课程文献中心 更多>>

关键词： 嵌合抗原受体-T细胞   形态学方法   检测方法  

摘要： 目的:为了减少单一检测方法的局限性,探讨形态学方法在嵌合抗原受体(CAR)-T细胞检测应用中的可行性。方法:分析106例应用CAR-T免疫方法治疗的病例,比较形态学检测到的CAR-T与输注物中和流式细胞分选获得的CAR-T细胞形态。通过流式细胞术(FCM)和形态学方法分别检测各个时间点外周血或骨髓标本CAR-T比例,采用统计学方法对两种方法检测结果进行比较,以评估形态学方法检测结果的可靠性。结果:形态学检测到的CAR-T与上述两种CAR-T形态特征一致。Spearman相关性分析结果显示在各个检测时间点,外周血或骨髓标本通过2种方法检测结果均具有相关性(r_(s)>0.3),其中除第2天、第28天外结果具有高度相关性(r_(s)>0.8,P<0.01);Wilcoxon秩和检验显示除第2天、第28天外其余检测时间点检测结果差异无统计学意义(P>0.05);选取扩增高峰的外周血标本进行一致性分析,结果示第10天有103组数据在95%可信区间内,第14天有102组数据在95%可信区间内,一致性较好;两种方法联合检测检出率为99.06%,高于仅单一使用FCM方法(检出率81.13%),差异有统计学意义(χ^(2)=16.433,P<0.05)。结论:形态学方法在CAR-T检测中应用是可行的,作为FCM方法的补充方法弥补了单一检测方法的不足。

关键词： 高摄入红肉   TLR4/MyD88/NF-κB通路   炎症细胞因子   溃疡性结肠炎  

摘要： 目的探讨高摄入红肉对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠结肠组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及炎症细胞因子的影响。方法40只断乳Balb/c小鼠随机分为4组。即:对照组、红肉组、UC组和红肉+UC组,每组10只,对照组、UC组饲喂普通纯化型饲料,红肉组、红肉+UC组饲喂高红肉饲料,均饲养8周;于饲养期的最后9 d对UC组、红肉+UC组小鼠给予3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液诱导UC模型。采用实时荧光定量PCR检测UC小鼠结肠中TLR4、MyD88及NF-κB mRNA的表达,检测UC小鼠结肠中IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS mRNA的表达。结果与UC组相比,红肉+UC组小鼠结肠组织中TLR4、MyD88及NF-κB mRNA的表达显著升高;与UC组相比,红肉+UC组小鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS mRNA表达显著升高。结论高摄入红肉可能是通过激活UC小鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路并促进炎症细胞因子大量释放加重小鼠UC。

关键词： 造血干/祖细胞   淫羊藿苷   γ-干扰素   自噬   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨淫羊藿苷对γ-干扰素(Interferon gamma,IFN-γ)诱导的CD34^(+)细胞自噬性凋亡的影响。方法采集新鲜脐血,采用荧光活化细胞分选(Fluorescence-activated cell sorting,FACS)/磁性活化细胞分选(Magnetic activated cell sorting,MACS)系统分选CD34^(+)细胞,FACS/MACS分选的CD34^(+)细胞分组培养(加或不加IFN-γ),进一步给予自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)和淫羊藿苷预处理。观察细胞自噬情况,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(Propidium iodide,PI)法流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果IFN-γ处理的CD34^(+)细胞自噬明显增强,应用自噬抑制剂3-MA后可抑制IFN-γ诱导的CD34^(+)细胞自噬,应用淫羊藿苷后CD34^(+)细胞自噬水平提高;IFN-γ处理的CD34^(+)细胞凋亡明显增强,3-MA和淫羊藿苷预处理后可抑制IFN-γ诱导的CD34^(+)细胞凋亡。结论IFN-γ可诱导CD34^(+)细胞自噬,抑制自噬可促进IFN-γ介导的CD34^(+)细胞凋亡,淫羊藿苷可促进IFN-γ诱导的CD34^(+)细胞自噬,抑制IFN-γ诱导的CD34^(+)细胞自噬性凋亡。

