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关键词： 桥本甲状腺炎   细胞因子   流式微球阵列术   清肝散结消瘿方   免疫  

摘要： 目的 基于流式微球阵列术(cytometric bead array, CBA)技术探索桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis, HT)患者细胞因子谱的变化以及清肝散结消瘿方对HT的免疫调节作用。方法 选择2022年9月—2023年12月在北京中医药大学孙思邈医院和北京中医药大学东直门医院就诊且自愿接受清肝散结消瘿方治疗的HT患者28例作为桥本组,同期招募20例健康志愿者作为健康对照组。收集桥本组患者治疗前和服用清肝散结消瘿方治疗4周后的血清样本,比较3组的甲状腺抗体滴度:甲状腺过氧化酶抗体(thyroid peroxidase antibody, TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(troglobulin antibody, TGAb)以及细胞因子谱的变化。结果 健康对照组中甲状腺抗体(TPOAb、TGAb)滴度水平均在正常值范围内,且明显低于桥本患者,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。与治疗前对比,HT患者经过清肝散结消瘿方治疗后TPOAb滴度水平明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组相比,HT患者的多种细胞因子水平显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。经清肝散结消瘿方治疗后HT患者血清中IL-6、IL-8水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01),其他的促炎因子如IL-1β、IL-5、IL-17A、IL-17F、IL-22、TNFα和IFN-γ等水平亦有下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。另外,经中药治疗后抑炎因子IL-4、IL-10水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 桥本患者体内的细胞因子显著高于健康对照组,清肝散结消瘿方通过显著降低促炎细胞因子(IL-6、IL-8、IL-22等)并提升抗炎因子(IL-4、IL-10)水平,调控Th1/Th2平衡及Th17/Treg细胞功能,有效降低HT患者甲状腺抗体(TPOAb)滴度,提示其免疫调节作用可能与多靶点炎症通路干预相关。

关键词： 猪轮状病毒(PoRV)   VP6蛋白   真核表达   单克隆抗体  

摘要： 【目的】制备抗猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)VP6蛋白单克隆抗体,为PoRV检测方法的开发提供参考。【方法】以痘苗病毒启动子P28为VP6的启动子,以G3型PoRV核酸为模板扩增VP6基因,通过无缝克隆方法将VP6基因片段克隆至pSWE178质粒,构建重组质粒pSWE178-P28-VP6;利用同源重组和蚀斑纯化技术获得表达VP6蛋白的重组猪痘病毒rSWE178-P28-VP6,用SDS-PAGE鉴定VP6蛋白表达形式。以G9型PoRV为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,以重组病毒表达的VP6蛋白为检测抗原,通过间接ELISA筛选分泌抗VP6单克隆抗体的杂交瘤细胞。通过间接免疫荧光试验(IFA)检测单克隆抗体与G3、G4、G5、G9型PoRV的反应原性,选择其中1株单克隆抗体对人工感染PoRV的猪肠道组织进行免疫组化(IHC)检测。【结果】在构建了表达PoRV VP6蛋白的重组质粒pSWE178-P28-VP6基础上,成功构建了表达PoRV VP6蛋白的重组猪痘病毒,表达的蛋白分子质量大小45 ku,为可溶性表达。采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,筛选获得29株分泌抗VP6单克隆抗体的杂交瘤细胞株。IFA结果显示,26株单克隆抗体均能与G3、G4、G5、G9型PoRV反应,但荧光亮度存在差异。IHC检测结果显示,单克隆抗体能与感染PoRV的临床样品发生特异性免疫反应。【结论】本研究利用真核表达系统成功表达了PoRV VP6蛋白,采用杂交瘤技术筛选获得29株抗VP6单抗隆抗体,其中26株均能与G3、G4、G5、G9型PoRV反应。试验结果为PoRV免疫学检测方法的建立奠定了基础。

