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关键词： 支气管哮喘   嗜酸性粒细胞   细胞因子   气道炎症   靶向治疗  

摘要： 哮喘是一种以慢性气道炎症为特征的异质性疾病。临床表现为喘息、气促、胸闷和咳嗽等症状,这些症状随时间和强度而变化,且哮喘的气流受限是可逆的。哮喘的发病率呈逐年上升趋势,因此如何精准有效地控制及治疗是我们应该关注的重点。嗜酸性粒细胞作为核心成分参与了多种类型哮喘发病全过程,对其水平的监测能够充分反映患者气道炎症变化情况,对于患者病情评估具有重要的临床价值。现对嗜酸性粒细胞及其相关因子在支气管哮喘的国内外研究进展作一概述,为支气管哮喘的治疗提供理论依据。Asthma is a heterogeneous disease characterized by chronic airway inflammation. Its clinical manifestations include wheezing, shortness of breath, chest tightness, and cough, with symptoms varying in intensity and duration over time. Notably, asthma-associated airflow limitation is reversible. The escalating global prevalence of asthma underscores the urgency to prioritize precise and effective disease management and treatment strategies. Eosinophils, as a central component, are involved throughout the pathogenesis of various asthma subtypes. Monitoring eosinophil levels provides critical insights into dynamic changes in airway inflammation, offering substantial clinical value for disease assessment and therapeutic decision-making. This article synthesizes current domestic and international research advancements on eosinophils and their related factors in bronchial asthma, aiming to establish a theoretical foundation for optimizing asthma treatment protocols.

关键词： 猫   CD44   原核表达   单克隆抗体   制备   鉴定  

摘要： 为制备用于实验的猫CD44单克隆抗体,原核表达了猫CD44重组蛋白,通过镍亲和层析法纯化目的蛋白,并将蛋白定量至1 mg/m L,然后将蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤抗体技术制备鼠抗猫CD44单抗,并验证单抗的适用范围。结果表明,成功制备并纯化4株猫CD44单抗,其效价均高于1∶64000,重链均为Ig G1型,轻链均为κ型。制备的单抗可应用于Western-blot、间接免疫荧光和免疫组织化学等实验,为猫CD44基因相关疾病的研究和药物研发等提供了重要的单克隆抗体资源。

关键词： 假交替单胞菌   κ-卡拉胶酶   免疫球蛋白样结构域   酶学性质   结构稳定性  

摘要： 目的:分析假交替单胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis)来源κ-卡拉胶酶的结构域,构建结构域截短突变体,探究非催化结构域对假交替单胞菌κ-卡拉胶酶的酶学性质与结构的影响。方法:利用大肠杆菌异源表达假交替单胞菌κ-卡拉胶酶WT和仅包含糖苷水解酶催化结构域的κ-卡拉胶酶截短体GH(缺失免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)样结构域),利用3,5-二硝基水杨酸法研究κ-卡拉胶酶WT和GH的酶学性质,利用分子对接和分子动力学模拟研究酶微观结构的变化。结果:成功对假交替单胞菌κ-卡拉胶酶WT及其截短体GH进行体外表达,WT和GH的分子质量分别为44.0 kDa和35.0 kDa,均能专一性地酶解κ-卡拉胶底物。酶学性质研究发现,假交替单胞菌κ-卡拉胶酶的Ig样结构域不影响酶的底物特异性、最适反应温度、最适反应pH值和κ-卡拉胶酶解产物的组成,但降低了酶的热稳定性、强酸(pH 4.0)和强碱(pH 11.0)稳定性、酶对底物的亲和力。酶的分子对接及分子动力学模拟分析结果表明,Ig样结构域截短后,κ-卡拉胶酶与κ-卡拉胶四糖底物的相互作用增强,酶结构的刚性增强,κ-卡拉胶酶F1、F3和F5指状区环状结构柔性降低,F2和F6指状区β片层结构柔性升高,这些结构的改变可能是截短体GH催化活性和热稳定性提高的原因。结论:本研究解析了假交替单胞菌κ-卡拉胶酶的非催化Ig样结构域与酶性质的构效关系,可为该酶结构与功能研究及酶的应用提供理论基础。

