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关键词： 来曲唑   利拉鲁肽   多囊卵巢综合征   氯米芬耐药   胰岛素抵抗指数  

摘要： 目的:探讨来曲唑联合利拉鲁肽在耐氯米芬多囊卵巢综合征(PCOS)患者中的应用效果,并分析对空腹胰岛素(FINS)、白介素-34(IL-34)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的影响。方法:根据随机数字编号法将100例于2021年1月—2022年6月在我院接受治疗的耐氯米芬PCOS患者分为接受来曲唑治疗的对照组(n=50)和接受来曲唑联合利拉鲁肽治疗的实验组(n=50),对两组患者的胰岛功能相关指标、炎症相关因子、促排卵水平、周期变化、自然受孕率、不良反应进行比较。结果:治疗后,两组患者空腹血糖(FBG)、FINS、HOMA-IR水平均低于治疗前,且实验组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者IL-34水平低于治疗前,且实验组低于对照组(P<0.05),补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)与血清分泌卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平均高于治疗前,且实验组高于对照组(P<0.05);实验组建立月经周期、正常排卵、自然受孕人数、HCG日子宫内膜厚度、HCG日卵泡≥18mm个数均高于对照组(P<0.05);实验组不良反应总发生率略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:来曲唑联合利拉鲁肽可通过下调耐氯米芬PCOS患者的FINS、HOMA-IR水平调节胰岛功能,还可降低IL-34水平,有助于月经周期的建立,可促进排卵增加受孕率,具有一定的安全性。

关键词： 克罗恩病   升麻素   MAPK   辅助性T细胞   免疫平衡   肠屏障  

摘要： 目的探索升麻素(CIM)对小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用以及可能的机制。方法30只体质量20~23 g(6~8周龄)的C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组、2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)组和CIM组,10只/组。TNBS组使用TNBS灌肠建立CD样结肠炎模型,CIM组经TNBS灌肠后每日灌胃CIM(12.5 mg/kg)。通过记录小鼠体质量变化和疾病活动指数(DAI)评分,测量结肠长度,进行HE染色炎症评分以及检测肠黏膜中炎症因子水平评估CIM对小鼠结肠炎的作用;采用免疫荧光及免疫印记检测小鼠肠屏障损伤;流式细胞术检测各组小鼠肠系膜淋巴结中辅助性T细胞亚群的比例;通过网络药理学预测CIM潜在作用靶点,KEGG富集分析筛选关键通路,分子对接验证CIM与MAPK通路核心蛋白的结合能力;Western blotting验证MAPK信号通路的改变。结果CIM干预改善了TNBS诱导的小鼠体质量降低和结肠缩短,同时DAI评分和结肠组织炎症评分低于TNBS组(P<0.05)。ELISA和PCR检测结果显示,同TNBS组相比,CIM降低小鼠肠黏膜组织中促炎因子(IFN-γ和IL-17)的水平并促进抗炎因子(IL-4和IL-10)表达(P<0.05)。免疫荧光结果显示,CIM可改善TNBS诱导的小鼠上皮细胞Claudin-1的缺失和移位,以及杯状细胞的减少(P<0.05);免疫印记数据提示CIM组小鼠结肠黏膜中Claudin-1和ZO-1表达高于TNBS组(P<0.05)。流式细胞术检测结果表明CIM干预后肠系膜淋巴结中Th1和Th17细胞比例下降,而Th2及Treg细胞比例升高(P<0.05)。KEGG富集分析发现CIM对肠炎的作用可能与MAPK信号通路相关,分子对接显示,CIM与MAPK通路核心靶点之间有很好的结合,免疫印记结果显示p-JNK、p-ERK和p-p38在CIM组的小鼠肠黏膜中表达低于TNBS组(P<0.05)。结论CIM可改善肠屏障损伤从而缓解TNBS诱导的小鼠克罗恩病样结肠炎,这与其抑制MAPK信号通路的激活调节小鼠肠道Th1/Th2和Th17/Treg平衡有关。

