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关键词： 急性淋巴细胞白血病   核型分析   FISH   RT-PCR   超二倍体  

摘要： 目的:探讨染色体核型分析、荧光原位杂交、逆转录聚合酶链反应三种检测的组合在儿童急性淋巴细胞白血病中诊断的价值。方法:回顾性收集2021年12月至2023年12月期间于本院就诊的124例ALL患儿的临床资料。收集分析患儿的染色体核型分析、荧光原位杂交(FISH)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果。结果:124例患儿中,核型分析、FISH、RT-PCR三种检测的阳性率分别为33.10%、83.10%、46.00%,三者之间有差异。患儿染色体异常呈“幂律分布”,阳性率较高的三种相关异常为超二倍体、TEL、P16。结论:三种检测相互补充及验证,是一种对ALL染色体异常比较有效的组合检测模式。核型分析与FISH在超二倍体的检测中差异较大,需进一步研究。

关键词： Modified UNIFAC-IL   Ionic liquids   Infinite dilution activity coefficient   External VLE evaluation  

摘要： Although the modified UNIFAC (mod. UNIFAC) model is well-established for predicting thermodynamic properties of classical organic systems, a comprehensive extension of the mod. UNIFAC model for ionic liquid (IL)-solute systems is still scarce. In this work, a large extension of the mod. UNIFAC model for IL-solute systems is proposed by combining an experimental database and a recommender system (RS)-predicted database of infinite dilution activity coefficient (gamma(infinity)). The extensive experimental gamma(infinity) database is first utilized to obtain all the involved interaction parameters between IL and conventional solute main groups. To fill up the absent interaction parameters that cannot be obtained based on experimental gamma(infinity), the RS-predicted database is elaborately retrieved for related gamma(infinity) data, enabling a further model extension by including RS-derived interaction parameters. The predictive performance of the extended mod. UNIFAC-IL is not only analyzed from the regression results but also externally evaluated on a large experimental vapor-liquid equilibrium (VLE) database of binary and ternary IL-involved systems.

关键词： 产毒多杀性巴氏杆菌   toxA   多杀性巴氏杆菌毒素   重组蛋白   亚单位疫苗  

摘要： 为筛选产毒多杀性巴氏杆菌(T+Pm)亚单位疫苗的优势保护性抗原,本研究根据多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)的结构和功能区将其分为N端3个片段(rPMT-N1和rPMT-N2a、rPMT-N2b)和C端5个片段(rPMT-C3、rPMTC4、rPMT-C5、rPMT-C6及rPMT-C7),利用原核表达系统表达这8个片段,采用His6标签蛋白纯化试剂盒纯化各重组蛋白,经SDS-PAGE检测各重组蛋白的表达及纯化效果后,通过Image J软件计算各重组蛋白的表达量,进一步采用western blot检测各重组蛋白的反应原性。SDS-PAGE结果显示,分别获得了34 ku、62 ku、67 ku、70 ku、64 ku、102 ku、36 ku、60 ku的重组蛋白,其中rPMT-N2a、rPMT-N2b、rPMT-C5和rPMT-C7以可溶性和包涵体两种形式表达,另外4个重组蛋白均以包涵体形式表达,纯化后在上述各位置处分别出现较单一的目的条带,且各蛋白的表达量占菌体总蛋白的8.44%~35.77%。Western blot结果显示,8个重组蛋白均可与猪源T+Pm TPM-6株的猪阳性血清发生特异性反应,均具有一定的反应原性,其中rPMT-N1、rPMT-N2a、rPMT-N2b、rPMT-C5的反应原性较强。基于此,采用ISA201佐剂制备这4种重组蛋白的亚单位疫苗,间隔20 d对小鼠经皮下注射免疫(50μg/只)两次,观察并记录各组小鼠的临床症状及死亡数,评估该疫苗对小鼠的安全性。首免后35 d(二免后14 d)对各组小鼠分别以10 LD_(100)和30 LD_(100)的天然粗提PMT(cPMT)对小鼠攻毒,评估4种亚单位疫苗(rPMT-N1、rPMT-N2a、rPMT-N2b及rPMT-C5)对小鼠的免疫保护效力。安全性试验结果显示,免疫后21 d rPMT-N2a组小鼠的死亡率为2/24,rPMT-N2b组小鼠的死亡率为6/24,其余各组小鼠均无异常。ELISA结果显示,二免后各疫苗组小鼠的几何平均抗体效价分别升至1:1552、1:18820、1:1351和1:6208,表明各重组蛋白均能诱导免疫小鼠产生良好的体液免疫反应。攻毒结果显示,对照组小鼠在两种剂量的cPMT攻毒后均出现相应症状并均在24h内全部死亡,部分亚单位疫苗免疫组小鼠也出现不同程度的发病及死亡,但发病及死亡时间较对照组延长。以10LD_(100)的cPMT攻毒后,上述各疫苗对小鼠的免疫保护率分别为87.5%、100%、37.5%和100%;以30 LD_(100)的cPMT攻毒后,各疫苗对小鼠的免疫保护率分别为50%、85.7%、0和75%。本研究表明,rPMT-N2a、rPMT-C5具有作为T+Pm亚单位疫苗优势保护性抗原的潜力,该结果为后期T+Pm亚单位疫苗的研发奠定基础。

