课程文献中心 更多>>

关键词： PD-L1   非小细胞肺癌   转移   凋亡   侵袭   HK2   HLA   增殖  

摘要： [目的]探究PD-L1与HK2/HLA-I通路的相互作用对非小细胞肺癌转移的影响。[方法]免疫组化实验分析非小细胞肺癌中PD-L1的表达。将非小细胞肺癌A549细胞分为3组:si NC组、si PD-L1组以及HY-B0486组。通过CCK-8实验分析A549细胞的增殖能力,Transwell实验分析A549细胞侵袭能力,流式细胞术分析A549细胞凋亡率,蛋白免疫印迹实验分析A549细胞中HK2/HLA-Ⅰ通路的蛋白表达情况。将非小细胞肺癌A549细胞分为4组,分别转染HK2野生型、突变型的荧光素酶报告基因载体与PD-L1 mimic/NC质粒;通过Targetscan网址预测PD-L1与HK2启动子结合区域,双荧光素酶报告基因实验分析PD-L1与HK2的靶向调节作用,实时荧光定量PCR检测HK2/HLA-ⅠmRNA表达水平。[结果]免疫组化结果显示,PD-L1在非小细胞肺癌组织中的表达水平增加(0.32±0.09 vs 0.79±0.06,P<0.05)。CCK-8实验发现,与si NC组相比,si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的吸光度显著降低。Transwell实验显示,si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的侵袭能力显著降低(156.68±12.69 vs 78.66±6.78 vs 81.56±7.88个,P<0.05)。流式细胞术实验结果显示,si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的凋亡率增加(3.75%±0.28%vs 13.23%±0.19%vs 14.16%±0.56%,P<0.05)。蛋白免疫印迹实验结果显示,si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的HK2和HLA-Ⅰ蛋白表达量下调。PD-L1与HK2启动子存在相互结合区域,同时PD-L1能够靶向作用HK2,并激活HK2/HLA-Ⅰ通路。[结论]PD-L1在非小细胞肺癌组织中的表达水平增加。抑制PD-L1和HK2/HLA-Ⅰ通路后可以明显抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖和侵袭能力,并能促进A549细胞细胞凋亡。并且PD-L1能够调节HK2/HLA-Ⅰ通路的激活,PD-L1对A549细胞转移的影响与调节HK2/HLA-Ⅰ信号通路相关。

关键词： 泄浊解毒方   溃疡性结肠炎   炎性细胞因子   缺氧诱导因子-1α  

摘要： 目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清炎性细胞因子和结肠组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白的影响。方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇复合灌肠法建立UC大鼠模型,将其分为模型组、美沙拉嗪组、泄浊解毒方高剂量组、中剂量组和低剂量组。药物组给予相应的药物灌胃14 d,空白组和模型组给予生理盐水灌胃14 d。给药结束后处死大鼠,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、IL-17的含量。Western blot法检测结肠组织HIF-1α蛋白的表达。结果:泄浊解毒方可改善UC大鼠结肠黏膜的炎症反应,与模型组比较,泄浊解毒各剂量组大鼠结肠黏膜的病理损伤评分显著降低,血清IL-10含量明显升高,IL-6、IL-17含量显著降低(P<0.05);泄浊解毒方各剂量组HIF-1α蛋白的表达明显低于模型组(P<0.05)。结论:泄浊解毒方可改善UC大鼠结肠黏膜的病理损伤,其作用机制可能与调节血清炎性细胞因子和降低结肠组织中HIF-1α蛋白的表达有关。

关键词： 显齿蛇葡萄   免疫功能   细胞免疫   体液免疫   单核-巨噬细胞功能  

摘要： 为了研究显齿蛇葡萄叶水提物对正常小鼠免疫功能的影响,制备显齿蛇葡萄叶的水提物,将96只小鼠分为三个大组,第一组测定脏器/体重比值、迟发型变态反应和半数溶血值;第二组测定碳廓清实验的吞噬指数;第三组测定NK细胞活性。以上大组再分为四个小组:每组8只,正常对照组、显齿蛇葡萄叶水提物低剂量组(0.5 g/kg/day)、中剂量组(1.0 g/kg/day)和高剂量组(2.0 g/kg/day),分别灌胃给药30 d。结果显示,迟发型变态反应和NK细胞活性两个实验组结果均呈阳性;与正常对照组比较,迟发型变态反应实验的中剂量组和高剂量组小鼠的足趾肿胀度均显著增加。NK细胞活性组与正常对照组比较,三个剂量组小鼠的NK细胞活性均显著升高。由此推断显齿蛇葡萄叶水提物具有增强正常小鼠免疫的功效。

