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关键词： 柔嫩艾美耳球虫   GAM56   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 为研究柔嫩艾美耳球虫GAM56蛋白的生物学功能,以柔嫩艾美耳球虫广东株配子体cDNA为模板,克隆该分离虫株的gam56基因编码序列。构建pET⁃B2M⁃GAM56截短表达载体,利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达GAM56蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备GAM56多克隆抗体。通过间接ELISA和Western blot分析抗体的效价和特异性;收集***(GD)配子体阶段样品,利用GAM56多克隆抗体进行免疫荧光检测以评价其应用效果。结果显示:相比***(Houghton)参考虫株,***(GD)的gam56基因存在末端部分片段的缺失,CDS序列1077 bp,可编码358个氨基酸;预测蛋白大小41.3 kDa。GAM56保守区域截短原核表达蛋白主要以包涵体形式存在。间接免疫荧光分析显示该抗体能够特异性识别配子体阶段的GAM56蛋白。该研究为进一步解析柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56生物学功能提供了材料,为艾美耳球虫有性发育相关蛋白的功能研究与机制解析奠定基础。

关键词： 宫颈鳞癌   白介素-32   miR-141-5p   血小板衍生生长因子受体α  

摘要： 目的探究IL-32在宫颈癌发生发展中的作用及相关分子机制。方法采用基因干扰和构建过表达质粒法分别敲低和过表达宫颈癌细胞中IL-32水平,采用CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell小室实验检测细胞侵袭;采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中IL-32、miR-141-5p及血小板衍生生长因子受体α(PDGFRA)基因表达水平;免疫组织化学法检测组织中IL-32蛋白表达水平;采用生物信息学法预测miR-141-5p和PDGFRA的靶基因关系。结果与癌旁组织或者正常宫颈上皮细胞系HCerEpiC相比较,宫颈鳞癌组织和宫颈癌细胞系(SiHa及HeLa)IL-32水平均显著上升(P<0.05)。在SiHa细胞中,敲低IL-32能够显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。在SiHa细胞中,敲低或过表达IL-32能够显著提高或减少miR-141-5p的表达(P<0.05)。敲低miR-141-5p也能够明显抑制SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。生物信息学方法预测PDGFRA是miR-141-5p的靶基因。IL-32和miR-141-5p均能够反向调控PDGFRA的表达(P<0.05)。结论IL-32在宫颈鳞癌中显著高表达,可能通过调控miR-141-5p/PDGFRA的表达提高癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进宫颈鳞癌的进展。

关键词： 肿瘤   腔内近距离放疗   新辅助放化疗   直肠腺癌   免疫功能   营养   淋巴细胞   淋巴细胞亚群  

摘要： 目的探讨局部晚期直肠腺癌腔内近距离放射治疗对患者的免疫功能和营养指标的影响。方法纳入2016年5月至2024年7月武汉大学中南医院肿瘤科收治的89例局部晚期直肠腺癌患者。根据治疗方式分为研究组(腔内近距离放射治疗联合新辅助放化疗,33例)和对照组(新辅助放化疗,56例)。收集治疗前1周和放射治疗(简称放疗)结束后1个月的外周血淋巴细胞及其亚群计数、白蛋白和总蛋白水平。比较不同治疗方式对营养指标(白蛋白和总蛋白)和免疫功能(淋巴细胞及其亚群)的影响。采用多元线性回归分析放疗结束后1个月淋巴细胞及其亚群的影响因素。结果研究组和对照组在治疗前1周、放疗结束后1个月白蛋白和总蛋白水平差异无统计学意义。放疗结束后1个月研究组淋巴细胞、CD8+T细胞计数均高于对照组。同样,病理完全缓解(pCR)患者放疗结束后1个月淋巴细胞、CD8+T细胞绝对值计数高于非pCR患者。不同治疗方式是放疗结束后1个月淋巴细胞、CD8+T细胞计数的独立影响因素。结论与新辅助放化疗相比,联合腔内近距离放射治疗更有利于增加放疗结束后1个月淋巴细胞、CD8+T细胞数量,改善免疫功能同时不增加局部晚期直肠腺癌患者营养不良的风险。