关键词： 超声影像   糖类抗原125   糖类抗原199   成熟性卵巢畸胎瘤  

摘要： 目的探讨超声影像联合糖类抗原(CA)125、CA199对成熟性卵巢畸胎瘤的早期临床诊断价值,为临床诊疗提供参考。方法选取2020年1月至2024年5月苏州永鼎医院收治的60例卵巢畸胎瘤患者的临床资料,进行回顾性分析。根据病理结果分为未成熟组(19例,病理检查显示内部组织结构少或无形成良好的组织结构)和成熟组(41例,病理检查显示存在异物巨细胞反应,内部可见毛发、油脂及钙化局灶)。比较两组患者超声影像参数及CA125、CA199水平,基于超声影像参数及CA125、CA199构建成熟型卵巢畸胎瘤的联合诊断模型,分析联合诊断模型对成熟型卵巢畸胎瘤的诊断效能。结果成熟组患者边界清晰、有包膜、回声规则占比及PI、RI均高于未成熟组,血流量大于未成熟组,CA125、CA199水平均低于未成熟组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:边界清晰、有包膜、回声规则、PI高、血流量大、RI高、CA125水平低、CA199水平低均与成熟型卵巢畸胎瘤相关(均P<0.05)。构建联合诊断模型回归方程为:Y=5.419+3.434×超声影像参数-0.054×CA125-0.078×CA199。该诊断模型的曲线下面积(AUC)为0.972,敏感度为95.12%,特异度为94.74%。结论边界清晰、有包膜、回声规则、PI高、血流量大、RI高、CA125水平低、CA199水平低均与成熟性卵巢畸胎瘤相关,基于超声影像参数及CA125、CA199构建的成熟性卵巢畸胎瘤联合诊断模型预测价值较高,值得临床应用。

关键词： HLA基因   模棱两可   二代测序   纳米孔测序技术   三代测序  

摘要： 目的 利用纳米孔测序技术解决新一代测序技术(next generation sequencing, NGS)HLA基因分型中模棱两可组合问题。方法 收集本实验室NGS检测分型存在模棱两可组合的标本38例,采用相同的商品化NGS HLA分型试剂盒引物对HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DRB3/4/5、-DQA1、-DQB1、-DPA1和-DPB1位点进行特异性扩增后,实施三代测序建库并在纳米孔测序仪上测序,数据转换成Fastq文件并通过软件指定11个HLA位点基因分型结果。直接计数法统计模棱两可组合结果。结果 以第2域数字作为高分辨结果,三代测序技术(third generation sequencing, TGS)检测的38个标本11个HLA位点结果与NGS结果符合率为100%。TGS法检测HLA-A、-B、-C、-DRB3、-DRB4、-DQA1、-DPA1位点均为唯一性结果,对HLA-A、-B、-C和-DQA1位点模棱两可组合(均因NGS读长短致使定相困难而形成)的区分率为100%;HLA-DRB1、-DRB5、-DQB1和-DPB1位点的模棱两可组合中,TGS法对1号外显子未扩增导致的模棱两可组合的区分率为0%,对因NGS读长短导致的模棱两可组合的区分率为100%。结论 本项目利用纳米孔技术对11个HLA位点模棱两可组合进行区分研究,有效解决了NGS方法短读长引起的模棱两可组合问题,提高了HLA基因分型准确性。