关键词： 补体C3   补体C4   胱抑素C   尿微量白蛋白   过敏性紫癜   早期肾损伤  

摘要： 目的探究补体C3、C4、胱抑素C(CysC)及尿微量白蛋白(mALB)检测对过敏性紫癜(HSP)患儿早期肾损伤的评估价值。方法选取2019年1月至2023年12月河南科技大学附属黄河三门峡医院190例HSP患儿为研究组,另选取同期190名健康体检儿童为对照组,比较两组血清补体C3、C4、CysC及mALB水平。根据是否发生早期肾损伤将HSP患儿分为肾损伤组(n=72)和非肾损伤组(n=118),比较两组一般资料、血清补体C3、C4、CysC及mALB水平,分析影响HSP患儿早期肾损伤的相关因素及血清补体C3、C4、CysC及mALB对HSP患儿早期肾损伤的评估价值。结果研究组血清补体C3、补体C4水平显著低于对照组,血清CysC和mALB水平均显著高于对照组(P<0.05);肾损伤组关节肿胀、持续皮疹、消化道出血占比、WBC、PLT、Fib、血清IgA、CysC和mALB水平显著高于非肾损伤组,血清补体C3、C4水平显著低于非肾损伤组(P<0.05);多因素Logictic回归分析显示,持续皮疹、关节肿胀、消化道出血、血清CysC及mALB升高是影响HSP患儿并发早期肾损伤的危险因素(P<0.05),血清补体C3、C4升高是保护因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清补体C3、C4、CysC和mALB单独及联合诊断HSP患儿早期肾损伤的AUC分别为0.718、0.725、0.832、0.745、0.911,联合诊断价值更高。结论补体C3、C4、CysC及mALB联合检测对HSP患儿早期肾损伤具有较高的评估价值,可作为重要参考指标辅助临床病情评估。

关键词： 诱导多能干细胞(iPSCs)   NKG2A   自然杀伤(NK)细胞   免疫治疗  

摘要： 目的针对NKG2A-HLA-E负调控通路,构建诱导多能干细胞(iPSC)来源的基因工程NKG2A敲除的NK细胞(NKG2A KO-iNK),在体外初步评价其肿瘤杀伤功能。方法利用基因编辑技术在iPSC中敲除NKG2A,将其在体外诱导分化为NKG2A KO-iNK细胞,并在不同分化阶段利用流式细胞测量术检测特异性的表面标志物;利用Western blot验证NKG2A KO-iNK细胞NKG2A的敲除情况,并用流式细胞测量术检测NKG2A KO-iNK细胞常见的NK细胞活化性受体及天然细胞毒性受体的表达水平;乳酸脱氢酶检测法(LDH)检测NKG2A KO-iNK细胞对不同人白细胞抗原E(HLA-E)表达水平肿瘤细胞的体外细胞毒活性。结果将Cas9蛋白和靶向编码NKG2A的KLRC1基因第1、2外显子的3条向导RNA(sgRNA)共转染iPSC对其进行基因敲除,测序结果显示成功获得在第1外显子插入1个T碱基的单克隆NKG2A敲除的iPSC(NKG2A KO-iPSC)。iPSC向NK细胞诱导分化的过程中,第8天类胚体(EBs)阶段检测CD34表达水平在30%~50%;第28天NK诱导分化阶段CD56和CD16的表达均达80%以上。Western blot结果显示,NKG2A KO-iNK细胞NKG2A被成功敲除;流式结果显示NKG2A KO-iNK细胞活化性受体NKG2D及细胞毒性受体NKp30、NKp44、NKp46的表达水平和野生型iNK(WT-iNK)细胞基本一致。LDH实验结果显示,NKG2A KO-iNK细胞对HLA-E高表达的B细胞前体白血病细胞系Nalm6的细胞毒活性显著高于WT-iNK细胞,而对HLA-E低表达的人骨髓瘤细胞系H929和HLA-E几乎不表达的人肝癌细胞系HepG2,NKH2A KO-iNK细胞和WT-iNK细胞两者之间的细胞毒活性差异无统计学意义;γ干扰素(IFN-γ)处理能显著上调Nalm6细胞的HLA-E表达水平,进而进一步增强NKG2A KO-iNK细胞对Nalm6细胞的细胞毒活性。结论由于阻断了NKG2A-HLA-E负调控通路,基因工程NKG2A KO-iNK细胞对HLA-E高表达的肿瘤细胞系在体外显示出明显增强的细胞毒活性,提示其作为一种新型细胞治疗的可能性,为肿瘤的细胞过继免疫治疗提供一种新的思路。