关键词： 施马伦贝格病毒   核衣壳蛋白   原核表达   细胞融合   单克隆抗体  

摘要： 施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)是一种新型正布尼亚病毒,主要感染牛、绵羊和山羊等反刍动物。SBV的核衣壳蛋白(N)已被证明是血清学检测的理想靶抗原。本研究将SBV N基因的全长编码序列克隆至pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET-28a-SBV-N,转化至Rosseta感受态细胞中,IPTG诱导表达N蛋白。采用Ni-NTA琼脂糖亲和层析法纯化His-SBV-N蛋白,以获得的N蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后取效价高的小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,制备得到针对SBV N蛋白的单克隆抗体(McAbs),并通过间接ELISA筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。最终获得3株稳定分泌抗N单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2B1、2B2和3F2。抗体亚型鉴定均为IgG2a。Western blot和ELISA检测结果表明,这3株单抗在酶联免疫吸附试验中与重组SBV N蛋白具有良好的反应性,重组N蛋白的表达和单抗的成功制备为SBV的血清学诊断提供了重要材料。

关键词： 小肠淋巴管扩张症   淋巴细胞   原发性免疫缺陷病  

摘要： 小肠淋巴管扩张症是一种罕见病,常表现为腹泻、水肿、胸腹腔积液,乳糜性胸腹腔积液等,可出现生长发育迟缓、免疫功能低下等临床表现。该病临床表现差异大,极易被误诊。原发性免疫缺陷病是先天性免疫功能异常疾病的统称,随着国内医生对该病认知水平的提升,越来越多的患者被临床早期识别。本文报道1例以反复腹泻、淋巴细胞数量明显下降为主要临床特点,初诊考虑为原发性免疫缺陷病的小肠淋巴管扩张症患儿,同时文献复习小肠淋巴管扩张症的临床特点以及和原发性免疫缺陷病的主要临床鉴别点,帮助临床医生更早期对两种疾病做出鉴别,及时做出更有利的临床判断。

关键词： 药物超敏反应综合征   别嘌醇   普济消毒饮  

摘要： 药物超敏反应综合征(DIHS)是一种少见且可危及生命的药物不良反应,具有发病延迟、症状迁延等特点,其临床以急性广泛性皮损,伴有发热、淋巴结肿大、肝肾肺等多器官受累以及嗜酸性粒细胞增多、单核细胞增多等血液异常为特征[1];常见致敏药物包括抗菌药物(β-内酰胺类、四环素类、磺胺类、抗结核药)、抗癫痫药、别嘌醇、非甾体抗炎药等。

关键词： 血清淀粉样蛋白A   红细胞沉降率   白细胞介素-6   类风湿性关节炎   治疗效果  

摘要： 目的:分析类风湿性关节炎患者血清淀粉样蛋白A(Serum levels of amyloid A,SAA)、红细胞沉降率(Erythrocyte sedimentation rate,ESR)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平联合检测对治疗效果的评估价值.方法:2022年1月-2023年12月选取我院84例类风湿性关节炎患者为研究组,并评估患者治疗12 w后临床疗效;根据1:1比例另选取同期健康体检者为对照组(n=84);对比2组(入院时)及不同临床疗效患者(入院时、6 w时)血清SAA、IL-6、ESR水平,并分析临床疗效的预测价值及危险度.结果:研究组入院时血清SAA、IL-6、ESR水平显著高于对照组(P<0.05);与治疗有效患者相比,治疗无效患者入院时、6 w时血清SAA、IL-6、ESR水平均较高(P<0.05);入院时、6 w时血清SAA、IL-6、ESR水平联合预测治疗无效的曲线下面积(AUC)为0.840、0.889、0.938,均高于各指标单独预测(P<0.05);入院时、6 w时血清SAA、IL-6、ESR高水平患者发生预后不良的危险度是低水平2~5倍(P<0.05).结论:类风湿性关节炎患者体内SAA、IL-6、ESR水平明显升高,与患者临床治疗效果存在显著关联性,联合检测可早期辅助临床评估疗效,对及时更改治疗方案具有重要价值.

