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关键词： 心血管疾病   IL-17A   炎症   细胞因子  

摘要： 心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)是目前造成全球人口死亡的最主要病因,心血管疾病的发生、发展与炎性反应密切相关。白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)是一种重要的促炎性细胞因子,参与自身免疫、炎症和肿瘤的发展,并在宿主抵抗细菌和真菌感染中发挥重要作用。IL-17A已成为当今生物制剂和药物开发的重要靶标。近年来研究发现,IL-17A通过调控心肌和血管的炎症,对多种心血管疾病的进程具有重要影响。因此,本文总结IL-17A在心血管疾病中的研究进展,为进一步探索心血管疾病防治策略提供新的思路。

关键词： 牛乳腺炎   粪肠球菌   溶血素cylA基因   细胞因子   p38 MAPK  

摘要： 为研究牛乳腺炎粪肠球菌β溶血素cylA基因对牛单核巨噬细胞(BMC-7)吞噬功能和免疫调节的分子机制,利用牛乳腺炎粪肠球菌临床分离的野生型菌株(BME1708)及cylA基因缺失突变株(BME1708△cylA)对牛巨噬细胞进行侵染,利用MTT检测法检测细胞活性;在明确细胞活性不受影响的条件下,提取被侵染的BMC-7总mRNA,利用RT-qPCR检测细胞因子IL-4、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α以及NOS2的转录水平差异,采用ELISA法检测相应表达水平;利用Western blot检测牛乳腺炎粪肠球菌cylA基因对BMC-7的p38 MAPK信号通路磷酸化水平的影响;利用p38 MAPK信号通路抑制剂(PD 169316)孵育BMC-7,ELISA法检测相应细胞因子表达水平,以明确cylA基因调控该信号通路的分子机制。结果显示:与BME1708组相比,BME1708△cylA组在IL-10和TNF-α转录水平下调,IL-4、IL-8、IL-12以及NOS2转录水平上调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与BME1708组相比,BME1708△cylA组IL-10表达水平下调,IL-4、IL-8、IL-12表达水平上调,差异均具有统计学意义(P<0.05);TNF-α的表达水平降低,但是差异不显著;对p38 MAPK磷酸化检测结果显示,粪肠球菌cylA基因可以激活p38 MAPK信号通路并使其磷酸化;在PD 169316孵育后,与未添加抑制剂组相比,添加抑制剂组的IL-10、TNF-α的表达水平下调,IL-4、IL-8、IL-12的表达水平上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。上述结果表明,p38 MAPK信号通路为粪肠球菌β溶血素cylA基因发挥免疫调节机制的重要通路,该结论为奶牛乳腺炎的治疗及防控提供新的靶位,可通过其毒力的钝化以及对p38 MAPK信号通路进行识别及信号通路封闭,对粪肠球菌感染进行有效防控。