关键词： 慢阻肺   急性加重   降钙素原   白细胞介素6   病情进展  

摘要： 目的:分析血清降钙素原(Procalcitonin,PCT)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)与慢阻肺急性加重期(Acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者病情的相关性.方法:选取2022年6月至2023年12月期间本院呼吸内科诊疗的86例AECOPD患者作为研究对象.根据患者持续治疗14 d后的病情进展情况,将其分为进展组(14例)与未进展组(72例).收集并比较两组的基线资料及实验室指标水平.分析血清PCT、IL-6水平与AECOPD患者病情进展的相关性.分析血清PCT、IL-6与AECOPD患者病情进展风险的非线性剂量-反应关系.结果:进展组和未进展组的年龄、性别、慢阻肺病程、PaO2、呼吸频次、白细胞计数、中性粒细胞计数、急性加重史各项基线资料比较均无显著差异(P>0.05).但进展组患者入院时的血清PCT、IL-6水平均显著高于未进展组(P>0.05).构建Logistic回归模型,结果显示,AECOPD患者病情进展可能与入组时血清PCT、IL-6水平异常有关(P<0.05).限制性立方体条模型分析结果显示,AECOPD患者病情进展风险与入院时血清PCT、IL-6水平之间呈非线性剂量-反应关系(P<0.05),患者入院时血清PCT>1.12ng·mL^(-1),IL-6>4.40 ng·L^(-1)时,其病情进展风险随二者水平的升高而增加.结论:AECOPD患者住院治疗期间有病情进展风险,可能与入院时血清PCT、IL-6异常高水平有关,随着二者水平的升高,患者疾病进展风险增加.

关键词： 过敏性哮喘   血清免疫球蛋白E   免疫球蛋白G亚型4、白细胞介素-17   白细胞介素-10  

摘要： 目的探究血清免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白G亚型4(IgG4)、白细胞介素(IL)-17及IL-10在过敏性哮喘患者中的表达及分析。方法选取2023年1—6月本院收治的过敏性哮喘患者83例临床资料开展回顾性分析,另选取本院同期体检健康者40例临床资料为对照组,比较两组血清IgE、IgG4、IL-17及IL-10水平的差异,并通过受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IgE、IgG4、IL-17及IL-10诊断过敏性哮喘效能;按病情严重程度将研究组患者分为轻度组37例、中度组25例、重度组21例,比较不同严重程度过敏性哮喘患者血清IgE、IgG4、IL-17及IL-10水平的差异,并分析血清IgE、IgG4、IL-17、IL-10与病情严重程度及指标间相关性。结果研究组IgE、IgG4、IL-17高于对照组;IL-10低于对照组(P<0.05)。采用ROC分析获取IgE、IgG4、IL-17及IL-10诊断过敏性哮喘的曲线下面积(AUC)分别为0.807、0.808、0.721、0.820,联合数据诊断过敏性哮喘的AUC为0.933。各组血清IgE、IgG4、IL-17及IL-10比较差异存在统计学意义(F=32.804、32.775、15.726、27.933,P>0.05),重度组IgE、IgG4、IL-17>中度组>轻度组;重度组IL-10<中度组<轻度组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,血清IgE、IgG4、IL-17均与严重程度呈正相关,IL-10与严重程度呈负相关(r=0.693、0.661、0.524、-0.712,P<0.05),且IgE、IgG4均与IL-17均呈正相关,与IL-10均呈负相关(r=0.612、0.617、-0.279、-0.273,P<0.05)。结论血清IgE、IgG4、IL-17在过敏性哮喘患者中高表达,IL-10水平低表达,均可作为诊断过敏性哮喘有效指标,联合诊断效能更好,且与病情程度相关密切,可用于临床病情评估。

关键词： 结肠炎   溃疡性   健脾化滞汤   肠道菌群   白细胞介素-23   白细胞介素-12   Toll样受体4   二胺氧化酶   D-乳酸  

摘要： 目的探究健脾化滞汤辅助西药治疗溃疡性结肠炎(UC)的临床效果及对肠道菌群、血清白细胞介素-23(IL-23)、白细胞介素-12(IL-12)、Toll样受体4(TLR4)水平的影响。方法选取2022年5月至2024年5月收治的UC患者171例,按照随机数字表法分为联合组、西药组、中药组,各57例。西药组给予美沙拉嗪肠溶片治疗,中药组采用健脾化滞汤治疗,联合组采用健脾化滞汤联合美沙拉嗪肠溶片治疗,均治疗2个月。比较3组临床疗效、不良反应及治疗前后中医证候积分、肠镜评分(Baron评分)、疾病活动指数(Mayo评分)、黏膜组织评分(Geboes指数)、肠黏膜屏障功能、肠道菌群、血清因子水平。结果联合组总有效率为[92.98%(53/57)]高于中药组[77.19%(44/57)]、西药组[78.95%(45/57)],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,联合组大便稀溏、黏液脓血便、神疲乏力、腹痛、纳差评分及Baron评分、Mayo评分、Geboes指数评分均低于中药组、西药组(P<0.05)。治疗后,联合组血清内毒素脂多糖、二胺氧化酶、D-乳酸水平及IL-23、IL-12水平均低于中药组、西药组(P<0.05)。治疗后,联合组肠杆菌、肠球菌数量均低于中药组、西药组,双歧杆菌、乳酸杆菌数量高于中药组、西药组(P<0.05)。3组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论健脾化滞汤辅助西药治疗UC患者可提高临床疗效,且具有一定安全性。

