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关键词： 新生儿坏死性小肠结肠炎   白细胞介素-1β   肠道组织氧饱和度   诊断  

摘要： 目的探讨血清白细胞介素-1β(IL-1β)水平联合肠道组织氧饱和度(rSO_(2))对新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)的诊断价值。方法选取2021年1月至2023年10月山西省儿童医院收治的112例NEC患儿(NEC组)和32例非NEC患儿(对照组),采用酶联免疫吸附试验法检测血清IL-1β水平,肠道近红外光谱监测肠道rSO_(2)。通过多因素logistic回归分析新生儿NEC的影响因素,受试者操作特征曲线分析血清IL-1β水平联合肠道rSO_(2)对新生儿NEC的诊断价值。结果NEC组血清IL-1β水平高于对照组,肠道rSO_(2)低于对照组(P<0.05)。多因素分析结果显示,母乳喂养(OR=0.318,95%CI:0.108~0.933)、肠道rSO_(2)升高(OR=0.826,95%CI:0.744~0.916)为新生儿NEC的独立保护因素,IL-1β升高(OR=1.067,95%CI:1.031~1.105)为新生儿NEC的独立危险因素(P<0.05)。血清IL-1β水平联合肠道rSO_(2)诊断新生儿NEC的曲线下面积为0.900,大于血清IL-1β水平、肠道rSO_(2)单独诊断的0.788、0.807(P<0.05)。结论新生儿NEC血清IL-1β水平升高,肠道rSO_(2)降低,血清IL-1β水平联合肠道rSO_(2)对新生儿NEC的诊断价值较高。

关键词： Hyperphosphatemia   Sarcopenia   Inflammaging   IL-15   Myoblasts differentiation   Cellular senescence  

摘要： Aims: The association between aging-related hyperphosphatemia and sarcopenia has been documented, and evidence suggests that inflammaging is involved in the manifestation of sarcopenia. The present study investigates whether hyperphosphatemia triggers inflammation, thereby inducing the appearance of sarcopenia along with the cytokines involved in these processes. Materials and methods: RAW 264.7 macrophages were incubated with beta-glycerophosphate (BGP), as a phosphate donor, at different time intervals, to assess the production of proinflammatory markers. Conditioned medium from macrophages was collected and added to cultured C2C12 myoblasts to analyse whether proinflammatory molecules, released by macrophages, modified myogenic differentiation, cell senescence or myokine IL-15 expression. A neutralising antibody anti-TNF-alpha and recombinant IL-15 were added to evaluate the role of these cytokines in the observed effects. Additionally, TNF-alpha, IL-15, serum phosphate, and sarcopenia signs were evaluated in 5-month-old mice, 24-month-old mice and 24-month-old mice fed with a hypophosphatemic diet. Key findings: BGP increased TNF-alpha expression in macrophages through NFkB activation. Conditioned medium from BGP-treated macrophages impaired myogenic differentiation in differentiating myoblasts and promoted cellular senescence and reduced IL-15 expression in undifferentiated myoblasts. These effects were mediated by TNF-alpha. Old mice displayed reduced expression of muscle IL-15 and elevated circulating TNF-alpha, along with increased serum phosphate levels, which correlated with the appearance of sarcopenia indicators. The hypophosphatemic diet prevented these changes in old mice. Significance: Hyperphosphatemia induces TNF-alpha production in macrophages, which contributes to the reduced expression of muscular IL-15. This mechanism may play a role in inducing sarcopenia in elderly mice.

