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关键词： 高浓度静注人免疫球蛋白   人凝血因子Ⅻ   前激肽释放酶   酶联免疫吸附法   基质效应   钩状效应  

摘要： 目的:建立酶联免疫吸附(ELISA)方法分别检测高浓度静注人免疫球蛋白制品(10%IVIG)中人凝血因子Ⅻ(factorⅫ,FⅫ)和前激肽释放酶(prekallikrein,PK)的残留量,并对该方法进行验证。方法:FⅫ、PK特异性抗体预包被在微孔板上并封闭。10%IVIG中的FⅫ、PK分别与预包被抗体结合反应,经洗涤,分别加入FⅫ、PK特异性生物素化检测抗体与结合抗体反应,经第2次洗涤后,分别加入辣根过氧化物酶、链霉亲和素-过氧化物酶反应,再加入显色剂反应后,添加终止液终止反应,置于酶标仪450 nm波长处测定吸收度。参照2020年版《中华人民共和国药典》验证检测方法,并采用经验证的方法对10%IVIG工艺中间品、成品中FⅫ、PK残留量进行测定。结果:验证结果如下:稀释线性显示FⅫ检测方法存在基质效应,PK检测方法存在钩状效应,可分别通过稀释5~20倍、80~120倍解决;加标实验测定结果的平均回收率分别为110.3%、99.1%,RSD分别为3.6%、2.7%,该方法准确度良好;重复性测定结果的RSD分别为8.3%、7.7%;中间精密度实验的RSD分别为7.0%、9.2%;方法精密度良好;定量限精密度验证符合要求,定量限分别为1.0、1.25 ng·mL^(-1);该方法在线性范围内线性关系良好(r=0.9999)。耐用性验证了孵育时间、试剂盒开启有效期以及不同批号试剂盒,结果显示方法的耐用性良好。应用该方法检测10%IVIG中FⅫ、PK残留量均维持较低水平,说明辛酸沉淀结合2步阴离子层析工艺能够较好地去除10%IVIG中的FⅫ、PK。结论:建立的方法适用性良好,能够满足实验室对10%IVIG静注人免疫球蛋白中FⅫ、PK残留量的测定。

关键词： 终末期心脏病   心脏移植   预后   中性粒细胞   淋巴细胞  

摘要： 目的评价术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)对原位心脏移植(HTx)近期预后的影响。方法回顾性分析2018年4月至2024年3月于郑州大学华中阜外医院接受HTx的44例终末期心力衰竭患者的临床资料,收集术前基线资料、术前最后1次中性粒细胞绝对计数、淋巴细胞绝对计数、单核细胞绝对计数、血小板绝对计数、手术资料及术后随访资料。通过构建受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(AUC),并通过计算约登指数确定NLR界值,根据NLR界值分为高NLR组及低NLR组,对两组术前基线资料、围手术期资料及近期预后进行统计学分析。结果通过ROC曲线计算的NLR界值为3.494,高NLR组术后监护室停留时间长于低NLR组,差异有统计学意义(P<0.05),高NLR组机械通气时间长于低NLR组,差异有统计学意义(P<0.05),高NLR组术后3个月死亡率高于低NLR组,差异有统计学意义(P<0.05),高NLR组术后连续肾脏替代治疗(CRRT)使用率高于低NLR组,差异有统计学意义(P<0.05),两组性别、年龄、吸烟史、高血压史、术前血肌酐、术前总胆红素、术前使用主动脉内球囊反搏(IABP)、左室射血分数比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组手术资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论术前高NLR与HTx后早期死亡及术后CRRT使用相关,具有一定的预测价值。

