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关键词： 儿童   门冬酰胺酶   复发性胰腺炎   急性淋巴细胞白血病   危险因素  

摘要： 目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿二次门冬酰胺酶相关性胰腺炎(AAP)的临床特点及危险因素。方法病例对照研究。回顾性分析2013年11月至2023年11月在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心接受门冬酰胺酶化疗并诊断为胰腺炎的ALL患儿临床资料。采用多因素Logistic回归确定发生二次AAP的独立危险因素。结果共纳入78例AAP患儿,其中32例存在门冬酰胺酶再暴露,有10例(31.25%)发生二次AAP,其危险度分层均为中危,年龄为(8.26±0.87)岁。发生二次AAP前的门冬酰胺酶再暴露次数为(2.10±0.99)次,2例发生于强化期,8例发生于再诱导期。3例(30.00%)为1级胰腺炎,7例(70.00%)为2级胰腺炎,无患儿因二次AAP死亡。2例(20.00%)出现AAP相关长期并发症,分别为慢性胰腺炎和胰岛素依赖性糖尿病。在排除2例因缺少首次AAP相关临床资料的患儿后,根据是否发生二次AAP,将30例再暴露患儿分为对照组(22例)和病例组(8例)。单因素分析显示,2组患儿的活化部分凝血活酶时间(APTT)[(29.80±5.25)s比(38.47±1.42)s,t=-0.45,P=0.023]和总胆红素(TBIL)[(18.40(11.00,25.53)μmol/L比24.30(19.93,46.48)μmol/L,Z=-0.32,P=0.020]比较,差异均有统计学意义。进一步通过多因素Logistic回归分析,在调整了年龄和免疫分型后,TBIL(HR=1.115,P=0.048)是发生二次AAP的独立危险因素。比较仅发生过一次AAP的患儿(68例)与二次AAP患儿(10例)的预后,2组在长期并发症(P=0.168)和最终生存结局(P=0.716)方面差异均无统计学意义。结论二次AAP多发生于继续使用门冬酰胺酶第2剂后,再诱导期为发病高峰期。高胆红素血症可能是发生二次AAP的危险预警因素。与一次AAP相比,二次AAP并未导致患儿死亡率和AAP相关长期并发症的发病率升高。

关键词： 血型   A抗原   c.664G>A   A抗原弱表达   突变  

摘要： 目的对1例A抗原弱表达血型患者的血清学特点及基因突变特征进行分析,探讨A抗原弱表达产生的原因。方法采用盐水法、微柱凝集试验和吸收放散试验等血清学检测鉴定患者的ABO血型;通过ABO基因外显子测序和单倍体分型分析等分子生物学检测,明确患者血型的基因型及突变情况;以“ABO血型检测方法”和“ABO血型A亚型”为关键词,对中国知网(CNKI)和科学引文索引(SCI)数据库中2005年~2024年发表的文献进行检索。结果患者ABO血型正定型提示O型血,反定型提示A型血,正反定型结果不符;吸收放散试验结果提示患者红细胞表面抗原可能为A型;ABO基因外显子测序结果显示,患者为杂合子,携带261G/del、467C>T和664G>A突变;单倍体分型分析结果显示,c.664G>A和c.467C>T突变位于同一染色体(ABO^(*)A1.02)上,261G/del突变位于另一同源染色体(O.01.01)上。因此,该患者血型基因为ABO^(*)A1.02(携带突变664G>A)/O.01.01杂合子。文献检索共检索到文献75篇,排除25篇,最终保留文献50篇,结合病例学习和文献学习发现,c.664G>A突变可能导致糖基转移酶A(GTA)活性降低,与A抗原弱表达相关。结论患者血型基因为罕见的ABO^(*)A1.02(突变)/O.01.01杂合导致的A亚型,突变位点c.664G>A位于等位基因ABO^(*)A1.02上,是导致A抗原弱表达的原因。当血清学方法不能准确鉴定患者血型时,应采用分子生物学方法,以了解血型基因型,确保输血安全。

