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关键词： 肿瘤浸润淋巴细胞   病理医师   病理评估   视觉评估   疗效预测   诊疗流程   深度学习   TIL  

摘要： 肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocytes,TILs)作为一种组织学生物标志物,已被证实在乳腺癌患者预后风险评估和药物疗效预测方面具有临床应用价值。因此,TILs精准病理评估逐渐成为乳腺癌临床诊疗流程中的重要环节。现行乳腺癌TILs评估主要由病理医师通过光镜下观察苏木精和伊红染色切片进行主观半定量分析完成。近年来,数字病理和深度学习模型在病理领域的开发和应用,让高效、精准、多维度的TILs分析成为可能,具有广阔的转化应用前景。本文就乳腺癌TILs病理评估方法、人工视觉评估的局限性及深度学习技术在TILs评估的研究进展进行综述。

关键词： 蒲公英多糖   聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)   Raw264.7细胞   免疫效果  

摘要： 为了揭示包载聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的蒲公英多糖纳米粒(PLGA-DP-NP)对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(Raw264.7细胞)免疫效果的影响,本试验以Raw264.7细胞为研究对象,采用细胞增殖/毒性检测(CCK-8)法测定PLGA-DP-NP对Raw264.7细胞的毒性和细胞增殖的影响,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定PLGA-DP-NP对Raw264.7细胞分泌的细胞因子白介素-2(IL-2)和白介素-6(IL-6)的影响,采用流式细胞术检测低、中、高浓度(18.8、75、150μg/mL)PLGA-DP-NP对Raw264.7细胞成熟标志分子CD80和CD86表达,以及对Raw264.7细胞吞噬卵清蛋白(OVA)的影响。结果显示,PLGA-DP-NP浓度低于500μg/mL时,Raw264.7细胞的存活率较高;与阴性对照组相比,18.8、37.5、75、150和300μg/mL的PLGA-DP-NP均可显著促进细胞增殖(P <0.05),均能显著增加Raw264.7细胞的IL-2和IL-6分泌量(P <0.05);低、中、高浓度的PLGA-DP-NP均能增强Raw264.7细胞CD80(P> 0.05或P <0.01或P <0.05)和CD86(P <0.01)的表达,提高Raw264.7细胞吞噬OVA百分比(P <0.01),浓度为75μg/mL时增幅最大。结果表明,安全浓度范围内的PLGA-DP-NP可以显著促进Raw264.7细胞增殖,提高细胞因子IL-2和IL-6分泌,促进细胞成熟,提升细胞的吞噬作用,浓度为75μg/mL时效果最佳。

关键词： 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)   核蛋白   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 研究旨在以严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)的核蛋白(NP)为对象,表达SFTSV-NP重组蛋白并免疫小鼠,制备多克隆抗体,为SFTSV诊断试剂的研发奠定基础。试验扩增SFTSV-NP蛋白并连入pET-28a原核表达质粒,通过优化条件进行体外蛋白质的表达与纯化;同时免疫小鼠进行特异性抗体的制备,并对免疫所得抗体的效价进行ELISA检测,利用Western blot和IFA对抗体特异性进行分析。结果显示,试验成功扩增了长度为738 bp的SFTSV-NP蛋白,经菌落PCR和测序验证成功将NP片段连入pET-28a原核表达质粒;通过对表达条件的优化,得出培养温度为28℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L时蛋白表达量最大(27 kDa),并进行大量的表达纯化;免疫小鼠所得的特异性抗体效价经ELISA检测符合后续试验要求,且经Western blot和IFA验证后特异性良好。研究表明,试验成功纯化了SFTSV-NP蛋白并制备了多克隆抗体,为后续SFTSV的监测以及功能的深入研究奠定了基础。