关键词： 非洲猪瘟病毒(ASFV)   H108R蛋白   多克隆抗体   免疫原性  

摘要： 本研究旨在制备ASFV H108R蛋白,通过免疫小鼠评价该蛋白的免疫原性,为该蛋白作为疫苗候选抗原的研究提供理论依据。利用生物信息学工具分析H108R蛋白的结构及基本理化性质,选择编码蛋白33~108 AA的基因序列串联融合到原核表达载体,转化后经IPTG诱导表达,用镍亲和层析纯化目标蛋白质。免疫小鼠利用流式细胞术检测脾脏活化的CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞,分离小鼠血清测定特异性抗体滴度,利用Western blot和IFA鉴定多克隆抗体的特异性。并用试剂盒检测血清中细胞因子含量,将血清与ASFV-GFP病毒孵育评估抗体是否能抑制病毒的复制。生物信息学分析表明H108R蛋白为亲水性蛋白质,有跨膜区,无信号肽,蛋白二三级结构中存在较多α-螺旋。SDS-PAGE、Western blot显示IPTG诱导后,成功表达纯化H108R蛋白。蛋白免疫小鼠后能够诱导小鼠脾脏T细胞的活化,刺激机体产生更高水平的细胞因子。免疫制备的多克隆抗体效价为1∶128000,能与ASFV-GFP病毒特异性结合,与病毒孵育后能明显抑制病毒的复制。本研究成功表达制备了ASFV H108R蛋白,免疫能够诱导脾脏T淋巴细胞活化,引起细胞因子水平升高,制备的多克隆抗体能够明显抑制病毒的复制,具有较好的免疫原性,为深入研究H108R蛋白的生物学功能及疫苗研究奠定基础。

关键词： 关节炎,类风湿   动脉粥样硬化   疾病活动度   补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3  

摘要： 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)水平变化及其临床意义。方法收集2023年1月至2024年2月就诊于上海健康医学院附属崇明医院(新华医院崇明分院)60例RA患者根据颈动脉超声检查颈动脉内膜中层厚度(cIMT)结果分为有斑块组38例和无斑块组22例,健康体检者60名作为对照,分别检测ESR、血脂、CRP、RF、抗CCP抗体以及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和CTRP3水平,分析RA患者CTRP3水平与疾病活动度、动脉粥样硬化的关系。通过χ2分析、t检验、Pearson相关性以及Logistic回归等多种分析方法进行统计学分析。结果RA患者血清CTRP3水平低于健康对照组[(116±44)ng/ml与(184±63)ng/ml,t=-6.54,P=0.004],RA有斑块组的CTRP3水平低于无斑块组[(98±28)ng/ml与(123±38)ng/ml,t=-5.57,P=0.008],差异有统计学意义。RA患者血清CTRP3水平和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(r=-0.68,P=0.011)、HOMA-IR(r=-0.74,P=0.001)、RF(r=-0.46,P=0.042)、抗CCP抗体(r=-0.54,P=0.037)、疾病活动度评分表28(DAS28)(r=-0.66,P=0.024)和cIMT(r=-0.76,P=0.001)呈负相关,和DMARDs使用时长(r=0.51,P=0.040)、肱动脉血流介导舒张功能(FMD)(r=0.70,P=0.004)呈正相关。CTRP3水平[OR值(95%CI)=0.683(0.355,0.807),P=0.023]为影响cIMT的独立相关因素。结论就CTRP3水平而言,RA患者明显低于健康对照组,同时CTRP3水平和自身抗体水平、胰岛素抵抗以及疾病活动度表现出负相关关系,并对RA患者早发动脉粥样硬化起保护作用。

关键词： 染色体畸变   室间能力评价   实验室   检测   方法  

摘要： 目的探讨外周血淋巴细胞染色体畸变生物剂量估算能力评价方法,客观评价实验室检测能力,促进提升检测水平。方法以2023年全国参评实验室上报数据为依据,分析现有评价方法存在的问题,研究改进能客观评价实验室检测能力的方法。结果按照射剂量1.6、2.7、3.7 Gy分组,用Z分数值评价的合格率只有A类3.7 Gy组合格率低于偏差评价的合格率,其他组均高于偏差评价的合格率。A类2.7 Gy组、3.7 Gy组2种方法评价的合格率差异均无统计学意义(均P>0.05),其他组合格率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组上报估算剂量均值均低于照射剂量,为负偏差,除B类1.6 Gy组相对照射剂量偏差较小(-1.88%)外,其他组偏差在-11.48%~-20.54%,且变异水平在12.63%~20.81%。使用自建曲线的实验室估算均值略高于国标推荐曲线的实验室,但差异无统计学意义(P>0.05)。用各组的估算均值作为靶值,用概率t确定允许误差范围可以便捷的评估参评实验室检测能力。结论现有评价方法没有将该项检测的特点与参评实验室实际情况统一考虑,在确定靶值及允许误差范围方面需结合具体情况逐步完善。