关键词： 脑梗死   氯吡格雷   神经元特异烯醇化酶   肿瘤坏死因子-α   临床转归  

摘要： 目的:观察脑梗死患者血清神经元特异烯醇化酶(NSE)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及CYP2C19基因多态性与氯吡格雷治疗转归的关联性。方法:纳入2021年11月至2023年11月本院收治的脑梗死患者104例,所有患者接受氯吡格雷治疗,并检测CYP2C19基因多态性和NSE、TNF-α水平,分析其与氯吡格雷治疗转归的关系。结果:预后良好组与预后不良组CYP2C19基因代谢型分布比较,差异有统计学意义(P<0.05),预后不良组血小板聚集率和血清与NSE、TNF-α水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);CYP2C19基因不同代谢型的血小板聚集率和NSE、TNF-α水平存在差异,差异有统计学意义(P<0.05),慢代谢型、中间代谢型血小板聚集率和NSE、TNF-α水平高于快代谢型,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良组合并糖尿病占比、年龄高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示:合并糖尿病、CYP2C19基因慢代谢型及年龄、NSE、TNF-α水平是影响氯吡格雷治疗转归的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示:五指标联合评估的AUC为0.843,敏感度和特异度分别为0.953、0.574。结论:脑梗死患者氯吡格雷治疗后预后不良与CYP2C19基因慢代谢型及血清NSE、TNF-α水平存在关联性,并对评估治疗转归有一定价值。

关键词： 莱茵衣藻   环磷酰胺   淋巴细胞   免疫功能   免疫抑制  

摘要： 本文研究了莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导免疫抑制小鼠的免疫调节作用。通过构建免疫低下的小鼠模型并灌胃莱茵衣藻水溶液,评估其对小鼠免疫功能的影响。结果表明,莱茵衣藻干预后小鼠的脾脏指数显著增加(P<0.005),胸腺指数相对增加但无显著差异;脾脏病理切片观察显示,莱茵衣藻干预后能缓解免疫低下小鼠脾脏损伤;小鼠的淋巴细胞增殖能力显著改善(P<0.0001),且部分免疫细胞表面标志物及核转录因子mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。这些结果表明,莱茵衣藻能够有效缓解环磷酰胺诱导的小鼠免疫抑制作用,具有潜在的免疫调节功能,为未来的医学应用提供了新的思路。

关键词： 鸡源JAK1   蛋白表达   单克隆抗体   抗原表位   禽流感病毒  

摘要： 为研究鸡源JAK1(Chicken JAK1,chJAK1)蛋白生物学功能,提取DF-1细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增chJAK1 ORF全长并构建真核表达质粒pcDNA3.1-His-chJAK1,并以其中截短片段chJAK1-286~608 aa(ΔchJAK1)构建重组原核表达质粒pET-32a-ΔchJAK1,以***表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备chJAK1蛋白单抗,并应用单抗初步分析了禽流感病毒感染DF-1细胞后chJAK1蛋白表达水平。结果表明:1)通过ELISA和Western blot筛选获得了2株单抗,分别命名为2E11和3F4,其单抗重链分别为lgG1和lgG2b亚类,轻链均为κ亚类,其腹水效价分别为6.4×10^(4)和1.6×10^(4)。2)间接免疫荧光和Western blot结果表明2株单抗都能识别鸡、鸭和鹅源JAK1,且2E11可与人源JAK1反应,但3F4不与人源JAK1反应。3)通过截短蛋白鉴定抗原表位,确定2E11识别的抗原表位为367HIVIKESTVSINKQDNKKMELKLSSHDEALSFASLI403,3F4识别的抗原表位为586RTQIYSGILNYKDDENEGYQNE608。4)禽流感病毒感染DF-1能诱导内源性chJAK1蛋白的下调表达。综上,本研究成功制备针对chJAK1的单抗,并证实chJAK1蛋白在AIV感染过程中发挥重要作用,单抗的制备为该蛋白的生物学及其抗病毒功能的研究奠定基础。

