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关键词： 金属硫蛋白3   内置佐剂   重组疫苗   破伤风毒素C片段  

摘要： 将金属硫蛋白3(MT-3)基因序列与破伤风毒素C片段(HC)基因序列通过连接子进行融合,构建pET30a-MT-3-HC重组质粒,转化至大肠杆菌*** BL21(DE3)感受态细胞中,重组质粒经双酶切鉴定。诱导M_(3)C重组蛋白表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,Ni-NTA亲和层析纯化。将PBS、HC、TT(破伤风类毒素)、M_(3)C、M_(3)C+CpG(复合佐剂)5组疫苗肌肉注射小鼠,每隔7 d进行1次免疫,共3次,定期从尾静脉采集血样。采用ELISA法测定血清中特异性IgG抗体滴度的变化,并在第28天测定抗体分型(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgM)和细胞因子(IL-4、IFN-γ)水平。结果显示,pET30a-MT-3-HC重组质粒构建成功,超声破碎诱导的细菌培养上清液中M_(3)C重组蛋白高表达,纯化后观察到单条带;ELISA结果显示,M_(3)C+CpG组特异性IgG抗体滴度在第3次免疫后14 d达到峰值,为3.54×10~5,分别是HC组、TT组和TT组的141、70和6.6倍;抗体分型分析显示,与PBS、HC和TT组相比,M_(3)C组和M_(3)C+CpG组特异性抗体分型滴度显著升高(P<0.05),其中M_(3)C组IgG1/IgG2a比值大于1,而M_(3)C+CpG组IgG1/IgG2a比值约为1;M_(3)C组和M_(3)C+CpG组血清中IFN-γ和IL-4浓度也显著高于其他试验组(P<0.05)。结果表明,含有MT-3内置佐剂和破伤风毒素C片段的抗原成功表达,并表现出较强的免疫原性,为这种重组疫苗的研制奠定了试验基础。

关键词： 结直肠癌   血脂   补体   白蛋白   Fisher判别模型  

摘要： 目的探讨8项脂类生物标志物、4项补体类生物标志物及白蛋白(ALB)在结直肠癌(CRC)患者血清中的水平变化及其对CRC的筛查价值。方法选取2022年8月至2024年1月于上海交通大学医学院附属仁济医院就诊的CRC初治患者120例为CRC组,体检健康者110例为健康对照(HC)组。检测各组血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(Apo)A1、ApoA2、ApoB、ApoE 8项脂类生物标志物,血清补体C3(C3)、补体C4(C4)、补体C1q(C1q)、补体C1抑制剂(C1INH)4项补体类生物标志物,癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)125、CA19-93项肠道肿瘤标志物及血清白蛋白(ALB)水平。采用独立样本t检验和Mann-Whitney U检验进行组间比较,采用逐步法Fisher判别算法对各项生物标志物进行拟合并建立筛查模型,采用受试者工作特征曲线分析单项指标及模型的诊断效能。结果CRC组血清ApoA1、ApoA2、HDL-C、TC、ALB水平低于HC组(P<0.05),C1INH、C4、CEA水平高于HC组(P<0.05)。单项生物标志物中,ALB的诊断效能最高,曲线下面积(AUC)为0.909,灵敏度为77.50%,特异度为94.55%。ApoA2、C1INH、ALB组成的筛查模型的AUC为0.978,灵敏度为91.67%,特异度为98.86%,诊断效能高于任一单项生物标志物。结论ApoA2、C1INH及ALB在CRC患者血清中异常表达,ApoA2、C1INH和ALB组成的筛查模型可为CRC的筛查和临床辅助诊断提供参考。