关键词： 血管通路   维持性血液透析   C反应蛋白   中性粒细胞与淋巴细胞比值   血红蛋白   感染  

摘要： 目的 探讨隧道式导管与动静脉内瘘(autostatic arteriovenous fistula,AVF)血管通路的维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)水平变化差异及预测感染的价值。方法 选取2020年1月1日至2022年6月30日攀枝花学院附属医院MHD患者108例,根据不同血管通路分组,其中47例隧道式导管血管通路患者作为导管组,61例AVF血管通路患者作为AVF组。比较两组患者基线时、随访6个月时肾功能指标(血肌酐、尿素氮)、透析充分性(单室尿素清除指数、尿素下降率、平衡后尿素清除指数)、CRP、NLR、Hb水平及感染发生率,分析CRP、NLR、Hb水平对感染的预测价值。结果 两组患者基线时、随访6个月时血肌酐、尿素氮、单室尿素清除指数、尿素下降率、平衡后尿素清除指数比较,差异无统计学意义(P>0.05);AVF组患者随访6个月时CRP[(12.92±3.17)mg/L比(16.35±5.11)mg/L]、NLR[(3.36±0.74)比(4.57±1.23)]水平低于导管组,Hb水平[(110.52±12.16)g/L比(100.31±14.47)g/L]高于导管组(P<0.05);AVF组患者感染发生率13.11%低于导管组31.91%(P<0.05);感染组随访6个月时CRP[(18.85±5.09)mg/L比(13.21±3.36)mg/L]、NLR[(5.60±1.21)比(3.43±1.08)]水平高于基线时,Hb水平[(94.70±11.96)g/L比(109.16±14.14)g/L]低于基线时(P<0.05);受试者工作特征曲线结果分析,随访6个月时CRP、NLR、Hb联合预测MHD并发感染的曲线下面积为0.928(95%CI:0.862~0.969),敏感度为78.26%,特异度为91.76%,大于各指标单独预测(P<0.05);以随访6个月时CRP、NLR、Hb的截断值分为低水平、高水平,随访6个月时CRP、NLR高水平患者并发感染风险是低水平患者的7.180倍(95%CI:2.623~19.656)、4.750倍(95%CI:1.730~13.043);Hb低水平患者并发感染风险是高水平患者的5.567倍(95%CI:2.272~14.085)(P<0.05)。结论 与隧道式导管血管通路患者相比,AVF血管通路患者CRP、NLR、Hb异常表达,且感染发生率较低;CRP、NLR、Hb联合预测MHD并发感染具有良好的参考价值,可为临床评估MHD患者感染提供参考。

关键词： 小细胞肺癌   化疗   癌胚抗原   鳞状上皮细胞癌抗原   比值   相关性  

摘要： 目的 研究癌胚抗原(CEA)与鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)的比值在小细胞肺癌患者化疗前后的变化及临床意义。方法 前瞻性选取60例小细胞肺癌患者作为研究对象。所有患者均接受6个周期的化疗。测定并计算所有患者化疗前、化疗3个周期、化疗结束时的CEA/SCC。评估化疗疗效,重点分析CEA/SCC比值在小细胞肺癌患者化疗前后的变化及临床意义。结果 相较于化疗前,化疗3个周期、化疗结束时小细胞肺癌患者的CEA/SCC比值降低,相较于化疗3个周期,化疗结束时的CEA/SCC比值降低,组内整体比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤分期、肿瘤体积的患者CEA/SCC比值差异有统计学意义(P<0.05)。60例患者经化疗,有效41例,占68.33%。化疗有效组与化疗无效组在化疗后,CEA/SCC比值均降低,且化疗有效组化疗前的CEA/SCC比值显著低于无效组(P>0.05)。限制性立方样条分析,结果显示,CEA/SCC比值与小细胞肺癌患者化疗无效发生的关联强度呈线性剂量反应关系(P<0.05),当CEA/SCC比值阈值取0.74时,小细胞肺癌患者化疗无效发生风险随CEA/SCC比值升高而增加。结论 小细胞肺癌化疗患者化疗前CEA/SCC比值水平较高,随着化疗的开展,CEA/SCC比值有一定降低,但化疗前CEA/SCC比值的异常升高可能会影响化疗整体效果,增加无效风险。