关键词： 维生素   降钙素原   免疫球蛋白   肺炎支原体肺炎   感染性疾病  

摘要： 目的探讨维生素A(VitA)、降钙素原(PCT)和免疫球蛋白对于小儿肺炎支原体肺炎病程进展的影响。方法回顾性分析2021年1月至2024年12月商丘市第三人民医院收治的肺炎支原体肺炎120例患儿的资料。按照患儿是否诊断为重症实施分组,分为轻症组和重症组。其中轻症组82例,重症组38例,并比较两组患儿血中VitA、免疫球蛋白、PCT浓度分析VitA、免疫球蛋白、PCT对肺炎支原体肺炎病情严重程度的鉴别效能。结果重症肺炎患儿的VitA水平显著下降,患儿的血清免疫球蛋白A(IgA)水平均较低,较轻症肺炎患儿的该指标水平显著低下,差异均有统计学意义(P<0.05)。而重症肺炎患儿的PCT水平明显高于轻症肺炎患儿,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患儿的血清免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic多变量分析显示,VitA、IgA和PCT对患儿的重症性均有影响,差异均有统计学意义(P<0.05)。由该分析获得的结果可以构建衡量患儿病重与否的logistic预测回归模型为:Logit(P)=4.002-7.468×VitA-0.028×IgA+11.042×PCT。根据VitA含量、体液IgA含量、PCT含量及回归模型P值测定儿童疾病的严重程度,分别依据受试者工作特征(ROC)曲线进行分析,其ROC曲线下面积分别为0.778,0.796,0.767,0.909。结论重症肺炎支原体感染患儿的VitA、IgA、PCT的变化明显,可以对患儿早期的病情严重程度进行良好的反映,能够提供必要的临床诊断信息,且联合预测效率优于单项指标,可以为临床医生判断疾病的严重程度和预后效果提供较好的参考依据。

关键词： 半夏(Pinellia ternata)   大豆花叶病毒   外壳蛋白   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 为建立半夏(Pinellia ternata)花叶病的主要病原大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)的快速检测方法,采用RT-PCR方法扩增SMV外壳蛋白基因并构建其原核表达载体,以纯化的融合表达蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,制备的抗血清经ELISA检测,其效价为1∶102400,对抗原的Western blot检测下限为300 ng,且具有较强的特异性。

关键词： 慢性乙型肝炎   T淋巴细胞亚群   肝功能   HBV DNA   相关性  

摘要： 目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群与肝功能及HBV DNA之间的关联。方法纳入2022年3月至2024年3月在安徽省临泉县人民医院诊断的70例慢性乙型肝炎患者为观察组,基于HBV DNA载量将其划分为高载量组(36例)和低载量组(34例),以及健康对照组(n=40)。测定所有参与者的外周血T淋巴细胞亚群,记录肝功能指标和HBV DNA。运用Pearson相关性分析探讨外周血T淋巴细胞与肝功能指标及HBV DNA的相关性。结果高载量组患者的CD4^(+)水平(42.17±5.40%)和Alb水平(31.21±4.13 g/L)低于低载量组(CD4^(+):45.08±6.13%,Alb:36.32±5.26 g/L)和对照组(CD4^(+):48.50±5.29%,Alb:45.83±6.15 g/L)。高载量组患者的CD8+水平(29.50±3.30%)、CD4^(+)CD25^(+)水平(35.09±6.12%)、ALT水平(62.86±9.25 U/L)、AST水平(59.35±6.08 U/L)、TBil水平(37.19±3.27μmol/L)均高于低载量组(CD8+:23.82±3.76%,CD4^(+)CD25^(+):30.57±5.41%,ALT:37.52±5.30 U/L,AST:35.72±5.17 U/L,TBil:19.61±4.43μmol/L)和对照组(CD8+:21.26±3.16%,CD4^(+)CD25^(+):26.75±3.34%,ALT:18.35±3.11 U/L,AST:16.22±3.23 U/L,TBil:9.21±2.65μmol/L)。高载量组患者的HBV DNA水平(7.48±2.09 lgIU/mL)高于低载量组(5.53±1.11 lgIU/mL)(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,患者CD4^(+)水平与ALT、AST、TBil、HBV DNA呈显著负相关,与Alb呈显著正相关;CD8+、CD4^(+)CD25^(+)与ALT、AST、TBil、HBV DNA呈显著正相关,与Alb呈显著负相关(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群与肝功能指标及HBV DNA含量密切相关,可作为评估疾病进展和预后的重要免疫学指标。