关键词： 轮状病毒   免疫胶体金技术   性能评价   快速检测  

摘要： 目的通过制备A群轮状病毒(group A rotavirus,RVA)抗原检测试剂盒并对其性能进行评价,为轮状病毒(rotavirus,RV)的快速检测提供有效手段。方法采用胶体金纳米粒子(gold nanoparticles,AuNPs)标记Rabbit anti-G1P[8]Ab1,将Goat anti-G1P[8]Ab2及Goat Anti-Rabbit IgG分别包被在硝酸纤维膜(nitrocellulose membrane,NC膜)的检测线(T线)和质控线(C线)上,将吸水纸、NC膜、结合垫、样品垫依次组装到PVC底板上,切割成3.75毫米/条,安装到适配卡壳,即制成RVA抗原检测试剂盒;采用轮状病毒抗原检测国家参考品(简称“国家参考品”)和本室制备企业参考品,分别对试剂盒敏感度、特异性、包容性、高剂量钩状效应、稳定性、重复性等性能进行考察,同时用同类产品对比评价。结果敏感度:用国家参考品L考察,最低检出限为1∶128倍稀释,相当于企业参考品最低检出限浓度1×10^(4)pfu/ml或2344copies/ml的病毒含量水平,且与同类商品化产品比较,敏感度高8倍左右;特异性:本试剂盒与10种临床常见腹泻致病病原体均不发生交叉反应;包容性:本试剂盒能同时检测G1~G4、G8、G9等多种不同血清型RVA;重复性:本试剂盒重复性检测考察,条带颜色均一,一致性较好;高剂量钩状效应:在1×10^(7)pfu/ml范围内不存在高剂量钩状效应;热加速稳定性:分别在37℃、50℃条件下保存14天,试剂盒检测条带清晰且均匀。结论本研究制备了性能良好的RVA抗原检测试剂盒,适用于临床辅助诊断、流行病学研究及疫苗毒株筛选等多方面快速检测工作,具有良好的应用前景及实用价值。

关键词： 病毒性脑炎   儿童   碱性成纤维细胞生长因子   干扰素γ  

摘要： 目的通过检测病毒性脑炎患儿血清中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、干扰素γ(IFN-γ)水平,分析bFGF、IFN-γ与病情严重程度的关系及对儿童病毒性脑炎的诊断效能。方法选取2019年7月至2020年12月邢台市人民医院儿科收治的病毒性脑炎患儿57例作为病毒组,并根据严重程度分为轻型(33例,轻病毒组)、中型(15例,中病毒组)、重型(9例,重病毒组),另取正常体检儿童43例为对照组。通过检测血清bFGF、IFN-γ水平,分析各组中bFGF、IFN-γ水平差异。Pearson相关法分析血清bFGF与IFN-γ水平相关性。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清bFGF、IFN-γ对儿童病毒性脑炎的诊断价值。结果与对照组相比,病毒组血清bFGF、IFN-γ水平均升高,差异有统计学意义(t值分别为5.700、7.234,P<0.05);轻病毒组、中病毒组、重病毒组bFGF、IFN-γ水平依次升高,差异有统计学意义(F值分别为9.554、10.967,P<0.05);Pearson相关法分析显示,病毒组血清bFGF与IFN-γ水平呈正相关性(r=0.528,P<0.001);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清bFGF、IFN-γ水平及二者联合诊断病毒性脑炎的曲线下面积(AUC)分别为0.784(95%CI:0.694~0.874)、0.878(95%CI:0.812~0.944)、0.910(95%CI:0.853~0.967);血清bFGF、IFN-γ水平及二者联合检测病毒性脑炎患儿,与临床诊断标准相比Kappa值分别为0.479、0.620、0.609,P<0.05。结论病毒性脑炎患儿血清bFGF、IFN-γ水平升高,bFGF与IFN-γ呈正相关性,bFGF、IFN-γ联合有助于临床诊断儿童病毒性脑炎。