关键词： 骨质疏松   骨密度   炎症细胞因子   孟德尔随机化   因果关系  

摘要： 背景:最近许多研究表明,炎症细胞因子与骨质疏松症和骨密度之间存在密切关系,然而炎症细胞因子与骨密度之间的因果关系尚未完全揭示。目的:采用两样本孟德尔随机化方法探究炎症细胞因子与骨密度之间潜在的因果关系。方法:从全基因组关联研究(GWAS)公开数据库中筛选出与41种循环炎症细胞因子相关的单核苷酸多态性作为工具变量。骨密度的GWAS汇总数据来自骨质疏松症遗传因素联盟(GEFOS),共涉及32735名欧洲血统的个体。逆方差加权法作为主要的分析方法来评估因果效应,加权中位数法、MR Egger回归法、简单中位数法和加权中值方法用于补充说明。利用MR-Egger Intercept和MR-PRESSO分析方法进行多效性检验,采用Cochran’s Q检验结果是否存在异质性,同时使用留一法评估结果的稳定性。另外,为了更准确地评估因果关系,采用Bonferroni校正来确定与骨密度有强因果关系的炎症细胞因子。结果与结论:①逆方差加权法分析结果显示,白细胞介素8与腰椎骨密度之间呈正向因果关系(β=0.075,95%CI:0.033-0.117,P=0.0005),白细胞介素17与腰椎骨密度之间呈负向因果关系(β=-0.083,95%CI:-0.152至-0.014,P=0.018),肿瘤坏死因子b与股骨颈骨密度之间可能存在负向因果效应(β=-0.053,95%CI:-0.088至-0.018,P=0.003),碱性成纤维细胞生长因子与股骨颈骨密度之间可能存在正向因果关系(β=0.085,95%CI:0.016-0.154,P=0.015),巨噬细胞炎症蛋白1a与全身骨密度之间可能存在负向因果效应(β=-0.056,95%CI:-0.105至-0.007,P=0.025),白细胞介素5、基质衍生因子1a、肝细胞生长因子、白细胞介素4与足跟骨密度之间存在负向因果效应(β=-0.019,95%CI:-0.031至-0.006,P=0.004;β=-0.022,95%CI:-0.038至-0.005,P=0.010;β=-0.021,95%CI:-0.041至-0.002,P=0.030;β=-0.016,95%CI:-0.032至-0.001,P=0.034),神经生长因子、粒细胞集落刺激因子与足跟骨密度之间存在正向因果关系(β=0.019,95%CI:0.002-0.036,P=0.033;β=0.011,95%CI:0.000-0.022,P=0.050);经Bonferroni校正后发现,白细胞介素8与腰椎骨密度之间有强正向因果效应(P=0.0005)。MR Egger法、加权中位数法、简单中位数法和加权中值法分析结果方向一致。②敏感性分析结果显示,循环炎症细胞因子对骨密度的因果效应没有异质性、多效性或异常值。

关键词： 人类免疫缺陷病毒   获得性免疫缺陷综合征   血浆病毒载量   CD4^(+)   CD8^(+)   相关性  

摘要： 目的:探究人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者血浆病毒载量和外周血CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞的变化。方法:根据疾病的不同将抚州市第一人民医院2022年3月-2024年3月接收的100例HIV感染者/AIDS患者分为观察1组(HIV,n=60例)、观察2组(AIDS,n=40),并选择同时期体检的健康人群50例作为此次研究对照组。采集所有研究对象的外周静脉血液,采用流式细胞仪分别检测三组CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞水平,并采用荧光定量PCR方法测定观察1组、观察2组患者血浆病毒载量。采用Pearson分析HIV感染者/AIDS患者血浆病毒载量与外周血CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞的相关性。结果:观察1组、观察2组外周血CD4^(+)水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),观察2组外周血CD4^(+)水平低于观察1组,差异有统计学意义(P<0.05);观察1组、观察2组外周血CD8^(+)水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),观察1组外周血CD8^(+)水平高于观察2组,差异有统计学意义(P<0.05);观察2组患者血浆病毒载量水平明显高于观察1组,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析发现,外周血CD4^(+)水平与血浆病毒载量水平呈现明显的负相关(r=-0.685,P<0.05),而外周血CD8^(+)水平与血浆病毒载量水平无明显的相关性(r=-0.712,P>0.05)。结论:相较于健康人群,HIV感染者/AIDS患者外周血CD4^(+)T淋巴细胞偏低,而CD8^(+)T淋巴细胞偏高,且HIV感染者与AIDS患者外周血CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞水平差异明显,而随着血浆病毒载量水平的增加,HIV感染者/AIDS患者外周血CD4^(+)T淋巴细胞水平下降。