关键词： WNT1诱导信号通路蛋白1   脂滴包被蛋白1   脂滴包被蛋白5   脂联素   急性冠脉综合征   Gensini评分  

摘要： 目的探讨血清脂肪细胞因子WNT1诱导信号通路蛋白1(WNT1 inducible signaling pathway protein 1,WISP1)、脂滴包被蛋白1(perilipin 1,PLIN1)、脂滴包被蛋白5(perilipin 5,PLIN5)及脂联素(adiponectin,ADP)水平与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)严重程度的关系。方法回顾性选取2019年5月—2021年7月胜利油田中心医院收治的84例ACS患者的临床资料,根据Gensini评分四分位数将ACS患者分为4组,即Q1组(22例,Gensini评分≤25.50分)、Q2组(20例,25.50分57.00分)。比较各组间血清WISP1、PLIN1、PLIN5和ADP水平,以Pearson相关性分析血清WISP1、PLIN1、PLIN5和ADP水平与ACS患者Gensini评分的相关性。结果ACS患者Gensini评分与血清WISP1、PLIN1水平呈正相关(r=0.283、0.330,P均<0.05),与血清PLIN5、ADP水平呈负相关(r=-0.300、-0.349,P均<0.05)。结论ACS患者血清WISP1、PLIN1水平均较高,血清PLIN5、ADP水平均较低,且四者与患者冠状动脉病变严重程度关系密切。

关键词： 结核病危重症   淋巴细胞亚群   临床预后   相关性研究  

摘要： 目的分析外周血淋巴细胞亚群与结核病危重症患者临床预后的关系。方法选取2021年12月至2024年9月中国人民解放军第八医学中心结核病重症病区收治的118例结核病危重症患者的临床资料,根据结局的不同分为生存组78例,死亡组40例。分析比较两组外周血淋巴细胞亚群的水平。采用多因素logistic回归分析筛选结核病危重症患者预后的影响因素;绘制受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析外周血淋巴细胞亚群评估患者预后的价值。结果118例结核病危重症患者根据临床转归分为存活组(78例)和死亡组(40例),两组的CD4+T淋巴细胞绝对计数、CD8+T淋巴细胞绝对计数、NK细胞百分比、NK样T淋巴细胞绝对计数、总T淋巴细胞百分比、总T淋巴细胞绝对计数、总B细胞绝对计数比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,CD8+T淋巴细胞绝对计数、总B细胞绝对计数水平是结核病危重症患者生存结局的危险因素(P<0.05);CD4+T淋巴绝对计数、总T淋巴细胞绝对计数水平是结核病危重症患者生存结局的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,CD4+T淋巴细胞绝对计数、CD8+T淋巴细胞绝对计数、总T淋巴细胞绝对计数和总B细胞绝对计数预测结核病危重症患者病死率的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.800、0.786、0.789和0.755(均P<0.001)。结论CD4+T淋巴细胞绝对计数、CD8+T淋巴细胞绝对计数、总T淋巴细胞绝对计数、总B细胞绝对计数是评估患者死亡风险的关键指标,并且对其可能有更好的预测价值。

关键词： 肺炎   比值比   淋巴细胞   中性白细胞   C反应蛋白质   预后  

摘要： 【目的】探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、C反应蛋白(CRP)联合检测对儿童大叶性肺炎预后的预测价值。【方法】回顾性分析2021年1月至2023年8月南阳巿南召县康养中等职业学校附属医院收治的83例大叶性肺炎患儿的临床资料,根据患儿病情严重程度将其分为轻度组(n=27)、中度组(n=39)和重度组(n=17),比较三组患儿NLR、CRP水平,采用Spearman法分析NLR、CRP水平与患儿病情严重程度的相关性。根据患儿预后情况将其分为预后良好组(n=61)和预后不良组(n=22),比较不同预后患儿的临床特征,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析NLR和CRP水平对患儿预后的预测价值。【结果】重度组、中度组患儿NLR、CRP水平均高于轻度组患儿,重度组患儿高于中度组患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,大叶性肺炎患儿NLR、CRP水平与疾病严重程度呈正相关(r_(s)=0.712、0.766,均P<0.001)。预后不良组和预后良好组患儿胸腔积液占比及白细胞计数、NLR、CRP比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示,胸腔积液、NLR、CRP均是影响大叶性肺炎患儿预后不良的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,NLR、CRP水平预测大叶性肺炎患儿预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.785、0.808,二者联合的特异度和AUC分别为93.44%、0.873。【结论】NLR、CRP水平与大叶性肺炎患儿疾病严重程度呈正相关,且NLR、CRP是影响患儿预后的相关因素,联合检测可有效预测患儿预后。

