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关键词： miR-515-5p   TPX2   IL-6   食管癌   增殖   迁移   侵袭  

摘要： 目的:探究miR-515-5p通过靶向TPX2-IL-6轴对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。方法:IL-6处理食管癌细胞EC9706,分为Con组、IL-6组、IL-6^(+)miR-NC组、IL-6^(+)miR-515-5p组、IL-6^(+)miR-515-5p^(+)pcDNA组、IL-6^(+)miR-515-5p^(+)TPX2组。qRT-PCR检测miR-515-5p、TPX2 mRNA表达;克隆形成实验及Transwell检测细胞增殖、迁移、侵袭能力;Western blot检测CyclinD1、MMP2、MMP9、TPX2蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测miR-515-5p与TPX2的靶向关系。结果:与Con组相比,IL-6组miR-515-5p表达降低,TPX2 mRNA和蛋白表达增加,克隆、迁移、侵袭细胞数增加,CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达增加。与IL-6^(+)miR-NC组相比,IL-6^(+)miR-515-5p组miR-515-5p表达增加,TPX2 mRNA和蛋白表达降低,克隆、迁移、迁移细胞数降低,CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达降低。miR-515-5p靶向调控TPX2表达,过表达TPX2可逆转上调miR-515-5p对IL-6诱导食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论:miR-515-5可靶向抑制TPX2进而抑制IL-6诱导食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词： 多重PCR检测   抗原检测   肺部   病原体感染  

摘要： 目的:比较多重PCR检测与抗原检测在肺部感染病原体检测中的应用。方法:纳入2023年5月至2024年5月于昌乐县人民医院就诊的疑似有肺部感染的患者500例。所有患者均进行多重PCR检测、抗原检测和传统核酸检测,以核酸检测结果为金标准,统计多重PCR检测与抗原检测对肺部病原体感染的检出情况,对比多重PCR检测与抗原检测的诊断效能。结果:比较多重PCR检测与抗原检测对肺部感染病原体进行检测的灵敏度(92.37%vs.80.93%)、特异性(95.45%vs.88.26%)和准确率(94.00%vs.84.80%),多重PCR检测均高于抗原检测(P<0.05)。多重PCR检测接受者操作特性(ROC)曲线下面积(AUC)为0.933(95%CI:0.8590~1.0000),抗原检测的AUC为0.837(95%CI:0.7290~0.9451),说明多重PCR检测的诊断价值更高。结论:多重PCR检测诊断肺部病原体感染的效能优于抗原检测,具有更高的诊断价值,可在临床上推广应用。

关键词： 伪狂犬病病毒(PRV)   gB蛋白   单克隆抗体   ELISA  

摘要： 【目的】制备猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)gB蛋白单克隆抗体并建立竞争ELISA检测方法,为PRV的抗体检测及试剂盒开发提供参考。【方法】本研究使用PRV gB蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,使用PEG1500将小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,用间接ELISA方法筛选出阳性杂交瘤细胞,采用有限稀释法经过2轮亚克隆,将阳性杂交瘤细胞通过体内诱生法制备腹水,并通过饱和硫酸铵法对腹水进行纯化制备单克隆抗体,用单克隆抗体建立竞争ELISA检测方法。使用棋盘法对反应条件进行优化,对阴性血清进行检测,计算该方法的临界值,并进行特异性、灵敏性和重复性试验,最后与商品化试剂盒同时对临床血清样品进行检测,比较二者的符合率。【结果】获得2D6、2D8两株杂交瘤细胞均为IgG1型,轻链为κ链,建立的竞争ELISA方法单克隆抗体最佳稀释度为1∶400,蛋白最佳包被浓度为1μg/mL,待检血清最佳稀释浓度为1∶4,最佳封闭液为1%BSA,酶标二抗的最佳稀释度为1∶4000。与其他临床常见的猪病病原不发生交叉反应,具有良好的特异性。阳性血清稀释至1∶256仍为阳性,证明该方法灵敏性好。批内和批间的变异系数均<10%,证明建立的竞争ELISA方法具有良好的重复性。与商品化试剂盒比较,总体符合率达93.3%。【结论】本研究成功制备针对PRV gB蛋白的单克隆抗体,并应用单克隆抗体建立了PRV gB抗体竞争ELISA检测方法。