关键词： 弥漫大B细胞淋巴瘤   血管内大B细胞淋巴瘤   免疫表型   淋巴细胞  

摘要： 目的探讨血管内大B细胞淋巴瘤(IVLBCL)的临床病理特点、免疫表型、病理诊断及鉴别诊断,旨在提高对该疾病的认识及病理诊断的精准性,为临床诊疗提供借鉴和参考。方法回顾性总结和分析1例临床较罕见的IVLBCL患者临床资料,分析和探讨其临床病理特点、免疫表型,并复习相关文献。采用Elivision法免疫组织化学染色标记CD20、CD79a、CD3、CD5、CD10、CD31、CD30、BCL-2、BCL-6、MUM1、C-MYC、PAX5、D2-40、CKpan、ALK、Ki67,原位杂交法检测EBER,荧光原位杂交(FISH)检测BCL-2、BCL-6和C-MYC,分析检测结果。结果患者,男,65岁,腋窝和腹股沟肿大淋巴结镜下见淋巴结结构破坏,密集扩张的薄壁毛细血管腔内充满异型淋巴样细胞,被膜外脂肪组织内也可见扩张小血管腔内充满异型淋巴样细胞,瘤细胞形态较单一,中等大小,可见少数核仁凸显的大细胞,胞浆丰富,核分裂易见。瘤细胞CD20、CD79a、MUM1、PAX5、BCL-2、BCL-6、C-MYC均为阳性,CD3、CD5、CD10、CD30、D2-40、CKpan、ALK均为阴性,Ki67增殖指数70%,EBER阴性;FISH检测BCL-2、BCL-6和C-MYC均未见异常。结论IVLBCL较为罕见,应与具有相似特征的淋巴细胞白血病、转移癌、黑色素瘤等进行鉴别。

关键词： 型胶原   Th17细胞   增殖模型   IL-23  

摘要： 目的:建立Ⅱ型胶原(Collagen TypeⅡ,CⅡ)诱导的Th17细胞体外增殖模型,并深入研究不同实验条件对细胞增殖的影响。方法:根据研究要求,收集适量的正常和CIA小鼠脾淋巴细胞,小鼠脾淋巴细胞被随机分为六组,分别接受以下处理:未处理(对照组)、灭活CⅡ刺激、活性CⅡ刺激、低(2 ng/mL)、中(10 ng/mL)、高(50 ng/mL)浓度IL-23处理。所有细胞在标准条件下培养60小时后,采用流式细胞术分析CD4+RORγt+Th17细胞的比例。结果:体外培养60 h后,正常小鼠脾淋巴细胞经灭活或活性CⅡ刺激Th17细胞比率均较培养前显著下降,CIA小鼠脾淋巴细胞未用CⅡ刺激Th17细胞比率也较培养前显著下降,而CIA小鼠脾淋巴细胞以灭活CⅡ或活性CⅡ刺激后Th17细胞比率均较之前不同程度的提升;该组与对照组横向对比得出差异有统计学意义(P<0.05)。进一步的分析发现,这一比率在活性CⅡ与灭活CⅡ的两组之间差异较小(P=0.44)。另外,经过本次研究得出改变IL-23的浓度并未影响体外CIA小鼠Th17比率,然而添加IL-23p19抗体中和试剂的情况下,体外CIA小鼠脾淋巴细胞Th17细胞比率减小,与对照组相比差异显著(P<0.01)。结论:本研究建立了Ⅱ型胶原诱导的Th17细胞体外增殖模型,探讨了IL-23与胶原活性对Th17细胞增殖的影响。结果表明,CⅡ刺激显著促进CIA小鼠Th17细胞增殖,活性CⅡ与灭活CⅡ均能诱导增殖,且IL-23对Th17细胞维持至关重要。这些发现为风湿性疾病的机制研究和IL-23/IL-17通路靶向治疗提供了新的实验依据和理论支持,对免疫调控和药物开发具有重要意义。

