课程文献中心 更多>>

关键词： Periostin   人源化单克隆抗体   视网膜纤维化  

摘要： 目的:制备抗periostin人源化单克隆抗体,建立稳定的细胞株。方法:以本实验室自主研发的抗periostin鼠单抗为基础,提取细胞总RNA,经RT-PCR扩增VH和VL基因测序获得可变区序列,将小鼠抗体CDR区域移植到人源抗体框架受体区域,基因合成后亚克隆到表达载体PATX-GS2,稳定转染CHO细胞,经MSX加压筛选、有限稀释获得单克隆细胞株。结果:经RT-PCR扩增V_(H)和V_(L)基因,确定轻重链可变区序列,通过CDR移植方法,成功对鼠源单抗进行人源化改造,并构建了真核质粒载体,经转染至CHO细胞表达,成功获得人源化抗periostin抗体,ELISA和Western blot结果证明,制备的人源化抗体具有良好的活性和亲和力。结论:本研究成功制备了抗periostin人源化单克隆抗体,且该人源化抗体可以与体内periostin蛋白特异性结合,具有生物学活性,为精准治疗视网膜纤维化病变、组织器官纤维化病变及恶性肿瘤提供了科学数据。

关键词： 贝林妥欧   急性B淋巴细胞白血病   微小残留病灶   淋巴细胞亚群   程序性死亡受体1   程序性死亡分子配体1  

摘要： 目的 观察贝林妥欧治疗儿童难治/复发性急性B淋巴细胞白血病(B-acute lymphoblastic leukemia, BALL)7天时外周血CD19^(+)B淋巴细胞计数、T淋巴细胞表面程序性死亡受体1(programmed death receptor 1,PD1)和肿瘤细胞表面程序性死亡配体1(programmed death ligand 1,PD-L1)表达水平。方法 回顾分析2021-09/2024-04月作者医院18例难治/复发性BALL患儿的临床资料,根据28天时微小残留病灶(minimal residual disease, MRD)结果将患儿分为MRD阴性组(n=15)和MRD阳性组(n=3)。观察两组患儿使用贝林妥欧治疗前和治疗7天时外周血中T、B淋巴细胞计数及治疗前PD-1和PD-L1的表达水平。结果 与MRD阳性组比较,MRD阴性组患儿治疗7天时外周血B淋巴细胞数量显著下降(P<0.001);MRD阴性组患儿治疗7天时外周血T、B淋巴细胞数量较治疗前显著下降(P<0.001);MRD阳性组患儿治疗7天时外周血T、B淋巴细胞数量较治疗前有下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,MRD阳性组PD-1和PD-L1表达水平高于MRD阴性组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MRD阴性患儿在贝林妥欧治疗7天时外周血T、B淋巴细胞数量下降更明显。治疗前PD1/PD-L1在MRD阳性组表达有偏高趋势,但差异无统计学意义,提示较高水平PD-1/PD-L1可能影响贝林妥欧治疗效果。

关键词： 支气管哮喘   呼出气一氧化氮   肺功能   免疫球蛋白E   相关性  

摘要： 研究支气管哮喘患者处于急性发病阶段时,其呼出气中一氧化氮(FeNO)的浓度水平是否与肺功能指标以及血清中总免疫球蛋白E(IgE)的含量存在某种关联性。方法 选取2023年3月至2023年12月期间,因支气管哮喘急性发作而入住我科室的60名患者作为哮喘组,依据病情轻重进一步细分为轻度、中度及重度三个亚组。同时,另择30名健康个体组成对照组。所有参与者均接受呼出气一氧化氮(FeNO)浓度测定、肺功能评估以及血清总免疫球蛋白E(IgE)水平的检测。结果 哮喘组FeNO、IgE均高于对照组,FEV1%低于对照组。随严重程度增加,FeNO浓度明显增加,轻中重三组间有显著性差异。相关性分析显示哮喘患者的FeNO与肺功能呈负相关,与IgE呈正相关。结论 FeNO水平与肺功能状态及IgE含量展现出显著的相关性,因此可以视为支气管哮喘的一个关键炎症标志物,为该疾病的诊断、病情预测以及制定治疗方案提供了有价值的临床参考信息。