关键词： 补气养血通络组方   硼替佐米   周围神经毒性   白细胞介素-10   C-反应蛋白   淋巴细胞亚群  

摘要： 目的探讨补气养血通络组方对硼替佐米所致周围神经毒性改善及对血清炎症因子水平及免疫功能的影响。方法选取2020年1月—2022年6月就诊于该院的50例硼替佐米所致周围神经毒性(Bortezomib-induced peripheral neurotoxicity,BIPN)多发性骨髓瘤患者为此次试验对象,随机分成两组,对照组25例实施常规的西医治疗,观察组25例在其基础上加上补气养血通络组方治疗,两组连续治疗3个月。比较两组临床疗效;神经病变主觉症状问卷评分(neuropathy subjective symptoms questionnaire score,TSS);血清白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平;不良反应发生率。结果临床的总有效率方面,观察组(80.00%,20/25)较对照组(52.00%,13/25)升高明显(P<0.05);TSS评分方面,相较于治疗前,两组治疗后均降低,且观察组改变的幅度更高(P<0.05);IL-10、CRP变化水平方面,相较于治疗前,两组治疗后均降低,且观察组改变的幅度更高(P<0.05);CD_(3)^(+)淋巴细胞、CD_(4)^(+)淋巴细胞、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)水平方面,治疗后,两组均高于治疗前,且观察组改变的幅度更高,而CD_(8)^(+)淋巴细胞较对照组低(P<0.05);不良反应出现概率方面,两组对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论补气养血通络组方治疗BIPN效果显著,可改善免疫功能,同时还能下调血清IL-10、CRP水平,而不会增加不良反应发生风险,具有较高的临床参考价值。

关键词： 献血者   乙型肝炎表面抗原/梅毒螺旋体胶体金试纸   梅毒螺旋体   酶联免疫吸附试验   梅毒螺旋体颗粒凝集   甲苯胺红不加热血清试验  

摘要： 目的分析乙型肝炎表面抗原/梅毒螺旋体(hepatitis B surface antigen/treponema pallidum,HBsAg/TP)胶体金试纸在血站实际应用中对HBsAg和TP的筛查效果。方法回顾性统计分析厦门市中心血站2014年1月1日—2021年8月28日使用HBsAg/TP胶体金试纸初筛为阴性的415486名献血者血液样本,进入献血环节后,将血液样本进行酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测HBsAg和梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)抗体。ELISA检测TP抗体阳性样本进一步行梅毒螺旋体颗粒凝集(treponema pallidum particle agglutination,TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test,TRUST)检测。结果ELISA检测HBsAg阳性率为0.52%;ELISA检测TP抗体阳性率为0.18%,该阳性样本的TPPA阳性率为15.13%,TRUST阳性率为0.13%,其中1份为TRUST检测与TPPA试验双阳性。结论HBsAg/TP胶体金试纸对TRUST与TPPA双阳性的梅毒现症感染者具有很高的敏感性,但对TRUST阴性而TPPA阳性者的检测敏感性低于ELISA。血站在献血前使用HBsAg/TP胶体金试纸进行初筛,能同时减少因HBsAg阳性和TP抗体阳性而报废的血液,也能在献血初始步骤就将传染性高的梅毒携带者排除,降低了经输血传播HBsAg和TP的风险以及血站职员职业暴露的风险,同时避免了大量的医疗资源浪费。