关键词： 宫颈高级别病变   人乳头瘤病毒   感染   微小核糖核酸-21   环氧合酶-2   人白细胞抗原-G   鳞状上皮细胞癌抗原  

摘要： 目的探讨宫颈高级别病变人乳头瘤病毒(HPV)感染亚型分布及其血清微小核糖核酸(miR)-21、环氧合酶-2(COX-2)mRNA、人白细胞抗原-G(HLA-G)和鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)表达。方法采用随机数字表法选取2022年1月-2024年1月赣州市妇幼保健院收治的51例宫颈高级别病变HPV感染患者为感染组,52例宫颈高级别病变未感染HPV患者为未感染组,另选同期54名健康体检者为健康组。分析宫颈高级别病变HPV感染亚型及感染类型分布情况,比较各组血清miR-21、COX-2 mRNA、HLA-G和SCC-Ag水平,分析其对宫颈高级别病变HPV感染的诊断价值。结果感染组检测发现HPV感染例次为75例次,单一感染占比较多的为HPV16、HPV18,多重感染占比较多的为HPV16、HPV52和HPV58。感染组、未感染组和健康组血清miR-21、COX-2 mRNA、HLA-G和SCC-Ag水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),四指标感染组高于未感染组和健康组(P<0.05),且未感染组高于健康组(P<0.05)。四指标联合检测对宫颈高级别病变HPV感染患者的诊断曲线下面积(AUC)值高于单独检测的AUC值(P<0.05),且联合检测的敏感度为92.16%,特异度为92.32%。结论HPV基因型HPV16在宫颈高级别病变HPV感染患者中最常见,且在单一及多重感染中均占比较高。miR-21、COX-2 mRNA、HLA-G和SCC-A与宫颈高级别病变有关,且与宫颈高级别病变HPV感染有关,四指标均呈高表达,且四指标联合检测对宫颈高级别病变HPV感染诊断价值较高。

关键词： 高尿酸血症   痛风性关节炎   四妙丸   尿酸   炎症   大鼠模型   中药研究  

摘要： 目的基于白细胞介素-1β(IL-1β)/核因子-κB(NF-κB)通路探讨四妙丸(SMW)抑制高尿酸血症(HUA)大鼠肠道炎症反应、促进尿酸肠道排泄的机制。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照(CON)组、模型(MOD)组、SMW组、依托考昔(ETO)组和吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)组(n=8)。除CON组外,其余各组大鼠予以氧嗪酸钾100 mg/(kg·d)腹腔注射联合次黄嘌呤500 mg/(kg·d)灌胃处理建立HUA模型。从造模后第8天起,MOD组灌胃给予10 mL/(kg·d)氯化钠溶液(9 g/L),SMW组灌胃给予1130.3 mg/(kg·d)SMW,ETO组灌胃给予5.4 mg/(kg·d)ETO,PDTC组灌胃给予100 mg/(kg·d)PDTC。连续干预14d后,全自动生化分析仪分析大鼠血尿酸变化;苏木精-伊红(HE)染色检测肠道组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-1β;聚合酶链式反应(PCR)法检测大鼠回肠IL-1β、NF-κB p65及ATP结合盒亚家族G成员2(ABCG2)的mRNA表达水平;Western blot法检测大鼠回肠IL-1β、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)及ABCG2的蛋白表达水平;免疫组织化学染色(IHC)法检测大鼠回肠ABCG2蛋白表达水平。结果①HUA大鼠模型成功建立,表现为血清尿酸水平显著增加(P<0.05);SMW、ETO及PDTC能显著降低HUA大鼠血清尿酸水平(P<0.05)。②SMW能显著减少HUA大鼠回肠绒毛破坏、减轻细胞脱落及降低中性粒细胞浸润;ETO和PDTC能减少HUA大鼠回肠绒毛的破坏、减轻细胞脱落及降低中性粒细胞浸润,但改善效果不明显。③SMW、ETO和PDTC能显著降低HUA大鼠血清中IL-1β水平(P<0.05)。④SMW和ETO能显著降低大鼠回肠IL-1β和NF-κB p65的蛋白及mRNA表达(P<0.05);PDTC能显著降低大鼠回肠IL-1β和NF-κB p65的蛋白表达(P<0.05)。⑤SMW能显著增加ABCG2的蛋白及mRNA表达(P<0.05),而ETO及PDTC只能增加ABCG2蛋白表达(P<0.05),且效果不如SMW。结论SMW能有效降低血尿酸而改善HUA,其机制可能是通过抑制回肠IL-1β/NF-κB通路上调回肠ABCG2表达。