关键词： 猫IFN-α   构建与表达   抗病毒活性   干扰素刺激基因  

摘要： 本文为探究猫IFN-α(FeIFN-α)在体外MDCK、F81细胞中的抗病毒效果,为后续体内实验提供参考。根据猫IFN-α(GenBank登录号:NP_001027000.1)序列并添加6×His标签,合成后通过pUC57载体进行克隆,然后亚克隆至pcDNA3.1载体,获得含有目的基因的真核表达质粒,转染293T细胞,通过Western blot检测FeIFN-α的表达情况。通过重组绿色荧光蛋白水疱性口炎病毒(VSV-GFP)感染细胞实验,利用结晶紫染色法进行FeIFN-α抗病毒活性初步分析并确定最佳稀释倍数,通过荧光观察法、流式细胞术检测其抗病毒活性,最后通过相对荧光定量qPCR技术检测猫IFN-α对干扰素刺激基因(ISG15、MX1、OAS1)的调控作用。结果表明,成功表达FeIFN-α并具有生物学活性,且可以明显抑制VSV-GFP病毒侵染F81、MDCK细胞,qPCR结果分析表明猫IFN-α在F81、MDCK细胞中均可有效诱导ISG15、MX1、OAS1基因上调。本研究结果为后续犬猫体内抗病毒实验提供参考依据。

关键词： 哮喘慢性持续期   三拗汤合桂枝加厚朴杏子汤   白细胞介素-2   肿瘤坏死细胞-α   肺功能   哮喘症状  

摘要： 目的:探究三拗汤合桂枝加厚朴杏子汤对哮喘慢性持续期患儿IL-2、TNF-α水平的影响。方法:选择2021年10月—2023年9月我院收治的哮喘慢性持续期患儿93例作为观察对象,采用随机数字表法分为两组,对照组(n=46)给予常规治疗,观察组(n=47)给予常规治疗+三拗汤合桂枝加厚朴杏子汤,对比两组治疗前后血清炎症因子[白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死细胞-α(TNF-α)]、肺功能[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、呼气流量峰值(PEF)]、哮喘控制情况[哮喘控制测试(ACT)评分]、不良反应。结果:治疗前,两组IL-2、TNF-α对比无统计学差异(P>0.05),治疗后,两组IL-2、TNF-α水平下降,且观察组较对照组下降更显著(P<0.05);治疗前,两组FEV_(1)、PEF对比无统计学差异(P>0.05),治疗后,两组FEV_(1)、PEF提升,且观察组较对照组明显提升(P<0.05);治疗前,两组ACT评分对比无统计学差异(P>0.05),治疗后,与对照组相比,观察组ACT评分明显提升(P<0.05);两组不良反应总发生率对比无统计学差异(P>0.05)。结论:哮喘慢性持续期患儿在常规治疗同时使用三拗汤合桂枝加厚朴杏子汤,能有效降低炎症因子,改善肺功能,控制哮喘症状,且不会增加不良反应发生风险。

关键词： 重症肺炎   呼吸衰竭   人免疫球蛋白   肺保护性通气  

摘要： 目的探讨人免疫球蛋白联合肺保护性通气治疗重症肺炎伴呼吸衰竭的效果。方法60例重症肺炎伴呼吸衰竭患者根据治疗方法的不同分为两组各30例。对照组接受肺保护性通气治疗,观察组接受人免疫球蛋白联合肺保护性通气治疗。比较两组的呼吸相关指标、机体炎性指标、不良反应。结果治疗后,观察组的PaO_(2)、呼吸频率、心率值均高于对照组,PaCO_(2)值以及血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均低于对照组(P<0.05)。结论人免疫球蛋白联合肺保护性通气治疗重症肺炎伴呼吸衰竭患者可有效改善其呼吸状况,减轻其机体炎性反应,安全性高。