关键词： 寻常型银屑病   白介素-26   外周血辅助性T细胞17   调节性T细胞  

摘要： 目的探究寻常型银屑病患者血清白介素-26(IL-26)、外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)水平,并分析临床检测意义。方法本研究为回顾性研究。选取2020年12月至2023年12月安康市中医医院收治的寻常型银屑病患者100例,其中男56例、女44例,年龄(38.65±6.25)岁。并按2∶1比例选取安康市中医医院同期收治的慢性皮肤病患者50例、体检健康者(对照组)50例进行对照研究,慢性皮肤病组中男27例、女23例,年龄(38.85±6.15)岁;对照组中男28例、女22例,年龄(38.44±6.18)岁。分析各组性别、年龄等基线资料及IL-26、Th17/Treg差异,通过二元logistic回归分析寻常型银屑病的影响因素,通过受试者操作特征曲线(ROC)分析IL-26、Th17/Treg水平诊断寻常型银屑病的效能,并分析银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)与IL-26、Th17/Treg的关系。采用χ^(2)检验、t检验、方差分析进行统计比较。结果3组性别、年龄、体重指数、吸烟率、饮酒率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。寻常型银屑病组与慢性皮肤病组患者病程差异无统计学意义(P>0.05)。寻常银屑病组IL-26、Th17、Treg、Th17/Treg分别为(641.82±192.05)ng/L、(5.36±1.34)%、(3.09±0.91)%、1.83±0.55,慢性皮肤病组分别为(571.15±155.31)ng/L、(4.58±1.06)%、(3.81±1.19)%、1.28±0.38,对照组分别为(504.46±122.51)ng/L、(3.93±0.88)%、(5.14±1.51)%、0.81±0.24,3组上述指标比较,差异均有统计学意义(F=11.535、26.054、52.482、90.638,均P<0.05)。二元logistic回归分析结果显示,IL-26、Th17/Treg均是寻常型银屑病的危险因素(均P<0.05)。ROC分析结果显示,IL-26、Th17/Treg诊断寻常型银屑病曲线下面积(AUC)分别为0.700、0.891。将IL-26、Th17/Treg纳入回归方程,得出模型数据,结果显示诊断寻常型银屑病的AUC为0.912,灵敏度0.920,特异度为0.790。线性回归结果显示,IL-26、Th17、Treg、Th17/Treg均与寻常型银屑病患者PASI显著相关(均P<0.05)。结论寻常型银屑病患者血清IL-26、Th17/Treg均升高,IL-26、Th17/Treg诊断寻常型银屑病均有一定价值,联合模型诊断价值更高,且IL-26、Th17/Treg与寻常型银屑病严重程度密切相关。

关键词： 大豆   EIL3蛋白   多克隆抗体   生物学功能  

摘要： 乙烯与大豆花器官发育及产量密切相关,乙烯不敏感蛋白基因(ethylene insensitive 3 gene,EIN3)及其同源基因EIL3(EIN3-like 3)可能是参与大豆产量调控的关键节点基因,但还缺乏充足的证据。本研究通过原核表达大豆EIL3并制备其编码蛋白(Glyma.15G031800)的多克隆抗体,以及在大豆幼苗中进行EIL3蛋白的免疫组织化学检测,验证制备的多克隆抗体的有效性和初步探索EIL3蛋白的生物学功能。结果表明:将EIL3蛋白(Glyma.15G031800)编码区第486—590个氨基酸片段克隆到大肠埃希菌Rosetta菌株中,EIL3蛋白以包涵体的形式表达;用纯化后的EIL3蛋白对2只日本雄性大耳兔进行免疫,得到2个多克隆抗血清,稀释81000倍时其吸光度值远大于0.4,说明血清效价较好,其对抗原的检测下限均为1 ng。EIL3蛋白的表达受1-氨基环丙烷-1-羧酸的强烈诱导,eil3突变体会降低EIL3蛋白的积累及生长抑制,因而有利于幼苗长高、下胚轴伸长与侧根发育。本研究为在蛋白质水平上探究大豆EIL3的生物学功能提供了便利条件。

关键词： 患儿家庭   急淋   疾病负担   重大疾病   急性淋巴细胞白血病   肿瘤性疾病   儿童健康   保障程度  

摘要： 急性淋巴细胞白血病(简称急淋)占到儿童肿瘤性疾病的1/4,是危害儿童健康的重大疾病。现儿童急淋诊疗水平取得了长足进展,但由于该病治疗流程复杂漫长,导致急淋患儿诊治费用高,给患儿家庭带来了巨大的疾病负担。近年来,全民医保制度的推广和国家对儿童“两病”的关注,急淋患儿救治保障力度有所增加,但患儿家庭的经济负担及医保保障程度仍不清楚。

关键词： 脑肠轴   白细胞介素   免疫系统   肖飞   焦虑行为  

摘要： 2024年12月6日,复旦大学生命科学学院于肖飞团队在Immunity发表了题为“Elevated IL-22 as a result of stress-induced gut leakage suppresses septal neuron activation to ameliorate anxiety-like behavior”的文章,报道了在压力诱导的免疫系统早期激活阶段,肠道中的TH17细胞增多并增加白细胞介素(Interleukin 22,IL-22)的产生,IL-22可通过直接抑制脑隔区神经元的激活而降低小鼠的焦虑行为,从而揭示IL-22介导的脑肠轴可减轻精神压力对机体的影响。