关键词： 过敏性紫癜   紫癜性肾炎   HMGB1   RAGE   IL-6  

摘要： 目的研究HMGB1、RAGE和IL-6在过敏性紫癜(HSP)中的表达水平,探讨其在疾病发生发展中的作用。方法选取2022年1月~2024年7月期间于承德医学院附属医院确诊为过敏性紫癜患者共80例为研究对象,根据尿液检查结果分为肾型紫癜组和非肾型紫癜组,选取同期体检人群为对照组。采用ELISA法检测HMGB1、RAGE和IL-6的表达。采用非参数检验和二元logistic回归模型对结果分析,ROC曲线分析指标对肾型紫癜的预测价值。结果HMGB1和IL-6在肾型紫癜组表达水平最高,非肾型紫癜组高于对照组(P<0.05)。RAGE表达水平在肾型紫癜组和非肾型紫癜组间比较差异不大(P>0.05),2组均高于对照组(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示HMGB1和IL-6的升高与肾型紫癜的发生具有统计学意义。ROC曲线显示HMGB1和IL-6的升高对于早期评估肾脏损伤具有较好的临床意义。结论HMGB1、RAGE、IL-6可能参与了HSP的发生和发展,HMGB1有望成为HSP治疗的潜在靶点,HMGB1和IL-6两者联合检测对早期评估肾型紫癜的发生具有较高的临床价值。

关键词： 固本益肠补虚法   直肠前切除综合征   炎症细胞因子   生活质量  

摘要： 目的:探讨固本益肠补虚法对直肠前切除综合征患者的临床疗效及其对炎症细胞因子的影响。方法:选取2023年8月—2024年8月于唐山市中医医院诊断为直肠前切除综合征的120例患者,随机分为对照组和治疗组,每组60例。两组均给予常规治疗及护理,对照组口服纤维素片,2 g,每日1次,疗程8周;治疗组口服及灌肠固本益肠补虚方治疗,用法为每日早口服、晚灌肠,各150 mL中药汤剂,疗程8周。比较治疗前后两组的主观量表[LARS量表评分、Wexner粪失禁评分、EORTC QLQ-C30评分(QLQ-C30)(V3.0)、徐忠法“5项10分制”直肠功能评分]、客观实验室指标(TNF-α、IL-6、IL-17)及安全性指标的变化。结果:治疗后,两组的主观量表评分及炎症细胞因子水平均较治疗前显著改善(P<0.05,P<0.01)。治疗组的LARS量表评分、Wexner粪失禁评分较对照组明显降低(P<0.05,P<0.01),QLQ-C30评分、徐忠法“5项10分制”直肠功能评分较对照组明显升高(P<0.05,P<0.01),TNF-α、IL-6、IL-17水平较对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前后安全性指标未发现异常,未发生不良反应。结论:固本益肠补虚法能够有效改善直肠前切除综合征患者的直肠功能和生活质量,降低炎症细胞因子的水平,具有较好的临床疗效和安全性。

关键词： 肠道菌群   心肌梗死   T细胞免疫   心脏炎症   胶原沉积   心室重构  

摘要： 目的探究肠道菌群失调对心肌梗死(MI)小鼠T细胞免疫、心脏炎症和心肌胶原纤维沉积的影响。方法构建小鼠模型,并将小鼠分为假手术组(Sham)、MI组(MI)、MI+抗生素处理(ABX)组(MI+ABX)、MI+益生菌干预组(MI+益生菌)。使用超声检测各组小鼠的心脏功能,分析各组小鼠的肠道菌群变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测脾脏和心脏调节性T细胞(Treg),以及小鼠心脏炎症指标白细胞介素(IL)-17、IL-23、干扰素-γ(IFN-γ)和心肌胶原纤维沉积情况。结果与Sham组相比,各组小鼠肠道菌群门分类占比均发生了显著变化;超声心动图显示,MI和MI+ABX组小鼠心脏功能受到了不同程度的损伤,而MI+益生菌组小鼠心脏功能的损伤得到了一定程度的抑制。ELISA检测发现,Terg在MI组中增加,在MI+ABX组中降低,而益生菌处理使得Treg的降低被逆转。此外,心脏炎症指标和心肌胶原沉积在MI组和MI+ABX组中均上调表达,而在MI+益生菌组中,炎症指标和胶原沉积的增加得到了一定程度的逆转。结论肠道菌群失调可能通过影响T细胞免疫、心脏炎症和心肌胶原纤维沉积等过程,加剧MI的病理过程。而益生菌干预则能够显著改善肠道菌群失调,恢复心脏功能,减轻炎症反应和心肌纤维化。