关键词： 乳腺癌   血清铁蛋白   糖类抗原15-3   癌胚抗原   复发转移  

摘要： 目的探讨血清铁蛋白(SF)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)15-3联合检测诊断乳腺癌及预测复发转移的临床价值。方法选择2017年1月至2024年5月期间昆山市第二人民医院收治的乳腺癌、良性乳腺病患者各60例,均检测血清SF、CEA及CA15-3,比较两组检测结果,分析联合检测的诊断效能。将乳腺癌组患者分为复发转移组与未复发转移组,比较两组血清SF、CEA以及CA15-3检测结果。结果乳腺癌组血清SF、CEA及CA15-3水平均较良性乳腺病组高(P<0.05);联合检测的诊断准确度为87.50%、灵敏度为86.67%,均高于单独检测结果(P<0.05)。复发转移组血清SF、CEA及CA15-3水平均较未复发转移组高(P<0.05)。结论乳腺癌患者血清SF、CEA及CA15-3水平均存在异常升高的情况,联合检测对该病的诊断效能高,并可辅助预测乳腺癌的复发转移。

关键词： 嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)   细胞治疗   药品生产   质量管理   生物制品  

摘要： 基于药品生产质量管理六大系统各自领域的要求,以及对已上市嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗产品主要生产工艺的分析,文章从CAR-T产品生产工艺质量管控、工艺验证与无菌工艺模拟试验、生产过程的污染与交叉污染控制、生产相关偏差及变更控制4个主要方面,分析与探讨了该类产品生产系统的特殊性及相应的质量管理要点,以期为先进治疗产品的持有人,特别是嵌合抗原受体T细胞产品的生产企业,进一步做好生产系统质量管理提供参考与借鉴,同时也为生产检查与质量审计提供思路。

关键词： 黄体酮   低分子肝素钠   辅助生殖技术   妊娠   复发性流产  

摘要： 目的探讨黄体酮联合低分子肝素钠治疗辅助生殖技术(ART)妊娠后复发性流产的疗效及对血清NOD样受体蛋白3(NLRP3)、白介素(IL)-1β、IL-18的影响。方法选取2021年1月至2023年1月空军军医大学第二附属医院(唐都医院)收治的150例ART妊娠后复发性流产患者作为研究对象,根据抽签法分为观察组和对照组,每组75例。对照组采用黄体酮治疗,观察组采用黄体酮联合低分子肝素钠治疗。比较两组临床疗效及治疗前后血清NLRP3、IL-1β、IL-18、凝血功能指标、激素指标水平。结果观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组血清NLRP3、IL-1β、IL-18、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白降解产物(FDP)、纤维蛋白原(FIB)水平均降低,且观察组均低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组孕酮(P)、雌二醇(E_(2))、人绒毛膜促性腺激素(hCG)水平均升高,且观察组均高于对照组(P<0.05)。结论黄体酮联合低分子肝素钠治疗ART妊娠后复发性流产患者疗效显著,能够降低患者炎症反应,改善患者激素水平和凝血功能。

关键词： 前蛋白转化酶枯草溶菌素9   托莱西单抗   依洛尤单抗   阿利西尤单抗   抗体亲和力   体外活性  

摘要： 目的探讨托莱西单抗、依洛尤单抗和阿利西尤单抗与前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)的亲和力。方法采用表面等离子共振法和生物膜层干涉法检测托莱西单抗、依洛尤单抗、阿利西尤单抗3种PCSK9抑制剂对PCSK9的亲和力;采用免疫印迹法(Western blot)法检测HepG2细胞中低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达水平,考察不同质量浓度(0,6,60,180μg/mL)托莱西单抗阻断重组人PCSK9(D374Y)与LDLR的结合能力。结果表面等离子共振法和生物膜层干涉法测得托莱西单抗与PCSK9的平衡解离常数分别为2.90×10^(-10)mmol/L和5.05×10^(-10)mmol/L;托莱西单抗与重组人PCSK9(D374Y)的亲和力是依洛尤单抗的1.85倍、2.57倍,是阿利西单抗的5.38倍、4.71倍。托莱西单抗阻断重组人PCSK9(D374Y)与LDLR结合的半数抑制浓度(IC50)为64.42 nmol/L,与重组人PCSK9(D374Y)结合恢复低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)内吞作用的半数最大效应浓度(EC50)分别为(15.03±0.63)μg/mL和(7.22±0.16)μg/mL;Western blot法试验结果显示,不同质量浓度(0,6,60,180μg/mL)托莱西单抗中HepG2细胞灰度值分别为0.76,0.83,3.21,3.28。结论托莱西单抗与PCSK9的亲和力强于阿利西尤单抗和依洛尤单抗,能阻止LDLR的降解,从而浓度依赖性地增加肝细胞表面LDLR的表达。