关键词： 表位   X射线晶体学   噬菌体展示技术   生物信息学   酶联免疫吸附实验  

摘要： 单克隆抗体药物因其特异性高、靶向能力强、不良反应小等特点,成为目前生物医学领域的重要研究方向。表位作为抗体识别抗原的特殊区域或结合位点,其有效鉴定对药物发现和设计至关重要。此文主要对抗体表位的X射线晶体学、噬菌体展示技术、ELISA等方法的研究进展进行介绍,阐述其相关原理、特点及应用。

关键词： 轻链型淀粉样变心肌病   心脏磁共振成像   细胞外容积分数   心脏缓解  

摘要： 目的:探讨心脏磁共振成像(CMR)测量的基线细胞外容积(ECV)在预测免疫球蛋白轻链型淀粉样变心肌病(AL-CA)治疗后心脏缓解中的价值。方法:回顾性纳入2020年5月至2023年3月在北京协和医院确诊为AL-CA的患者40例。所有患者均接受CMR测量基线ECV和其他相关参数。依据治疗后N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的变化来评估心脏缓解程度:NT-proBNP≤350 pg/ml为完全缓解;NT-proBNP较基线下降>60%且没有达到完全缓解标准为很好的部分缓解;NT-proBNP较基线下降31%~60%且没有达到很好的部分缓解标准为部分缓解;NT-proBNP较基线下降≤30%为无缓解。分别将出现首次心脏缓解(包括部分缓解、很好的部分缓解或完全缓解)和出现最佳心脏缓解(包括部分缓解、很好的部分缓解或完全缓解)作为研究终点。按照随访结束时是否出现心脏缓解将患者分为心脏缓解组(n=24,包括部分缓解7例、很好的部分缓解14例、完全缓解3例)与未缓解组(n=16)。采用Cox比例风险回归模型探索基线ECV对心脏缓解的影响。通过Kaplan-Meier法及log-rank检验判断和比较不同基线ECV患者的心脏缓解概率和时间差异。结果:在全部40例患者中,男性28例(70%),平均年龄(58±8)岁。λ型AL-CA患者32例(80%)。中位随访568(155,1049)d期间,15例在治疗后60 d时出现心脏部分缓解,3例可达到很好的部分缓解;治疗后720 d至随访结束,共3例达到完全缓解。多因素Cox分析显示,基线ECV(HR=0.937,95%CI:0.879~0.999,P=0.045)和达雷妥尤单抗治疗方案(HR=3.279,95%CI:1.098~9.796,P=0.033)是首次心脏缓解的独立预测因素。对于最佳心脏缓解,基线ECV(HR=0.931,95%CI:0.867~1.000,P=0.048)和达雷妥尤单抗一线治疗方案(HR=3.132,95%CI:1.052~9.319,P=0.040)同样也是独立预测因素。Kaplan-Meier曲线显示,与基线≥54%患者比,基线ECV<54%患者更早获得首次心脏缓解(log-rankP=0.014);与基线ECV≥55%患者比,基线ECV<55%患者更可能达到最佳心脏缓解(log-rank P=0.006)。结论:由CMR测量的基线ECV可作为AL-CA患者治疗后心脏缓解的独立预测指标,较低的基线ECV水平与更快和更好的心脏缓解相关。达雷妥尤单抗一线治疗方案显示出更佳的心脏缓解效果。