关键词： 肛周脓肿   病原菌分布   MMP-2   IL-10   CRP  

摘要： 目的分析肛周脓肿患者病原菌分布特征及其与血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、白细胞介素-10(IL-10)、C反应蛋白(CRP)水平的相关性。方法回顾性分析2022年5月至2024年2月首都医科大学附属北京中医医院收治的101例肛周脓肿患者,记录病原菌检测分布特点;分析肛周脓肿患者、不同单一病原菌感染患者血清MMP-2、IL-10、CRP阳性检测结果;分析不同期肛周脓肿患者血清MMP-2、IL-10、CRP阳性情况。结果101份标本中有97份标本培养出细菌,阳性率为97.04%(97/101),共分离出103株细菌;97份标本中有3份标本各培养出3种细菌,混合感染率为3.09%,其余94份标本均为单一感染。肛周脓肿患者血清CRP检出阳性率76.23%(77/101)均高于MMP-282.18%(83/101)、IL-1084.15%(85/101)检出阳性率,但差异无统计学意义(χ^(2)=0.343,P>0.05)。94份单一感染样本中检出94株病原菌,其中血清MMP-2、IL-10、CRP三项指标分别在肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他细菌感染患者中的检出阳性情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清MMP-2、IL-10、CRP三项指标分别在瘘管形成期、脓肿形成中期、急性炎症期中的检出阳性情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肛周脓肿患者主要病原菌以革兰阴性菌为主,可通过监测血清MMP-2、IL-10、CRP水平变化,为临床制定肛周脓肿患者治疗方案提供参考资料。

关键词： 慢性阻塞性肺疾病   组蛋白脱乙酰基酶2   白细胞介素-8   肿瘤坏死因子-α  

摘要： 目的:探究慢性阻塞性肺疾病患者生化检测中组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的实际情况,并分析各项指标水平与病情的关系及对疾病治疗效果的评估价值。方法:选取2022年1月-2024年5月江阴市人民医院收治的165例慢性阻塞性肺疾病患者作为研究对象设为研究组,另选150例健康成年人设为对照组。比较两组HDAC2、IL-8、TNF-α的水平,比较慢性阻塞性肺疾病发作期、稳定期的HDAC2、IL-8、TNF-α水平。对研究组实施个体化、综合性治疗,比较治疗前后HDAC2、IL-8、TNF-α水平。结果:研究组HDAC2水平低于对照组,IL-8、TNF-α水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组慢性阻塞性肺疾病发作期患者HDAC2检测水平低于对照组,IL-8、TNF-α水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组HDAC2检测水平较治疗前升高,IL-8、TNF-α水平较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HDAC2、IL-8、TNF-α水平可以作为慢性阻塞性肺疾病诊断依据,能够评估病情严重程度,为疾病治疗提供参考。

关键词： 异体红细胞悬浮液输注   Rh血型   输血疗效   C、E抗原  

摘要： 目的:分析ABO同型异体红细胞悬液输注对Rh血型系统C、E抗原双群频率的影响及输血疗效。方法:选取本院2023年1月至12月收治的120例输血治疗患者,随机分为观察组与对照组,各60例;观察组输注ABO及Rh-D血型相同而RhC、RhE表型不同的红细胞悬液2U,对照组输注ABO及Rh-D血型相同且RhC、RhE表型相同的红细胞悬液2U;观察两组患者输血后Rh血型C、E抗原双群频率、输血疗效、免疫功能变化及不良反应发生情况。结果:观察组在输注异体红细胞悬液后Rh血型C、E抗原双群频率均高于对照组(P<0.05);观察组患者输血后的红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)及血细胞比容(HCT)水平均低于对照组(P<0.05);观察组输血后1、7 d的外周血CD3+及CD4+水平均低于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率高于对照组(P<0.05)。结论:ABO同型异体红细胞悬液输注治疗中,RhC、E不同型输血会增加抗原双群频率,影响输血疗效,增强机体免疫抑制反应,增加输血不良反应的发生率。