关键词： 侧流层析装置   肿瘤坏死因子-α(TNF-α)   骨骼肌损伤   即时检测   高灵敏度   便携性   运动损伤监测  

摘要： 骨骼肌损伤是运动中最常见的损伤类型,即时诊断对于预防并发症及促进恢复至关重要。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为炎症反应的关键介质,在肌肉损伤过程中显著升高,成为评估损伤程度的重要生物标志物。一种基于“三明治夹心法”的铕荧光微球侧流层析装置,实现了对人体血清中TNF-α的快速、高灵敏度检测。通过优化反应条件,装置能在15分钟内完成检测,最低检测限达到0.0247 pg/mL,检测范围覆盖0~5000 pg/mL。该侧流层析装置以其便携、操作简便及灵敏度高,适用于运动后肌肉损伤的即时检测与长期健康监测,有助于及早发现运动损伤,进而提升治疗效果并延长运动员的运动生涯。

关键词： 人表皮生长因子受体2阴性   胃癌   程序性死亡受体1抑制剂   化学治疗   癌胚抗原  

摘要： 目的探讨人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阴性晚期胃癌患者接受程序性死亡受体1(programmed death-1,PD-1)抑制剂免疫治疗过程中癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)变化及与预后的关系。方法选取2020年5月至2023年5月于我院住院治疗的HER2阴性的转移性胃癌或局部晚期胃癌患者80例为研究对象,入组患者均采用PD-1抑制剂联合化疗治疗。使用曲线估计对多次测量的CEA值构建线性模型Y=ax+b,a为斜率,b为常数。根据最大正确诊断指数对应的斜率(a=0.85),CEA变化趋势分为缓慢上升型(a≤0.85)58例,纳入缓慢组,快速上升型(a>0.85)22例,纳入快速组。比较PD-1抑制剂联合化疗治疗后,缓慢组和快速组的近期疗效、远期疗效以及不良反应。使用Kaplan-Meier法和Log-rank检验评价CEA变化趋势对总生存期(overall survival,OS)和无进展生存期(progression free survival,PFS)的影响。结果PD-1抑制剂联合化疗治疗过程中,不同测量时间的CEA水平呈双峰分布,整体呈上升趋势。与快速组相比,缓慢组的疾病稳定(stable disease,SD)病例占比较高,疾病进展(progression disease,PD)病例占比较低,差异有统计学意义(P<0.05)。在不良事件方面,与快速组相比,缓慢组≥3级不良事件发生率及总不良事件发生率均较低,缓慢组反应性毛细血管增生症(reactive capillary proliferation disease,RCCEP)发生率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。在1~2级不良反应中,与快速组相比,缓慢组RCCEP发生率较低、ALT升高发生率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。缓慢组与快速组中位PFS(median PFS,mPFS)分别为3.87个月和2.42个月,差异有统计学意义(P=0.024)。性别分层交互检验分析显示,性别不会影响CEA变化情况与患者mPFS的关系。Cox多因素回归分析结果显示,转移灶数目、CEA变化情况、腹膜转移、肝转移、评分、分化程度是HER2阴性晚期胃癌患者预后不良的独立因素(P<0.05)。结论PD-1抑制剂联合化疗治疗过程中,不同测量时间的CEA水平呈双峰分布,整体呈上升趋势。PD-1抑制剂联合化疗对CEA变化缓慢患者的疗效较好、安全性较高,CEA变化越缓慢患者预后生存期越长。

关键词： 免疫功能低下   耶氏肺孢子菌肺炎   G试验   淋巴细胞亚群  

摘要： 目的分析免疫功能低下合并耶氏肺孢子菌肺炎(PJP)临床资料,探讨G试验和淋巴细胞亚群对免疫功能低下合并耶氏肺孢子菌肺炎的诊断价值。方法选择2019年1月-2021年12月山东第一医科大学第一附属医院呼吸重症病房收治的78例免疫功能低下患者为研究对象,其中39例PJP肺炎患者为PJP组,39例未检出PJP的患者为非PJP组,比较两组患者临床资料,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各实验室指标对免疫功能低下患者感染PJP的诊断价值。结果PJP组患者病死率高于非PJP组患者(P<0.05)。PJP组和非PJP组患者白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(Neu)、血小板分布宽度(PDW)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、GM试验、G试验[(1843.59±1621.41)pg/ml vs.(87.15±111.01)pg/ml]和CD8淋巴细胞比例[(36.22±19.34)%vs.(25.99±13.10)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。G试验和CD8淋巴细胞比例诊断免疫功能低下患者感染PJP肺炎的曲线下面积(AUC)分别是0.981和0.714,截断值分别是368.40 pg/ml和31.30%。结论免疫功能低下合并重症肺炎患者病死率高,需要临床医生引起重视。G试验和CD8淋巴细胞比例对免疫功能低下患者合并PJP具有一定的诊断价值。