关键词： 聚合酶链反应   腺苷脱氨酶   癌胚抗原   癌性胸腔积液   结核性胸腔积液  

摘要： 目的:探究聚合酶链反应(PCR)配合腺苷脱氨酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)检测鉴别结核性和癌性胸腔积液的诊断价值。方法:收集榆林市定边县人民医院2018年1月—2023年1月收治的72例胸腔积液患者作为研究对象,按照病理分组,包括癌性胸腔积液组(38例)和结核性胸腔积液组(34例)。两组均采用PCR检测结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TB-DNA),并进行ADA和CEA检测,对比诊断价值。结果:癌性胸腔积液组CEA水平高于结核性胸腔积液组,ADA与TB-DNA水平低于结核性胸腔积液组(P<0.05);PCR、ADA和CEA联合检查对癌性胸腔积液和结核性胸腔积液的鉴别诊断敏感度和特异度高于任一单项检测(P<0.05)。结论:在结核性和癌性胸腔积液的早期鉴别诊断中,PCR配合ADA和CEA检测具有较高的诊断价值,可为病症的临床预防和干预提供依据。

关键词： 急性支气管炎   连花清咳片   痰热壅肺证   炎性细胞因子   血常规   抗氧化  

摘要： 目的观察连花清咳片辅助治疗急性支气管炎(痰热壅肺证)临床疗效及对血清炎性细胞因子水平的影响。方法将符合研究入选标准的80例急性支气管炎(痰热壅肺证)患者按随机数字表法分成两组。对照组予常规西医对症治疗,观察组在常规西医对症治疗基础上予连花清咳片口服。连续治疗7 d后,比较两组中医证候积分(咳嗽、痰液性状、24 h痰量、发热、哮鸣音、呼吸困难)、单项症状持续时间、血常规指标(淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞计数)、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(Nitri-cOxide,NO)]、血清炎性细胞因子[肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)]水平变化,并比较两组治疗总有效率及药物安全性。结果两组治疗后咳嗽、痰液性状、24 h痰量、发热、哮鸣音、呼吸困难积分,中性粒细胞百分比、白细胞计数,MDA水平,TNF-α、IL-4、IL-8水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);两组治疗后淋巴细胞百分比,SOD、NO水平,IFN-γ水平均高于治疗前(P<0.05),且观察组均高于对照组(P<0.05);观察组治疗后咳嗽、咯痰、发热、气喘、肺部啰音持续时间均短于对照组(P<0.05);观察组总有效率(97.5%),高于对照组(80.0%)(P<0.05);两组用药其间均未出现与用药相关的不良反应。结论连花清咳片联合常规西医对症治疗对急性支气管炎(痰热壅肺证)的治疗效果明确,能够快速缓解临床症状体征,抑制体内炎症反应,减轻氧化应激损伤,有助于缩短病程,促进疾病痊愈。

关键词： 原发性中枢神经系统淋巴瘤   血小板淋巴细胞比率   预后   判断  

摘要： 研究血小板淋巴细胞比率在原发性中枢神经系统淋巴瘤患者中预后判断中的价值。方法 择取在常州市第一人民医院就诊的40例原发性中枢神经系统淋巴瘤患者,就诊时间为2017年7月至2023年7月。随访12个月,对患者的血小板淋巴细胞比率(PLR)进行检测,观察预后情况并对相关影响因素展开分析。结果 就PLR而言,治疗后的检测值同治疗前相比更低,P<0.05;1年无进展生存率为70.00%,1年总生存率为55.00%;无进展生存期、总生存期组间对比,低PLR组长于高PLR组,P<0.05;PCNSL患者预后的影响因素为LDH、ECOG评分≥2、高IELSG评分、高MSKCC评分、高PLR(P<0.05)。结论 PLR能够作为判断PCNSL患者预后的一项有效指标。

关键词： 肝细胞癌   淋巴细胞   炎症   免疫   预后   网络计算器  

摘要： 目的:构建淋巴细胞比值相关免疫-炎症反应评分(immune-inflammatory response score,IRS),并构建预测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后风险的网络计算器。方法:回顾性分析2018年1月至2023年12月于上海市公共卫生临床中心进行手术治疗的HCC患者。收集中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-lymphocyte ratio,PLR)、单核细胞与淋巴细胞比值(monocyte to lymphocyte ratio,MLR)和C反应蛋白与淋巴细胞比值(C-reactive protein to lymphocyte ratio,CLR)。使用多因素Cox回归模型构建IRS。采用单因素和多因素Cox回归分析筛选HCC患者死亡风险因素。使用rms、foreign、readxl、Hmisc和rmda等R包构建和评估列线图预测的准确性。使用Dyn Nom包开发HCC患者死亡风险网络计算器。结果:154例患者随访1~60个月,中位随访时间为17个月,其中1年、3年和5年死亡率分别为30.5%、50.6%和61.0%。根据多因素Cox回归模型系数β构建IRS=0.213×NLR+0.005×PLR+0.042×CLR。死亡HCC患者IRS高于生存HCC患者,且差异有统计学意义(P<0.05)。高风险组(IRS≥2.88分)HCC患者总生存率低于低风险组(IRS<2.88分)HCC患者,且差异有统计学意义(P<0.05)。时间-受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线显示,IRS预测HCC患者1年、3年、5年总生存率的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.829[95%置信区间(95%confidence interval,95%CI)为0.760~0.885]、0.901(95%CI为0.842~0.943)和0.898(95%CI为0.839~0.941)。多因素Cox回归分析结果显示,肿瘤最大直径、γ-谷氨酰转移酶(γ-glutamyl transferase,GGT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)水平和IRS是HCC患者死亡独立风险因素(P均<0.05)。基于IRS构建预测HCC患者1年、3年及5年死亡风险的列线图。校准曲线显示,列线图预测1年、3年和5年死亡风险的C-index分别为0.836(95%CI为0.818~0.912)、0.903(95%CI为0.882~0.961)和0.847(95%CI为0.817~0.932)。时间-决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)显示,风险阈值在0~1时,该列线图能提供显著意义临床净收益。网络计算器操作界面见https://***/Dyn Nomapp/。结论:IRS能有效预测HCC患者死亡风险。IRS结合肿瘤最大直径、GGT、ALP、AFP水平构建的HCC患者死亡风险网络计算器有助于指导临床医师为预后较差的HCC患者提供更积极的治疗和临床管理。