关键词： 咳喘镇定汤   小儿咳嗽变异性哮喘   IL-23/Th17轴   小气道功能   疗效   咳嗽   T淋巴亚群  

摘要： 目的观察咳喘镇定汤在小儿咳嗽变异性哮喘治疗中的作用及对患儿嗜酸性粒细胞计数(eosinophil count,EOS)、白介素-23(interleukin-23,IL-23)/辅助性T细胞17(helper T cells17,Th17)轴的影响。方法选取2020年8月—2023年2月收治的小儿咳嗽变异性哮喘患儿104例,将患儿采用简单随机法分为两组。常规组给予止咳化痰、抗炎、平喘等常规治疗,咳喘镇定汤组在常规组基础上采用咳喘镇定汤辅助治疗。检测组间及组内T淋巴亚群、EOS、巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)、Clara细胞分泌蛋白16(clara cell secreted protein 16,CC-16)、嗜酸细胞活化趋化因子(Eotaxin)、IL-23/Th17轴、小气道功能水平。评估组间及组内咳嗽症状评分、中医证候评分差异。统计组间疗效和不良反应。结果治疗前T淋巴亚群、CC-16、Eotaxin等差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后CD_(8)^(+)、EOS、MIP-1α、Eotaxin降低,CC-16、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)升高,咳喘镇定汤组治疗后CD_(8)^(+)、EOS、MIP-1α、Eotaxin低于常规组,CC-16、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)高于常规组(P<0.05)。治疗前比较IL-23/Th17轴差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后IL-23、Th17、白介素-17(interleukin-17,IL-17)降低,咳喘镇定汤组治疗后IL-23/Th17轴低于常规组(P<0.05)。治疗前相关评分无差异(P>0.05)。两组治疗后咳嗽症状评分、中医证候评分降低,咳喘镇定汤组治疗后咳嗽症状评分、中医症候评分低于常规组(P<0.05)。治疗前小气道功能无差异(P>0.05)。两组治疗后小气道功能升高,咳喘镇定汤组治疗后小气道功能高于常规组(P<0.05)。咳喘镇定汤组治愈13例,显效和有效共35例,总有效率92.31%高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论咳喘镇定汤可通过调控小儿咳嗽变异性哮喘患儿IL-23/Th17轴,改善T淋巴亚群和小气道功能,减轻咳嗽症状,提高疗效。

关键词： 社区获得性肺炎   吸烟   细胞因子  

摘要： 目的分析吸烟对社区获得性肺炎(CAP)患者血清Th1/Th2/Th17相关细胞因子的影响。方法回顾性分析2022年6月—2024年6月青海大学附属医院收治的94例CAP患者的临床资料。将患者分为感染吸烟组与感染非吸烟组,并根据吸烟指数将感染吸烟组分为轻度吸烟组(吸烟指数<400亚组)和重度吸烟组(吸烟指数≥400亚组)。比较各组患者的性别、年龄、既往病史、发病季节,外周血白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、C反应蛋白(CRP),血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-17(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果感染吸烟组淋巴细胞计数及CRP水平均高于感染非吸烟组(P<0.05);感染吸烟组患者IL-4、IL-5及IL-17水平均高于感染非吸烟组,感染吸烟组患者IL-2水平均低于感染非吸烟组(P<0.05);感染非吸烟组患者血清IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α水平均高于吸烟指数<400亚组,感染非吸烟组患者血清IL-5水平低于吸烟指数<400亚组(P<0.05);感染非吸烟组患者血清IL-4、IL-5、TNF-α、IL-17水平均低于吸烟指数≥400亚组(P<0.05);吸烟指数≥400亚组患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ、TNF-α、IL-17水平均高于吸烟指数<400亚组(P<0.05)。随着吸烟指数的增加,CAP患者血清IL-5水平呈升高趋势(P<0.05)。结论CAP的发病过程中,吸烟可能通过抑制Th1并促进Th2及Th17反应,导致肺部炎症进一步发展;随着吸烟程度的升高,Th1、Th2及Th17细胞因子表达也升高。

关键词： HSV-2 gD2蛋白   慢病毒   多克隆抗体   稳转株  

摘要： 目的采用慢病毒介导293T细胞表达单纯疱疹病毒Ⅱ型包膜糖蛋白2(HSV-2 gD2),免疫新西兰兔制备高效价的gD2多克隆抗体,为HSV-2病毒的检测及其基础研究提供便利。方法将密码子优化的HSV-2病毒G Strain US6基因(MH790667.1)序列连接至慢病毒载体pLenti-CMV-gD2-6His中,重组慢病毒感染正常293T细胞并筛选出稳转株,从培养上清中收获分泌型gD2蛋白后采用Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白,与弗氏佐剂1∶1混合乳化后皮下注射免疫新西兰大白兔,加强免疫1次,ELISA检测兔血清中gD2特异性抗体(纯化抗原包板)的效价,Western blot检测载体病毒中gD2抗原蛋白的表达。结果构建的慢病毒重组质粒序列与理论设计一致,稳转株表达的gD2-6His蛋白相对分子质量约为37000,电泳条带位于40000~55000(糖基化修饰),二次免疫后兔血清中gD2特异性抗体滴度为1∶204800,兔血清经1∶500稀释后作为一抗孵育可检测到疫苗病毒中gD2抗原蛋白的表达,条带特异。结论成功表达高纯度分泌型gD2蛋白,并制备了高效价的兔多克隆抗体,便于后续HSV-2疫苗的研发。