关键词： 结直肠癌   乌梅丸   T淋巴细胞   干扰素刺激因子   作用机制   中药研究  

摘要： 目的探讨乌梅丸对结直肠癌的抗癌能力和对T细胞表达的影响及其作用机制。方法采用皮下移植瘤构建法建立小鼠结直肠癌模型,然后随机将小鼠分为对照组(0.9%氯化钠溶液),乌梅丸低剂量组(20g/kg)和乌梅丸高剂量组(40g/kg);记录小鼠体质量、生存期、肿瘤体积以及肿瘤质量。随后采用苏木精-伊红(HE)染色法观察乌梅丸对小鼠结直肠肿瘤的影响,采用免疫组织化学染色法检测乌梅丸对小鼠肿瘤组织中细胞核增殖抗原-67(Ki67)表达的影响,结合流式细胞术分析乌梅丸对结直肠癌小鼠肿瘤组织中CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞数量的影响,通过免疫荧光染色法观察乌梅丸对小鼠肿瘤组织中磷酸化干扰素刺激因子(p-STING)表达的影响,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测乌梅丸对小鼠血清中β干扰素(IFN-β)含量的影响,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测乌梅丸对小鼠肿瘤组织中IFN-βmRNA表达的影响。结果与对照组比较,乌梅丸干预可降低肿瘤质量和肿瘤体积,同时延长结直肠癌小鼠的生存期(P<0.01)。HE染色和免疫组织化学染色法检测结果显示,与对照组相比,乌梅丸干预后肿瘤坏死部分明显增多,且肿瘤组织中Ki67表达降低(P<0.01)。通过流式细胞术结果分析得出,与对照组相比,乌梅丸对肿瘤组织中CD3^(+)T细胞和CD4^(+)T细胞的数量无明显影响(P>0.05),但却显著提高了CD8^(+)T细胞的数量(P<0.01)。同时,乌梅丸上调了结直肠癌小鼠肿瘤组织中p‐STING水平(P<0.01),以及上调了血清及肿瘤组织中IFN-β的表达水平(P<0.01)。结论乌梅丸可通过激活干扰素刺激因子(STING)信号通路促进肿瘤免疫微环境中CD8^(+)T细胞的浸润,从而发挥抗结直肠癌的作用。

关键词： 非洲猪瘟病毒   D250R蛋白   原核表达   多克隆抗体   间接ELISA  

摘要： D250R是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了重组原核表达质粒pET-32a-D250R,经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R,该蛋白和真核细胞表达的重组蛋白Flag-D250R均能被ASFV标准阳性血清识别,证明D250R蛋白是ELISA抗体检测方法的潜在靶标。在此基础上,以纯化的重组蛋白为免疫原制备小鼠源多克隆抗体,该抗体ELISA效价大于1∶409600。Western-blot试验表明该抗体与Flag-D250R和His-D250R均具有良好的反应性,证明His-D250R蛋白具有良好的抗原性。进一步以His-D250R蛋白为包被抗原,通过对抗原包被、封闭、抗体孵育、底物反应等条件的优化,建立间接ELISA抗体检测方法。其阴阳性临界值为0.359,检测PRV、PRRSV、PCV2、CSFV等阳性血清结果均呈阴性,灵敏度达1∶3200,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,与商品化试剂盒符合率达98.8%。上述结果表明,基于His-D250R蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法特异性、敏感性、重复性良好,具备一定临床应用价值,可以为非洲猪瘟诊断方法开发提供重要支持。

关键词： 溃疡性结肠炎   老年   核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白6(NLRP-6)   降钙素原   白细胞介素-18   疾病活动度  

摘要： 目的:分析老年溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白6(NLRP-6)及血清降钙素原(PCT)和白细胞介素-18(IL-18)的表达水平,并探讨其临床意义。方法:选取2021年12月至2024年2月于我院就诊的100例UC患者,治疗前肠镜检查时镜下取肠黏膜组织标本检测NLRP-6表达水平,肠镜检查前采集血液标本检测血清PCT及IL-18水平,分析不同活动期UC患者上述指标的差异,以受试者工作特征曲线(ROC)获取上述指标对中重度活动期UC的诊断效能。结果:相较于缓解期患者,活动期UC患者肠黏膜NLRP-6表达水平明显降低(P<0.05),而血清PCT、IL-18水平明显升高(P<0.05);相较于轻度活动期UC患者,中度、重度UC患者肠黏膜NLRP-6表达水平明显降低(P<0.05),而血清PCT、IL-18水平明显升高(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,老年UC患者疾病活动度与肠黏膜NLRP-6表达水平呈负相关(P<0.05),与血清PCT、IL-18水平呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,肠黏膜NLRP-6、血清IL-18、血清PCT评估中重度活动期UC的曲线下面积AUC(95%CI)分别为0.92(0.76,0.96)、0.85(0.72,0.96)和0.97(0.91,1.02),血清IL-18联合血清PCT评估的AUC(95%CI)为0.98(0.91,1.00)。结论:肠黏膜NLRP-6、血清PCT、血清IL-18评估老年UC患者病情程度均具有一定价值,血清IL-18联合血清PCT效果更好,更有助于精确评估老年UC患者疾病活动度。