关键词： 原因不明   复发性流产   淋巴细胞   主动免疫  

摘要： 目的:探讨淋巴细胞主动免疫治疗在原因不明复发性流产患者中的应用效果及安全性,为临床治疗提供更为坚实的理论基础和实践依据。方法:通过对我院收治的80例原因不明复发性流产患者按照随机数字法分为观察组40例,对照组40例,观察组患者进行淋巴细胞主动免疫治疗,对照组患者进行常规临床保胎治疗,比较两组患者治疗后怀孕情况以及细胞亚群水平的变化。结果:妊娠成功率、新生儿Apgar评分均在8分及以上等方面比较,P均小于0.05,观察组患者妊娠成功率显著高于对照组;治疗前、后患者的免疫指标进行监测分析显示,观察组患者治疗后封闭抗体水平、CD4+/CD8+比值均较治疗前升高(P<0.05),且高于对照组(P<0.05),而观察组患者治疗后NK细胞活性显著降低(P<0.05)。结论:淋巴细胞主动免疫治疗可以提高患者免疫系统对胚胎的耐受性增强,能够更好地保护胚胎免受母体免疫系统的攻击,降低自身免疫对胚胎的免疫损伤,在改善妊娠结局方面具有积极作用。

关键词： 单中心   急性淋巴细胞白血病   流行病学   儿童   成人  

摘要： 目的:收集急性淋巴细胞白血病(acutelymphoblasticleukemia,ALL)患者的病例资料,分析总结ALL患者的流行病学特征。方法:收集2013年01月至2022年12月我中心收治的新发ALL患者的临床资料,回顾性分析其年龄、性别、发病季节、地域分布、危险因素暴露史、家族史、分型特征等流行病学资料。结果:ALL患者男女比例为1.06∶1,中位年龄17.3岁,儿童发病年龄高峰1~5岁,成人好发年龄呈数个分散小高峰。发病季节高峰为夏季,常住地农村∶城市=4.26∶1。危险因素暴露占比前三分别为母亲孕期有害物质接触、父亲在母亲孕期/分娩后吸烟、母亲孕期感染。一至三级亲属中有异常疾病史者占6%,以肺癌及消化系统肿瘤为主。顺产占87.3%,剖宫产占12.8%;头胎占45.5%,二胎占35.3%,三胎及以上占19.3%;儿童中6月龄内母乳喂养占88.5%,配方奶喂养占4.8%,混合喂养占6.8%。B-ALL占83.3%,T-ALL占16.7%;正常染色体核型占56.7%,伴染色体数目和(或)结构异常占43.3%;融合基因阳性率47.3%,占比前三融合基因分别是BCR-ABL(28.0%)、E2A-PBX1(5.8%)、TEL-AML1(5.2%)。结论:本研究中ALL男性多于女性,儿童发病年龄高峰1~5岁,发病季节高峰为夏季,常住地多为农村,有胎儿期/生后有害物质暴露史、亲属血液病/恶性肿瘤病史者占比较高,免疫分型以B型为主,染色体核型以正常为主,融合基因以BCR-ABL、E2A-PBX1、TEL-AML1多见。

关键词： CD47   肿瘤相关巨噬细胞   单克隆抗体   抗原结合表位   免疫治疗  

摘要： CD47/信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)虽为最受关注的吞噬检查点之一,但其靶向抗体却因普遍存在的红细胞毒性限制了临床应用。2C8是一株低红细胞毒性的CD47单克隆抗体,基于抗体可变区骨架序列的高度保守性设计简并引物,通过RT-PCR法从2C8杂交瘤细胞中扩增获得全新抗人CD47轻、重链可变区序列。利用真核表达系统表达并纯化获得2C8scFv-hFc融合抗体纯品。采用流式细胞术检测融合抗体亲和力。采用吞噬实验检测融合抗体对不同亚型巨噬细胞的促吞噬能力。采用红细胞凝集实验检测融合抗体红细胞毒性。结果显示,2C8scFv-hFc融合抗体亲和力良好,对M0、M1、M2亚型巨噬细胞的促吞噬作用均显著优于阳性对照抗体,不同浓度下均不引起红细胞凝集,维持了亲本全抗的低红细胞毒性优势。利用生物大分子计算平台对抗体2C8的抗原结合表位进行了初步分析,结果显示,2C8与SIRPα的关键结合表位存在竞争及空间位阻。综上,扩增获得一对全新抗人CD47可变区序列,基于此表达制备的2C8scFv-hFc嵌合人源抗体具有高亲和力、强促吞噬能力、低红细胞毒性等特性,并对其促吞噬机制从结合表位角度进行了初步分析,为后续CD47抗体靶向治疗提供新的选择。