关键词： 赖氨葡锌颗粒   消旋卡多曲   腹泻   肠道微生态   T淋巴细胞亚群  

摘要： 探讨两种药物联合对腹泻患儿肠道微生态及T淋巴细胞亚群的影响效果。方法 选取2023年1月至2023年12月本院收治的腹泻患儿120例。对照组给予常规治疗加消旋卡多曲,观察组在对照组基础上加用赖氨葡锌颗粒。比较两组治疗前后肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌)、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)水平及临床疗效。结果 治疗后,观察组双歧杆菌、乳酸杆菌水平显著高于对照组,大肠杆菌水平显著低于对照组(P<0.05);观察组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平显著高于对照组(P<0.05);观察组退热时间、止泻时间显著短于对照组(P<0.05);观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论 赖氨葡锌颗粒联合消旋卡多曲能有效改善腹泻患儿肠道微生态平衡,增强免疫功能,缩短病程,提高临床疗效,值得临床推广应用。

关键词： 通络三生饮酊剂   癌性疼痛   炎症因子   白介素-1β   肿瘤坏死因子-α   前列腺素2  

摘要： 目的通过构建小鼠癌痛模型,探究通络三生饮酊剂外治癌性疼痛的作用机制。方法于KM小鼠右腿坐骨神经周围肌肉处接种S180细胞,通过瘤体压迫坐骨神经制备癌痛模型,并随机分为模型组、通络三生饮高、低剂量组和对照组,每组10只,另设10只健康KM小鼠作为空白组,每组小鼠雌雄各半。造模成功后开始给药,连续给药12d。治疗前后利用热板仪和Von Frey纤维丝分别检测小鼠热痛阈值及机械性痛阈值,Elisa法检测血清及瘤体中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和前列腺素2(PGE2)含量。结果与空白组相比,模型组、通络三生饮高、低剂量组和对照组小鼠热痛阈值和机械性痛阈值均于造模后第8天降低(P<0.01),且无组间差异(P>0.05),治疗结束后,与模型组相比,通络三生饮高、低剂量组小鼠热痛阈值和机械性痛阈值升高(P<0.01,P<0.05),血清中IL-1β、TNF-α及PGE2含量降低(P<0.01,P<0.05)。结论通络三生饮酊剂能够缓解小鼠癌痛,其机制可能通过抑制外周炎症因子水平发挥作用。

关键词： 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1   白介素1β   白细胞介素18   2型糖尿病肾病   疾病分期   相关性分析  

摘要： 目的:探究血清半胱天冬酶-1(Caspase-1)、白介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)与2型糖尿病肾病分期的相关性研究。方法:回顾性分析2022年10月至2024年10月期间,本院收治的2型糖尿病肾病患者共计148例。通过查阅患者电子病历档案、医院信息系统等途径,对本项目研究对象的基线资料、临床诊断结果以及血清学水平进行采集。根据糖尿病肾病分期(Ⅰ~Ⅴ期)情况,对上述研究对象进行分组。探究上述血清学指标应用于2型糖尿病肾病患者临床分析的相关性。结果:四组研究对象对比结果显示,伴随着2型糖尿病肾病患者疾病分期的不断进展(从Ⅰ~Ⅴ),研究对象的Caspase-1、IL-1β、IL-18水平呈现出逐渐升高的趋势,且组间对比结果显示差异均存在统计学意义(P<0.05);研究结果显示,2型糖尿病肾病分期同Caspase-1、IL-1β、IL-18水平之间存在显著的正相关关系(P<0.05)。结论:血清Caspase-1、IL-1β、IL-18水平同糖尿病肾病分期之间呈正相关。