关键词： 老年   COPD   PFI   (1-3)-β-D葡聚糖   淋巴细胞  

摘要： 目的分析老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)继发肺部真菌感染(PFI)患者外周血(1-3)-β-D葡聚糖、淋巴细胞水平变化的临床意义。方法选取老年COPD继发PFI患者108例(PFI组)和老年COPD未继发PFI患者80例(非PFI组)。分析PFI组痰液病原菌分布情况;比较两组临床资料、外周血(1-3)-β-D葡聚糖、淋巴细胞亚群水平。分析COPD继发PFI的影响因素及(1-3)-β-D葡聚糖与淋巴细胞水平的相关性。结果PFI组患者痰液病原菌主要为曲霉菌、假丝酵母菌和白念珠菌。PFI组(1-3)-β-D葡聚糖、CD3^(+)CD8^(+)高于非PFI组,CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD4^(+)/CD3^(+)CD8^(+)低于非PFI组(P<0.05)。外周血(1-3)-β-D葡聚糖与CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD4^(+)/CD3^(+)CD8^(+)呈负相关,与CD3^(+)CD8^(+)呈正相关(P<0.001);(1-3)-β-D葡聚糖、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD4^(+)/CD3^(+)CD8^(+)均为老年COPD患者继发PFI的独立影响因素(P<0.05)。结论(1-3)-β-D葡聚糖、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD4^(+)/CD3^(+)CD8^(+)是老年COPD患者继发PFI的影响因素,可为其临床治疗提供参考。

关键词： 逍遥散加减   中重度痤疮   血清辅助性T细胞  

摘要： 目的:探讨逍遥散加减治疗中重度痤疮的具体效果,并分析该治疗方法对患者血清辅助性T细胞1(Th1)/Th2型细胞因子所产生的具体作用。方法:选取在我院2022年3月~2024年3月接受治疗的70例中重度痤疮患者作为研究对象,将70例患者平均分为两个组,每组35例患者,分别命名为对照组及观察组。对照组患者采取脉冲染料激光治疗,在此基础上,对观察组患者实行逍遥散加减治疗方式。经一段时间治疗后,对比两组患者的治疗有效率、治疗前后的痤疮症状评分、血清辅助性T细胞1(Th1)/Th2型细胞因子水平及不良反应发生概率。结果:观察组的治疗有效率结果相较于对照组更高;经过不同治疗方式后,观察组的痤疮症状评分更低,明显低于对照组;观察组在治疗后痤疮症状评分均低于对照组;观察组T细胞1(Th1)/Th2型细胞因子水平均优于对照组;观察组在治疗后发生不良反应的情况较少,发生概率低于对照组。结论:逍遥散加减治疗中重度痤疮患者具有明显的正向效果,能够有效缓解患者的痤疮症状,同时具有较高的安全性,值得临床应用。

关键词： 食糖   右旋糖酐   单克隆抗体   胶乳增强免疫比浊法   方法学  

摘要： 文章建立了食糖中右旋糖酐胶乳增强免疫比浊分析方法。利用杂交瘤细胞株,通过体内诱生法,制备一定量的右旋糖酐单克隆抗体。通过成本较低的羟基磷灰石层析法,得到纯度为71%的右旋糖酐单克隆抗体。以带有羧基功能基团的胶乳微球作为载体,通过1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺介导的化学反应与右旋糖酐单克隆抗体形成酰胺键,实现共价偶联,制备得到右旋糖酐免疫胶乳微球。该方法的反应体系主要为pH7.0的4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液,检测仪器为全自动生化分析仪。结果表明,该方法线性关系良好,相关系数为0.9997,检出限为3.68 mg/L。样品的加标回收率为93.8%~105.8%,相对标准偏差为0.50%~1.81%。