关键词： 猪伪狂犬病病毒   gE蛋白   单克隆抗体   间接免疫荧光试验  

摘要： 为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以期获得对PRV反应性良好的抗gE重组蛋白单克隆抗体。结果显示,获得2株(2B5和8F7)稳定分泌抗PRV gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水单克隆抗体的ELISA效价均为1∶1 000000;单克隆抗体亚型鉴定结果表明,2株单克隆抗体的重链均为IgG1亚型,轻链均为Kappa链。单克隆抗体特异性测定结果显示,2株单克隆抗体仅与PRV反应,不与其他常见病毒发生反应;SDS-PAGE结果显示,纯化后的单克隆抗体均在约50 ku和25 ku处有纯度较高的特异性条带;间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,制备的2株单克隆抗体与转染gE质粒的293T细胞发生特异性反应。根据Western blot结果,筛选获得的2株单克隆抗体均在120 ku附近出现特异条带,表明这2株单克隆抗体均能特异性识别PRV。综上,成功制备了2株特异性强、效价高的抗gE蛋白单克隆抗体,为后期PRV诊断试剂盒的制备提供重要的生物材料。

摘要： Paracrine IL-2 signalling drives the CD8 + T cell expansion and differentiation that allow protection against viral infections, but the underlying molecular events are incompletely understood. Here we show that the transcription factor SRF, a master regulator of cytoskeletal gene expression, is required for effective IL-2 signalling during L. monocytogenes infection. Acting cell-autonomously with its actin-regulated cofactors MRTF-A and MRTF-B, SRF is dispensible for initial TCR-mediated CD8⁺ T cell proliferation, but is required for sustained IL-2 dependent CD8⁺ effector T cell expansion, and persistence of memory cells. Following TCR activation, Mrtfab-null CD8⁺ T cells produce IL-2 normally, but homotypic clustering is impaired both in vitro and in vivo. Expression of cytoskeletal structural and regulatory genes, most notably actins, is defective in Mrtfab-null CD8⁺ T cells. Activation-induced cell clustering in vitro requires F-actin assembly, and Mrtfab-null cell clusters are small, contain less F-actin, and defective in IL-2 retention. Clustering of Mrtfab-null cells can be partially restored by exogenous actin expression. IL-2 mediated CD8⁺ T cell proliferation during infection thus depends on the control of cytoskeletal dynamics and actin gene expression by MRTF-SRF signalling. © The Author(s) 2024.