关键词： 白介素-6   成纤维细胞生长因子-23   压力性尿失禁   相关性  

摘要： 目的 探讨成年女性血清白介素-6(IL-6)、成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)水平对压力性尿失禁(SUI)的预测价值。方法 选取2022年1月至2023年3月秦皇岛市第一医院收治的136例SUI成年女性患者作为研究对象(研究组),根据1 h尿垫试验结果将研究组患者分为轻度组(<2 g,n=82)、中度组(2 g~10 g,n=36)和重度组(>10 g,n=18)三个亚组;另选取同期于本院体检的健康成年女性100名作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-6、FGF-23水平。采用多因素Logistic回归分析探讨成年女性SUI发生的影响因素;采用受试者工作特性(ROC)曲线分析血清IL-6、FGF-23水平对成年女性SUI的诊断价值。结果 研究组分娩次数>1次占比、分娩方式顺产占比及血清IL-6、FGF-23水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。随着病情严重程度增加,SUI患者血清IL-6、FGF-23水平依次升高:重度组>中度组>轻度组,差异有统计学意义(P均<0.05)。多因素分析显示:分娩次数>1次(OR=2.440,95%CI:1.396~4.266)、分娩方式顺产(OR=2.115,95%CI:1.116~4.007)、IL-6≥40.68μg/L(OR=2.667,95%CI:1.547~4.599)、FGF-23≥8.67 ng/L(OR=2.892,95%CI:1.629~5.136)是成年女性SUI发生的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清IL-6、FGF-23水平两指标联合检测诊断成年女性SUI的AUC为0.905(95%CI:0.860~0.955),均高于血清IL-6、FGF-23单一指标诊断的AUC(P<0.05)。结论 成年女性血清IL-6、FGF-23水平升高与SUI发病有关,两指标联合检测有望作为成年女性SUI发生的辅助诊断指标。

关键词： 脑胶质瘤   髓鞘碱性蛋白   癌胚抗原   预后营养指数   WHO中枢神经系统肿瘤分类   术后复发   危险因素  

摘要： 目的探究血清髓鞘碱性蛋白(MBP)、癌胚抗原(CEA)及预后营养指数(PNI)水平与脑胶质瘤肿瘤恶性程度及术后复发的相关性。方法选取2019年7月至2023年7月在邢台市中心医院进行手术治疗的脑胶质瘤患者126例,根据术后病理WHO中枢神经系统肿瘤分类分为低级别组(Ⅰ、Ⅱ级)和高级别组(Ⅲ、Ⅳ级),术后随访1年,根据复发情况分为复发组和未复发组,比较组间临床资料及血清MBP、CEA及PNI水平差异,Spearman相关系数分析上述指标与WHO分级的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析其对脑胶质瘤术后1年复发的预测价值,二元Logistic回归分析脑胶质瘤术后复发的危险因素。结果术后病理结果显示,126例脑胶质瘤患者中,低级别组45例(35.71%),高级别组81例(64.29%),两组年龄>60岁患者占比、血清MBP、CEA、PNI水平差异均有统计学意义(P<0.05);脑胶质瘤患者血清MBP、CEA与WHO分级呈正相关(P<0.05),PNI水平与WHO分级呈负相关(P<0.05);126例脑胶质瘤术后患者中有56例在1年内复发(44.44%)。与未复发组比较,复发组年龄>60岁、肿瘤直径>5 cm患者占比、血清MBP、CEA均升高(P<0.05),PNI水平降低(P<0.05);血清MBP、CEA及PNI水平单独预测脑胶质瘤术后1年复发的AUC分别为0.819、0.868、0.749,联合预测的AUC为0.892(P<0.05);年龄、肿瘤直径、血清MBP、CEA及PNI水平均为脑胶质瘤术后1年复发的危险因素(P<0.05)。结论血清MBP、CEA及PNI水平与脑胶质瘤的恶性程度及术后复发密切相关,三者联合预测术后1年复发的效能优于单一指标,可应用于临床辅助评估脑胶质瘤复发风险,为治疗方案的优化提供参考。

关键词： lebrikizumab-lbkz   单克隆抗体   IL-13拮抗剂   中重度特应性皮炎  

摘要： lebrikizumab-lbkz是一种IL-13拮抗剂,由礼来公司研发,于2024年9月13日获美国FDA批准,用于体质量至少40 kg的成人和12岁及以上患有中重度特应性皮炎的患者,特别是对局部治疗未能充分控制或不适宜使用局部治疗的患者;可配合或不配合局部皮质类固醇使用。研究显示,lebrikizumab-lbkz对度普利尤单抗疗效不佳或不耐受的中重度特应性皮炎患者均表现出较好的疗效。本文对该药物的作用机制、药动学、临床疗效、安全性等进行阐述,以期为中重度特应性皮炎患者提供一种高效、长效的治疗手段。