关键词： 甲状腺癌   长链非编码RNA(LncRNA)-MIAT   微小RNA(miR)-150-5p   免疫逃逸   增殖   凋亡  

摘要： 目的探讨长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(LncRNA MIAT)通过微小RNA(miR)-150-5p对甲状腺癌细胞辅助性T(TH)1/2淋巴细胞因子及免疫逃逸的影响。方法人甲状腺癌BCPaP细胞分为BCPaP组(无转染的BCPaP细胞株)、miR-150-5p minmics组(BCPaP细胞株转染miR-150-5p minmics)、miR-150-5p-NC组(BCPaP细胞株转染miR-150-5p-NC)、LV-shMIAT组(BCPaP细胞株转染LV-shMIAT)、LV-MIAT组(BCPaP细胞株转染LV-MIAT)、LV-NC组(BCPaP细胞株转染LV-NC)、LV-shMIAT+miR-150-5p minmics组(BCPaP细胞株转染LV-shMIAT+miR-150-5p minmics)及LV-MIAT+miR-150-5p minmics组(BCPaP细胞株转染LV-MIAT+miR-150-5p minmics)。噻唑蓝(MTT)方法检测24、48及72 h时细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中Th1/2细胞因子白细胞介素(IL)-4及干扰素(INF)-γ;免疫印迹检测凋亡相关因子配体(Fasl)、细胞程序性死亡配体(PD-L)1、PD-L2蛋白;Pearson分析相关性;荧光素酶验证MIAT与miR-150-5p的靶向关系。结果BCPaP组及LV-NC组各个指标比较无统计学差异(P>0.05);与LV-NC组相比,LV-shMIAT组LncRNA-MIAT表达、增殖、IL-4水平及FASL、PD-L1、PD-L2蛋白明显降低,凋亡率、IFN-γ水平明显升高(P<0.05);与LV-shMIAT组相比,LV-MIAT组LncRNA-MIAT表达、增殖、IL-4水平及FASL、PD-L1、PD-L2蛋白明显升高,凋亡率、IFN-γ水平明显降低(P<0.05);BCPaP组及miR-150-5p-NC组各个指标比较无统计学差异(P>0.05);与miR-150-5p-NC组相比,miR-150-5p minmics组增殖、IL-4水平及FASL、PD-L1、PD-L2蛋白明显降低,miR-150-5p表达、凋亡率、IFN-γ水平明显升高(P<0.05);与LVshMIAT+miR-150-5p minmics组比较,LV-MIAT+miR-150-5p minmics组各个指标差异有统计学意义(P<0.05);与BCPaP组相比,LV-shMIAT+miR-150-5p minmics组细胞增殖、IL-4水平及FASL、PD-L1、PD-L2蛋白明显降低,凋亡率、IFN-γ水平明显升高(P<0.05);MIAT与miR-150-5p呈负相关(r=-0.805,P<0.001);与miR-150-5p-NC组相比,miR-150-5p mimics组MIAT-wt荧光活性明显降低(P<0.001)。结论下调LncRNA-MIAT可抑制甲状腺癌细胞增殖,促进凋亡的同时促使Th1/2细胞因子平衡,并可抑制FASL、PD-L1、PD-L2表达改善免疫逃逸,机制与miR-150-5p激活相关。

关键词： 人体免疫系统   人体血液   淋巴细胞   血液成分   白细胞   血小板   红细胞   免疫  

摘要： 人体血液中含有我们熟知的红细胞、白细胞以及血小板,但您听说过“淋巴细胞”吗?相较于我们熟知的其他血液成分,它的名字稍显陌生。其实,淋巴细胞属于白细胞的一类,在人体血液中体积最小,但它的功能可不小,人体免疫系统想要正常运转,离不开淋巴细胞的运作。作为人体的重要细胞,淋巴细胞一直扮演着重要的免疫卫士的角色。