关键词： 脑膜炎,病毒性   脑膜炎,细菌性   γ干扰素   白细胞介素-4   γ干扰素/白细胞介素-4   神经系统并发症   诊断效能  

摘要： 目的探讨γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)及IFN-γ/IL-4在不同类型脑炎脑脊液及血清中的表达差异及其对神经系统并发症的诊断效能。方法纳入2019年3月至2021年3月河北省儿童医院收治的40例病毒性脑炎病儿作为病脑组和40例化脓性脑膜炎病儿纳入化脑组,另选取40例中枢神经系统脱髓鞘疾病病儿作为对照组,分别采集三组病儿的脑脊液和血清标本备用,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)对脑脊液和血清中IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4含量进行检测,分析IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4在不同类型脑炎脑脊液及血清中的表达差异。而后根据病儿有无神经系统并发症再次将其分为有并发症组(n=21)和无并发症组(n=99),采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)曲线下面积(AUC)分别评价IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4对化脓性脑膜炎发生神经系统并发症的效能的预测价值。结果病脑组病儿脑脊液、血清IFN-γ水平分别为[(9.63±1.04)ng/L、(29.08±3.79)ng/L],均明显高于化脑组[(5.74±1.62)ng/L、(14.73±4.25)ng/L]和对照组[(3.44±0.76)ng/L、(11.13±2.05)ng/L](P<0.05),化脑组高于对照组(P<0.05),且血清中IFN-γ浓度高于脑脊液。化脑组病儿脑脊液、血清IL-4水平分别为[(42.17±5.24)ng/L、(91.05±10.91)ng/L],较病脑组[(21.36±1.73)ng/L、(53.26±8.18)ng/L]和对照组[(9.76±1.15)ng/L、(40.08±4.63)ng/L]均偏高(P<0.05),病脑组高于对照组(P<0.05),血清中IL-4含量较脑脊液偏高。病脑组脑脊液和血清中IFN-γ/IL-4最高0.51±0.05、0.49±0.12,化脑组最低0.38±0.06、0.29±0.03,三组组间对比数据差异有统计学意义(P<0.05)。有并发症组病儿脑脊液和血清中IFN-γ[(7.73±0.83)ng/L、(25.13±3.17)ng/L]、IL-4[(38.83±2.35)ng/L、(73.48±7.67)ng/L]及IFN-γ/IL-4(0.42±0.03、0.43±0.09)水平均明显高于无并发症组[(4.15±0.58)ng/L、(12.56±2.08)ng/L、(16.77±4.12)ng/L、(60.13±4.33)ng/L、0.21±0.04、0.19±0.07](均P<0.05)。ROC曲线研究结果显示,IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4及联合检测的AUC分别为0.84[95%CI:(0.72,0.96)]、0.87[95%CI:(0.76,0.97)]、0.76[95%CI:(0.62,0.90)]、0.93[95%CI:(0.85,1.00)],三项指标联合诊断的AUC显著高于各项指标单因子预测(P<0.05)。预测价值:联合检测>IL-4>IFN-γ>IFN-γ/IL-4。结论IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4在病毒性脑炎和化脓性脑膜炎病儿脑脊液和血清中的表达水平明显升高,且均为血清中水平高于脑脊液中;检测其水平可辅助临床更好地诊断神经系统并发症的发生。

关键词： 脓毒症   白细胞介素-6   T淋巴细胞   降钙素原   疾病转归  

摘要： 目的 探讨血清白细胞介素-6 (interleukin,IL-6)、T淋巴细胞亚群CD4+、降钙素原(procalcitonim,PCT)水平联合检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值。方法 选取东莞市长安镇医院2019年1月—2023年12月收治的75例脓毒症患者为研究对象,根据病情的严重程度分为脓毒症组(n=47)、脓毒症休克组(n=28)。对比两组的T淋巴细胞亚群CD4+、IL-6、PCT水平及急性生理学与慢性健康状况Ⅱ评分(acute physiology and chronic health e-valuationⅡ,APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评分(sequential organ failure score,SOFA);分析CD4+、IL-6、PCT与APACHEⅡ评分、SOFA评分的相关性,对比不同预后患者的血清PCT、IL-6、CD4+水平,偏回归分析其与预后的关联性,并采用受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析其对脓毒症患者疾病转归的预测价值。结果 脓毒症组入院时的CD4+水平高于脓毒症休克组,IL-6、PCT水平及SOFA、APACHEⅡ评分均低于脓毒症休克组(t=29.089、10.819、17.925、10.685、10.874,均P<0.05)。两组的血清PCT、IL-6水平均与SOFA、APACHEⅡ评分呈正相关,血清CD4+均与SOFA、APACHEⅡ评分呈负相关(P<0.05)。与预后不良组患者相比,预后良好组患者的血清PCT、IL-6水平降低,CD4+水平升高(t=20.978、22.680、22.562,均P<0.05)。logistic回归分析显示,入院时血清CD4+(OR:0.300,95%CI:0.125~0.721)为脓毒症患者预后不良的保护因素,血清PCT (OR:3.154,95%CI:1.594~6.241)、IL-6(OR:3.797,95%CI:2.517~5.727)为脓毒症患者预后不良的危险因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,PCT、IL-6、CD4+单独及联合检测对患者发生预后不良的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.788、0.786、0.818和0.895,联合检测优于各项单独检测(均P<0.05)。结论 血清PCT、IL-6、CD4+均与脓毒症患者的预后有关,可辅助临床早期制订相应的治疗方案,对改善预后具有重要价值。