关键词： 自身免疫疾病   抗可提取性核抗原抗体   抗核抗体   灵敏度   特异度   ROC曲线  

摘要： 目的探究自身免疫疾病诊断中抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)联合抗可提取性核抗原抗体(anti-extractable nuclear antigen antibody,抗ENA抗体)检测的应用效果。方法随机选取2023年1月—2024年1月到新沂市人民医院就诊的571例疑似患有自身免疫疾病的患者作为研究对象,所有患者均接受临床综合诊断、ANA、抗ENA抗体检测,并根据临床综合诊断结果分析ANA、抗ENA抗体单独检测及联合检测的诊断效能。结果临床综合诊断结果显示,在571例疑似患者中,自身免疫系统疾病者阳性271例、阴性300例。ANA、抗ENA抗体两者单独及联合检测诊断阳性分别为267例、177例、270例。两者联合检测的特异度、灵敏度、准确度分别为94.00%(282/300)、92.99%(252/271)、93.52%(534/571),均高于ANA单独检测[78.33%(235/300)、74.54%(202/271)、76.53%(437/571)]、抗ENA抗体单独检测[91.33%(274/300)、55.72%(151/271)、74.43%(425/571)],差异均有统计学意义(χ^(2)=39.604,98.860,82.969;P均<0.05)。结论联合检测ANA与抗ENA抗体在自身免疫疾病诊断中具有更高的诊断价值,可提高检测的灵敏度和特异度,从而为临床诊断提供更为准确的依据。

关键词： 大黄灵仙方   胆汁淤积性肝纤维化   NF-κB/TGF-β1信号通路   Th1/Th2细胞   免疫平衡  

摘要： 目的 探讨大黄灵仙方对胆汁淤积性肝纤维化(CLF)大鼠Th1/Th2细胞免疫失衡的作用。方法 将20只SD大鼠采用完全随机方法分为正常组、模型组、熊去氧胆酸组(0.063 g/kg)、大黄灵仙方组(4.8 g/kg),每组5只。除正常组外,其余各组大鼠开腹并游离结扎胆总管,结扎术后第2天开始灌胃给药,第3周灌胃结束后取材。采用HE、Masson染色观察大鼠肝组织纤维化程度;试剂盒测定血清总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)水平;免疫荧光、免疫组化染色法检测肝组织TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3阳性细胞面积百分比;Western blot、RT-qPCR法检测肝组织TGF-β1、Smad4、NF-κB p65、Collagen I、CollagenⅢ蛋白及mRNA表达量;流式细胞术检测外周血辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)水平,计算Th1/Th2比值。结果 与模型组比较,熊去氧胆酸组和大黄灵仙方组大鼠肝细胞、肝小叶、肝索排列较整齐,可见少量脂肪变性,肝纤维结缔增生明显减少,纤维条索明显变窄,仅见少量蓝色纤维间隔,中央静脉、汇管区的炎症浸润等病理损伤情况大有改善;血清TBA、TBil、AKP、γ-GT、ALT、AST水平降低(P<0.05);肝组织TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达降低(P<0.05);肝组织TGF-β1、Smad4、NF-κB p65、Collagen I、CollagenⅢ蛋白及mRNA表达降低(P<0.05);外周血中Th1细胞数量增加,Th2细胞数量减少,且Th1/Th2比值升高(P<0.05);以大黄灵仙方组效果较佳。结论 大黄灵仙方可能通过调控NF-κB/TGF-β1信号通路,维持Th1/Th2细胞免疫平衡,抑制肝星状细胞活化,起到减轻或逆转CLF的作用。

