释度为1∶5 000时特异性最好;IFA检测时,chCR2血清多克隆抗体最大稀释度为1∶1 600。【结论】本研究成功制备了chCR2蛋白兔多克隆抗体,该抗体效价较高且特异性较好,为后续检测chCR2蛋白及研究chCR2蛋白的功能提供了试验基础。

关键词： acquired perforating dermatosis (APD)   apremilast   chronic kidney disease   diabetes mellitus   inflammatory skin diseases   perforating dermatoses (PD)   phosphodiesterase 4 (PDE4) inhibitor   pruritus   treatment-resistant dermatologic conditions   APD   acquired perforating dermatosis   cAMP   cyclic adenosine monophosphate   EPS   elastosis perforans serpiginosa   IL   interleukin   PD   perforating dermatoses   PDE4   phosphodiesterase 4   PF   perforating folliculitis   TNF-α   tumor necrosis factor-α  

摘要： Right knee lesion biopsy with hematoxylin and eosin stain at 4× ( A), 10× ( B), and 20× ( C) magnification levels, showing cup-shaped invagination of the epidermis filled with a plug consisting of keratin and cellular debris, channels with hyperke...

关键词： 乳腺癌   癌胚抗原   糖类抗原153   糖类抗原125   临床病理特征   预后  

摘要： 目的分析乳腺癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原153(CA153)、糖类抗原125(CA125)水平与其临床病理特征及预后的关系。方法选取2022年4月至2023年12月平煤神马医疗集团总医院收治的100例乳腺癌患者纳入观察组,另选女性健康受试者80例作为对照组。比较检测不同研究对象血清CEA、CA153、CA125水平,并分析血清CEA、CA153、CA125水平与患者临床病理特征、预后的关系。结果观察组患者血清CEA、CA153、CA125水平均高于对照组(t=30.328,P<0.001;t=37.108,P<0.001;t=42.449,P<0.001)。乳腺癌患者血清CEA、CA153、CA125水平与其分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(CEA:F=11.197,P<0.001;t=9.163,P<0.001;t=9.140,P<0.001;CA153:F=6.453,P<0.001;t=5.022,P<0.001;t=5.707,P<0.001;CA125:F=5.923,P<0.001;t=7.212,P<0.001;t=6.149,P=0.003)。37例复发乳腺癌患者血清CEA、CA153、CA125水平均高于63例未复发组乳腺癌患者(t=14.934,P<0.001;t=23.976,P<0.001;t=22.105,P<0.001)。结论血清CEA、CA153、CA125在乳腺癌患者中呈现高表达,与乳腺癌患者的分化程度、TNM分期、淋巴结状态及预后有关。