关键词： 结核性胸腔积液   恶性胸腔积液   白细胞介素-27   腺苷脱氨酶   诊断  

摘要： 目的:探讨白细胞介素-27(IL-27)、腺苷脱氨酶(ADA)在结核性胸腔积液(TPE)中的诊断价值。方法:选取义乌市中心医院2021年10月至2024年2月收治的150例胸腔积液患者为研究对象,其中82例患者确诊为TPE,纳入TPE组,68例为恶性胸腔积液,纳入非TPE组,比较两组胸腔积液IL-27、ADA水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析IL-27、ADA单独及联合诊断TPE的价值,并分析IL-27与ADA水平的相关性。结果:TPE组胸腔积液IL-27、ADA水平均高于非TPE组(P<0.05);ROC曲线显示,胸腔积液IL-27、ADA水平诊断TPE的最佳截断值分别为337.46 ng/L、36.14 U/L,联合检测诊断TPE的ROC曲线下面积(AUC)为0.976,敏感度、特异度分别为97.60%、85.30%;Pearson相关性分析显示,胸腔积液IL-27与ADA水平呈正相关性(r=0.366,P<0.05)。结论:胸腔积液IL-27、ADA水平可作为TPE与恶性胸腔积液的鉴别诊断指标,联合检测具有较高的诊断效能。

关键词： 免疫功能   消化道肿瘤   CD4 T淋巴细胞   CD8 T淋巴细胞   ATP释放试验  

摘要： 目的探讨CD4,CD8 T淋巴细胞ATP释放试验对消化道肿瘤患者细胞免疫功能评估的意义。方法收集2023~2024年南部战区总医院肿瘤科及放疗科51例消化道肿瘤患者作为研究组,2018~2020年间该院体检中心51例健康体检者作为对照组,进行白细胞、淋巴细胞、CD4,CD8 T淋巴细胞计数,检测植物血凝素(PHA)刺激前后CD4,CD8 T淋巴细胞ATP释放水平。结果研究组淋巴细胞计数[1.45(1.12,1.75)×10^(9)/L]及CD8 T淋巴细胞计数[357.00(232.13,451.35)个/µl]低于对照组[2.04(1.74,2.27)×10^(9)/L,454.36(368.00,566.10)个/µl],差异具有统计学意义(Z=-4.719,-3.209,均P<0.05)。PHA刺激后研究组CD4 T淋巴细胞ATP释放水平低于对照组(Z=-2.181);研究组PHA刺激前、后CD8 T淋巴细胞ATP释放水平均低于对照组(Z=-3.314,-3.462),差异具有统计学意义(均P<0.05)。研究组CD4 T淋巴细胞ATP释放值与CD4 T淋巴细胞计数无相关性(r=0.617,P=0.093);对照组CD4 T淋巴细胞释放值与CD4 T淋巴细胞计数存在正相关(r=0.276,P=0.049)。研究组CD8 T淋巴细胞释放值与CD8 T淋巴细胞计数无相关性(r=0.033,P=0.816),对照组淋巴细胞释放值与CD8 T淋巴细胞计数存在正相关(r=0.278,P=0.048)。结论CD4,CD8 T淋巴细胞ATP释放试验可作为一种细胞免疫动态功能评价的方法,与静态细胞计数结合可更全面地对消化道肿瘤患者细胞免疫功能进行评估。

关键词： 念珠菌血症   抗原抗体检测   甘露聚糖   诊断价值  

摘要： 目的探讨血清甘露聚糖抗原及抗体检测对念珠菌血症患者的诊断价值。方法选取2016年11月1日至2017年10月1日该院念珠菌血培养阳性并确诊为念珠菌血症的19例住院患者作为念珠菌血症组,细菌血培养阳性并确诊为细菌性血流感染的17例住院患者和20例体检健康者作为非念珠菌血症组。收集血清标本270份,其中念珠菌血症组159份,非念珠菌血症组111份(细菌血流51份、健康体检60份)。分别进行念珠菌甘露聚糖抗原、甘露聚糖抗体IgG和甘露聚糖抗体IgM的检测,评估三者单独及联合诊断的诊断效能,同时监测念珠菌血症组治疗期间甘露聚糖抗原及甘露聚糖抗体IgG、甘露聚糖抗体IgM浓度变化,评估治疗疗效价值。结果甘露聚糖抗原实验的灵敏度84.21%,特异度81.08%,曲线下面积(AUC)0.826;甘露聚糖抗原和抗体IgG实验同时进行检测其特异度最高(94.59%)。随访监测5例病例,甘露聚糖抗原、抗体IgG、抗体IgM浓度变化未随着治疗时间窗延长而有相应的浓度减少或增加趋势。结论甘露聚糖抗原及抗体在动态监测及疗效评估上无相关性。