关键词： 糖尿病   WBC   C反应蛋白   白介素6   全膝关节置换术  

摘要： 目的:探讨糖尿病对全膝关节置换术后WBC、CRP、ESR、IL-6等炎性指标的影响。方法:选取2022年1月-2024年10月我院关节外科行全膝关节置换的患者共80例,其中有糖尿病史患者40例,非糖尿病史患者40例,其中男性38名,女性42名。分为观察组和对照组,两组患者均在全身麻醉联合股神经麻醉下行全膝关节置换术。观察术前和术后1天、3天、30天WBC、CRP、ESR、IL-6的变化,记录患者术后发热及并发症情况。结果:观察组与对照组比较,患者血液中术前WBC、CRP、ESR、IL-6水平无明显差异(P>0.05)。术后第1天和术后第3天,观察组WBC、CRP、ESR、IL-6水平显著高于对照组(P<0.05)。术后30天,两组患者血液中WBC、CRP、ESR、IL-6水平无明显差异(P>0.05)。术后出现膝关节周围红肿、发热并发症率,观察组(57.5%)显著高于对照组(20.0%)。结论:糖尿病患者行全膝关节置换术后,血液中WBC、CRP、ESR、IL-6等炎性指标升高显著,感染风险增加,需及时调整、延长抗生素使用疗程,预防膝关节置换术后感染。

关键词： 口腔单纯疱疹病毒感染   Toll样受体9   髓样分化蛋白88   预后复发   相关性  

摘要： 目的分析口腔单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染患儿Toll样受体9(Toll like receptors 9,TLR9)、髓样分化蛋白88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)及相关细胞因子的表达水平,探讨HSV-1感染患儿TLR9、MyD88及相关细胞因子与预后复发的相关性。方法选取2021年1月至2024年6月在山东第一医科大学附属人民医院接受治疗的170例口腔HSV-1感染患儿,根据随访期间是否再次发生感染将患儿分为复发组和未复发组。采用实时荧光定量PCR技术检测患儿外周血中TLR9、MyD88 mRNA表达量;采用磁微粒化学发光法检测患儿血清白细胞介素(IL)-6、IL-10水平;通过logistic回归分析确定影响口腔HSV-1感染患儿预后复发的危险因素;Pearson相关性分析法用于评估TLR9、MyD88及相关细胞因子与口腔HSV-1感染患儿预后复发的相关性。结果根据随访检测结果,170例患儿中58例发生口腔HSV-1感染,纳入复发组;余下112例未发生口腔HSV-1感染,纳入未复发组。复发组患儿外周血TLR9、MyD88 mRNA及TLR9、MyD88共表达水平均高于未复发组[(95.75±5.47)%vs.(52.47±3.71)%、(70.59±4.32)%vs.(29.17±1.73)%和(71.53±5.75)%vs.(16.24±1.77)%],差异有统计学意义(P<0.05)。与未复发组比较,复发组患儿血清IL-6、IL-10水平明显升高[(82.16±6.47)pg/mL vs.(38.51±4.29)pg/mL,(6.37±0.94)pg/mL vs.(2.05±0.43)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05)。两组在免疫力低下、微量元素/维生素缺乏、密切接触感染源、TLR9、MyD88、IL-6以及IL-10水平方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,免疫力低下、微量元素/维生素缺乏、密切接触感染源、TLR9、MyD88、IL-6以及IL-10是口腔HSV-1感染患儿预后复发的主要危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,TLR9、MyD88、IL-6、IL-10与口腔HSV-1感染患儿预后复发均呈显著正相关(r=0.8591、0.8567、0.8371、0.8265,P<0.001)。结论口腔HSV-1复发感染患儿TLR9、MyD88、IL-6、IL-10水平均明显升高,TLR/MyD88信号通路可能在口腔HSV-1复发感染患儿预后复发机制中具有重要作用。