关键词： 神经氨酸酶抑制剂   活性腔   抗体募集   蛋白质降解   单克隆抗体  

摘要： 神经氨酸酶是流感病毒表面重要的糖蛋白,在流感病毒生命周期的出芽释放阶段发挥着不可替代的作用,是药物设计的理想靶点。目前已有神经氨酸酶抑制剂应用于流感的临床治疗,但是由于用药选择的单一性及流感病毒潜在的变异性,神经氨酸酶耐药毒株逐渐成为公众的担忧,因此神经氨酸酶新型抑制剂的研发成为研究热点。本研究精选近10年代表性案例,对神经氨酸酶抑制剂的发展状况进行综述,以期为研发具有更强活性及抗耐药性的神经氨酸酶抑制剂提供参考。

关键词： 幽门螺杆菌阳性   慢性萎缩性胃炎   四联疗法   活性氧   白细胞介素33  

摘要： 目的探讨幽门螺杆菌(hp)阳性慢性萎缩性胃炎(CAG)患者血清活性氧(ROS)、白细胞介素33(IL-33)水平与四联疗法hp根除率的关系。方法选取2022年1月至2024年8月本院收治的hp阳性CAG患者218例,均实施四联疗法治疗14 d,统计hp根除率。将hp未根除者纳入观察组,hp根除者纳入对照组。两组均在治疗前检测血清ROS、IL-33水平。分析血清ROS、IL-33水平与hp阳性CAG患者hp根除率的关系及预测价值。结果218例hp阳性CAG患者四联疗法治疗14 d后hp根除率为80.73%(176/218)。hp未根除者42例纳入观察组,hp根除者176例纳入对照组。两组治疗前血清ROS、IL-33水平比较,观察组高于对照组(P<0.05)。治疗依从性、阿莫西林耐药、克拉霉素耐药、hp类型、ROS、IL-33为hp阳性CAG患者hp根除率的独立影响因素(P<0.05)。无论是否调整混杂因素,ROS、IL-33水平升高均会增加hp阳性CAG患者hp根除失败风险。血清ROS、IL-33水平预测hp阳性CAG患者hp根除率的AUC值分别为0.774,0.790,二者联合预测的AUC值为0.860。血清ROS、IL-33联合预测hp阳性CAG患者hp根除率的AUC值大于单一指标的预测值(P<0.05)。结论血清ROS、IL-33高水平是hp阳性CAG患者四联疗法hp根除失败的独立危险因素,通过检测二者血清水平可判定患者hp根除失败风险,对患者治疗方案的制定及调整有一定指导意义。

关键词： IL-11   Peptide   Phage display   Inhibitor   Antagonist   AlphaLISA   Cytokine  

摘要： Interleukin-11 (IL-11), a member of the IL-6 cytokine family, has potential pro-inflammatory and pro-fibrotic roles in pulmonary, hepatic, cardiovascular, renal and intestinal disease pathogenesis, including oncogenesis. The potential for therapeutic intervention in these disease spaces has therefore made the IL-11 signaling axis an attractive target in drug discovery, and antibody inhibitors of IL-11 signaling are currently under evaluation in Phase I/II clinical trials. While lower molecular weight small molecule and peptide inhibitors may offer the potential for improved tissue penetration, developability and manufacturing cost compared with a protein therapeutic, reports of such chemical matter in the literature are limited. In this work, a series of cyclic peptides derived from phage display biopanning campaigns against both IL-11 and its cognate receptor IL-11R alpha are presented. The most active IL-11 binder (peptide 4, KD 140 nM) exhibited inhibition of IL-11/IL-11R alpha dimerization in a biochemical AlphaLISA assay (Ki 300 nM), and alanine scanning was carried out on this sequence to identify residues important for target binding and inhibitory activity. Further structural optimization yielded lead peptide 15 (Ki 180 nM), which exhibited at least 70-fold greater activity than IL-11 inhibitors previously reported in the literature. The de novo peptide macrocycles presented serve as a robust starting point for development of therapeutic inhibitors of the IL-11/IL-11R alpha interaction.