关键词： miR-193a-5p   慢性心力衰竭   心功能   炎症   IL-33/ST2信号通路  

摘要： 目的探究过表达miR-193a-5p抑制炎症因子释放对慢性心力衰竭(Chronic heart failure,CHF)模型大鼠心功能的保护作用及对IL-33/ST2信号通路的调控作用。方法40只SPF级Wistar大鼠被随机分配为Sham组(n=10)、CHF组(n=10)、NC组(n=10)、miR-193a-5p组(n=10);除Sham组外其余各组大鼠被用于建立CHF模型。随后,NC组和miR-193a-5p组的大鼠分别通过尾静脉注射5nmol/L的NC-agomiR、miR-193a-5p-agomiR,每3天注射一次,持续4周。而Sham组和CHF组的大鼠则接受等量的生理盐水注射。实验终点多普勒彩色超声仪检测4组大鼠左室后壁厚度(left ventricular posterior wall,LVPWs)、舒张末期左室后壁厚度(left ventricular posterior wall dimensions,LVPWd)、收缩期室间隔厚度(left ventricular systolic interventricular septal,IVSs)、舒张末期室间隔厚度(interventricular septal thickness at diastole,IVSd)和左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF),计算4组大鼠心脏表型指数心脏肥大指数(heart weight/body weight,HW/BW)与左心室肥大指数(left heart body weight,LVW/BW)的变化,取4组大鼠心脏组织进行组织形态学分析,采用qPCR技术检测4组大鼠心脏组织中miR-193a-5p的表达水平;利用Tunel染色法检测4组大鼠心肌组织的凋亡;Elisa法测定心肌组织中炎症因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factoralpha,TNF-α)的水平;Western blot检测心肌组织中白介素-33(interleukin-33,IL-33)、血清生长刺激表达基因-2蛋白(growth stimulation expressed gene 2,ST2)蛋白表达水平。结果与Sham组相比,CHF组和NC组的心脏体积增大、几何结构改变、心肌变薄以及梗死区域苍白,而miR-193a-5p组则表现出部分缓解。此外,在心脏组织的miR-193a-5p表达水平上,CHF组和NC组呈现降低趋势,而miR-193a-5p组的表达则上升(P<0.01);CHF组和NC组LVPWs、LVPWd、IVSs、IVSd、HW/BW和LVW/BW上升,LVEF降低(P<0.01),miR-193a-5p组LVPWs、LVPWd、IVSs、IVSd、HW/BW和LVW/BW降低但高于Sham组,LVEF上升但低于Sham组(P<0.01);CHF组和NC组IL-6、TNF-α表达上升(P<0.01),miR-193a-5p组降低但高于Sham组(P<0.01);CHF组和NC组IL-33及ST2蛋白表达升高,而miR-193a-5p组降低(P<0.01)。结论过表达miR-193a-5p对CHF大鼠心脏功能具有保护作用,其机制可能与降低心肌组织细胞凋亡及抑制IL-33/ST2信号通路相关。

关键词： 实验技术   Th1Th2平衡   血清细胞因子   细胞免疫学  

摘要： 《细胞免疫学实验研究方法》由孙黎飞主编,人民军医出版社出版,ISBN:9787509127131。本书全面涵盖了细胞免疫学领域的各类实验技术,从基础的细胞培养、分离与鉴定,到先进的流式细胞术、免疫荧光技术,再到分子层面的基因检测与分析方法,对每一种实验技术的原理、操作流程、注意事项以及应用场景都进行了详细且专业的讲解。

关键词： 癌变   肿瘤标志物   体检   癌胚抗原   不一定   异常  

摘要： 老李这两年在单位的体检中都发现癌胚抗原结果异常。盯着检测项目中的“癌”字,老李和家人很担心:是不是身体哪里有肿瘤T?医生解释说,癌胚抗原属于肿瘤标志物类的检查项目,建议他再做其他相关影像学方面的检查。结果出来后,没发现什么问题。虚惊一场的老李纳闷:肿瘤标志物到底是什么,为什么没患肿瘤也会被查出异常呢?