关键词： CD181   CXCR1   hemolytic anemia and mRNA   IL-8   SLE  

摘要： Background & Objective: Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is an autoimmune disease characterized by immune dysregulation, autoantibody production, and organ damage, notably in the kidneys. Cytokine imbalances contribute to SLE's diverse clinical presentations. This study investigated the roles of interleukin-8 (IL-8) and its receptor, CD181 (CXCR1), in SLE pathogenesis, specifically focusing on their association with hemolytic anemia, a severe complication. Methods: This research investigates the role of interleukin-8 (IL-8) and its cognate receptor, CXCR1 (CD181). It was analyzed clinical and demographic data from 250 SLE patients and quantified IL-8 and CD181 mRNA and protein expression in samples from patients with active SLE, inactive SLE, and SLE complicated by hemolytic anemia, comparing them to healthy controls. Results: Of the 250 samples, 84% were from SLE patients, with 67% in the active disease phase. Significant upregulation of both IL-8 and CD181 mRNA and protein was observed in SLE patients compared to controls. Specifically, mRNA expression was significantly elevated in active SLE (p=0.0001) and inactive SLE (p=0.01). Notably, IL-8 mRNA expression was significantly higher in SLE patients with hemolytic anemia (p<0.0001) compared to those without (p<0.01(. Conclusion: These findings suggest that the IL-8/CD181 axis plays a crucial role in the inflammatory processes and tissue damage associated with SLE, particularly in the development of hemolytic anemia. © 2025, Iran. J. Pathol. All rights reserved.

关键词： 左西替利嗪口服液   多西环素   支原体肺炎   免疫球蛋白   炎症因子  

摘要： 目的:探究左西替利嗪口服液辅助多西环素片对支原体肺炎患儿免疫球蛋白及炎症因子的影响。方法:选取我院于2021年6月至2024年6月收治的60例支原体肺炎患儿,根据不同治疗方法分为对照组(多西环素片,n=30)和观察组(盐酸左西替利嗪口服液^(+)多西环素片,n=30)。治疗7 d后,比较不同组间的疗效、临床症状改善时间、免疫功能指标和血清炎症因子水平。结果:观察组治疗总有效率为96.67%,对照组为80.00%(P<0.05);观察组退热用时、肺部湿啰音消失用时、咳嗽缓解及喘息消失用时均少于对照组(P<0.05);观察组免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、T细胞分化抗原簇4(Cluster of Differentiation 4,CD4^(+))及CD4^(+)/CD8^(+)水平较高,免疫球蛋白M较低,均与对照组有统计学差异(P<0.05);两组白细胞计数(White Blood Cell Count,WBC),通过ELISA对肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)以及超敏C反应蛋白(High-Sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP)水平均降低,观察组低于对照组(P<0.05)。结论:左西替利嗪口服液辅助多西环素片治疗支原体肺炎患儿有积极疗效,能显著提高患儿免疫功能,缓解炎症反应。

关键词： PCV3   Cap蛋白   单克隆抗体   阻断ELISA   应用  

摘要： 为建立猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)阻断ELISA抗体检测方法,应用大肠杆菌表达系统表达PCV3衣壳(capsid,Cap)蛋白,制备了2株Cap蛋白单克隆抗体(1D8和3B5),测定了单克隆抗体的解离常数(dissociation constant,KD);选择亲和力高的1D8用辣根过氧化酶(horseradish peroxidase,HRP)标记,然后基于Cap蛋白和HRP标记的单克隆抗体1D8建立了PCV3阻断ELISA抗体检测方法。结果显示:当血清阻断率(present inhibition,PI)≥29.3%时,判定PCV3抗体阳性;当血清PI<23.4%时,判定PCV3抗体阴性;当23.4%≤PI<29.3%时,判为可疑。建立的方法与猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒等病原抗血清无交叉反应;检测敏感性为1:160,批内和批间重复试验的变异系数分别为0.87%~6.64%和1.03%~9.33%,与Western-blot检测的符合率为95.5%。用建立的阻断ELISA方法检测2021—2024年间从河北省部分猪场采集的205份血清,发现PCV3抗体阳性率为28.8%(59/205),其中仔猪、育肥猪、母猪的抗体阳性率分别为30.0%、32.8%和19.5%。结果表明,本研究建立的PCV3阻断ELISA抗体检测方法可用于PCV3感染的血清学诊断与流行病学调查,具有极大的开发应用潜力。