关键词： 肺疾病,慢性阻塞性   慢性阻塞性肺疾病急性加重期   肺炎   焦亡   热休克蛋白90   细胞因子  

摘要： 目的分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并肺炎患者外周血中焦亡因子的表达与疾病严重程度的关系,以及多重耐药菌感染对病情的影响,并探讨血清热休克蛋白90(HSP90)、白细胞介素6(IL-6)、降钙素原(PCT)联合肺炎严重指数(PSI)评分对AECOPD合并肺炎病情加重的评估价值。方法本研究为病例对照研究。采用目的抽样法,选取2022年1月至2024年1月河北医科大学第二医院收治的358例AECOPD合并肺炎患者为研究对象,按照AECOPD严重程度(是否合并呼吸衰竭)分为轻症组(186例)和重症组(172例)。入组当天清晨采集研究对象的外周静脉血,应用实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测胱天蛋白酶1(caspase-1)、GSDMD、HSP90的mRNA和蛋白表达水平。比较2组血清焦亡相关因子的表达和临床资料。通过多因素logistic回归分析AECOPD合并肺炎患者病情加重的影响因素,绘制HSP90、IL-6、PCT、PSI评分及四项联合的受试者操作特征(ROC)曲线,分析其评价AECOPD合并肺炎患者病情的预测效能。结果重症组的男性比例[91.9%(158/172)比74.7%(139/186),χ^(2)=18.55,P<0.001]、年龄[(68.61±11.37)岁比(63.37±7.98)岁,t=5.08,P<0.001]均高于轻症组。AECOPD合并肺炎患者血清HSP90水平高于正常参考值。重症组患者外周血中焦亡相关因子caspase-1、GSDMD、HSP90 mRNA的表达水平高于轻症组(t值分别为19.65、7.86、15.47,均P<0.001)。重症组患者外周血中焦亡相关因子caspase-1、GSDMD、HSP90蛋白的表达水平高于轻症组(t值分别为20.75、24.06、10.76,均P<0.001)。重症组的吸烟史比例[87.2%(150/172)比75.3%(140/186),χ^(2)=8.28,P<0.001]、低蛋白血症比例[59.3%(102/172)比38.7%(72/186),χ^(2)=15.70,P<0.001]、长期使用糖皮质激素比例[84.9%(146/172)比42.5%(79/186),χ^(2)=68.84,P<0.001]、多重耐药菌感染比例[57.0%(98/172)比18.8%(35/186),χ^(2)=55.73,P<0.001]、IL-6水平[(52.11±9.69)ng/L比(45.35±8.40)ng/L,t=7.06,P<0.001]、PCT水平[(3.15±0.39)μg/L比(2.80±0.58)μg/L,t=6.56,P<0.001]和PSI评分[(100.82±13.27)分比(80.87±9.69)分,t=16.33,P<0.001]均高于轻症组。多因素logistic回归分析结果显示,多重耐药菌感染(OR=3.361,95%CI:2.007~5.630)、HSP90升高(OR=1.018,95%CI:1.011~1.025)、IL-6升高(OR=1.109,95%CI:1.064~1.157)、PCT升高(OR=2.578,95%CI:1.361~4.885)和PSI评分升高(OR=1.193,95%CI:1.051~1.445)是AECOPD合并肺炎患者病情加重的独立危险因素。ROC曲线分析显示,HSP90、IL-6、PCT、PSI评分预测AECOPD合并肺炎病情加重的曲线下面积分别为0.848、0.701、0.750、0.873,敏感度分别为91.28%、63.37%、76.16%、66.28%,特异度分别为83.87%、73.12%、65.59%、94.09%;4项联合的ROC曲线下面积为0.949,敏感度为83.14%,特异度为94.62%。结论AECOPD合并肺炎重症患者焦亡因子caspase-1、GSDMD和HSP90升高,参与病情进展。多重耐药菌感染、HSP90升高、IL-6升高、PCT升高和PSI评分升高是AECOPD合并肺炎患者病情加重的独立危险因素。血清HSP90、IL-6、PCT联合PSI评分较单一因素对预测AECOPD合并肺炎病情进展具有更好的评估效能。