关键词： 乙型肝炎   谷丙转氨酶   谷草转氨酶   免疫球蛋白   预测价值  

摘要： 目的 探讨血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及免疫球蛋白水平对乙型肝炎(HB)患者病情严重程度的预测价值。方法 选取HB患者127例,参照相关标准评估患者病情严重程度,检测并对比不同病情严重程度的患者血清ALT、AST及免疫球蛋白水平,分析ALT、AST、免疫球蛋白水平与HB患者病情严重程度的关系及预测价值。结果 127例HB患者中轻度38例(29.92%),中度59例(46.46%),重度30例(23.62%);重度HB患者ALT、AST、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)水平依次较中度、轻度患者高(P<0.05);经Kendall's tau-b相关系数检验显示,ALT、AST、IgA、IgM、IgG水平与HB患者病情严重程度均呈正相关(r>0,P<0.05);绘制ROC曲线显示,ALT、AST、IgA、IgM、IgG单独检测及各指标联合检测预测HB患者中重度病情的AUC均>0.70,均有诊断价值,且联合检测价值最高。结论 血清ALT、AST、免疫球蛋白水平与HB患者病情严重程度有关,对HB患者病情严重程度具有较高预测价值,考虑未来可作为患者病情严重程度判断辅助指标之一。

关键词： 益精利浊法   慢性非细菌性前列腺炎   TNF-α   IL-8   NIH-CPSI评分  

摘要： 目的观察益精利浊法治疗慢性非细菌性前列腺炎(chronic non-bacterial prostatitis,CNP)临床效果及对前列腺液肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-ɑ,TNF-ɑ)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等的影响。方法选取2023年1月—2023年12月于该院进行治疗的CNP患者130例,随机分成对照组与治疗组,对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组的基础上增加益精利浊法治疗,观察比较两组患者疗效、前列腺液中炎症因子水平、美国国立卫生研究院慢性前列腺炎积分指数(National Institute of Health-Chronic Prostatitis Symptom Index,NIH-CPSI)评分以及不良反应发生情况。结果治疗组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后两组NIH-CPSI评分均有显著下降,治疗组更低(P<0.05)。治疗后两组IL-8、IL-1β、TNF-ɑ水平较治疗前有所下降,且治疗组更低(P<0.05)。治疗组与对照组不良反应总发生率分别为12.31%(8/65)与10.77%(7/65),差异无统计学意义(P>0.05)。结论益精利浊法治疗CNP患者疗效较好,能明显改善NIH-CPSI评分,调节炎症因子水平,且安全性较高。

关键词： Renal fibrosis   Sodium butyrate (NaB)   M2 macrophage polarization   IL-4/STAT6 signaling pathway   LKB1  

摘要： Background: Renal fibrosis is a critical pathological characteristic of chronic kidney disease, and current anti- fibrotic therapies has limited efficacy. Sodium butyrate (NaB) has been shown to be highly effective in mitigating bleomycin-induced pulmonary fibrosis;however, its specific impact on renal fibrosis and the underlying mechanisms remain unclear. This study aims to elucidate the role and mechanism of NaB in renal fibrosis by using a mouse model of renal fibrosis induced through Unilateral Ureteral Obstruction (UUO) and folic acid (FA) administration. Results: NaB significantly decreased the distribution of collagen fibers in renal tissues and mitigated fibrosis in a dose-dependent manner. Further analysis indicated that NaB inhibited M2 macrophage polarization in the renal tissues of UUO model mice by blocking the phosphorylation of STAT6, hence reducing renal fibrosis. Additionally, in vitro experiments demonstrated that NaB inhibited fibroblast activation induced by M2 macrophages. Mechanistic studies revealed that NaB attenuates fibroblast activation and M2 macrophage polarization by upregulating LKB1 and inhibiting the activation of the STAT6 signaling pathway. Conclusion: NaB may exert its effects by inhibiting the activation of the IL-4/STAT6 signaling pathway through the upregulation of LKB1, which suppress the polarization of M2 macrophages and consequently reduce renal fibrosis. These findings establish a theoretical foundation for NaB as a novel drug candidate for renal fibrosis and indicate its potential applicability in clinical treatments for this condition.