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关键词： 神经元特异性烯醇化酶   超敏C反应蛋白   白细胞介素-6   丁苯酞   急性脑梗死  

摘要： 目的分析基线神经元特异性烯醇化酶(NSE)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)及其变化值预测丁苯酞辅助治疗急性脑梗死患者预后的价值。方法选取2021年1月至2024年1月宿州市中医医院脑病科150例急性脑梗死患者,按治疗方法分为观察组80例和对照组70例。对照组接受基础治疗,观察组在此基础上加用丁苯酞,两组均治疗14天。对比两组治疗前后NSE、hs-CRP、IL-6指标。将观察组患者随访3个月的预后分为良好组和不良组,通过单因素和多因素logistic回归分析影响丁苯酞辅助治疗预后的相关因素,利用ROC曲线分析NSE、hs-CRP、IL-6及指标变化量(^(△)NSE、^(△)hs-CRP、^(△)IL-6)对预后的预测价值。结果两组治疗后NSE、hs-CRP、IL-6水平均下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。单因素分析表明,NSE、hs-CRP、IL-6、^(△)NSE、^(△)hs-CRP、^(△)IL-6及高血压是预后不良危险因素(P<0.05);多因素logistic回归显示,NSE、hs-CRP、IL-6、^(△)NSE、^(△)hs-CRP、^(△)IL-6为独立危险因素(P<0.05)。ROC分析中,NSE、hs-CRP、IL-6、^(△)NSE、^(△)hs-CRP、^(△)IL-6及联合检测的AUC分别为0.754、0.833、0.746、0.736、0.904、0.733和0.965(P<0.05)。结论丁苯酞辅助治疗可改善急性脑梗死患者的NSE、hs-CRP、IL-6,且基线NSE、hs-CRP、IL-6及其变化值对丁苯酞辅助治疗急性脑梗死患者预后具有较高的预测价值。

关键词： IHNV   G蛋白   原核表达载体   多克隆抗体  

摘要： 针对由传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)引发的鱼类重大传染病,通过原核表达系统制备IHNV关键抗原G蛋白,可开发其特异性多克隆抗体。本文利用基因工程技术构建了重组质粒pET-28a-G,转化至大肠杆菌Top10感受态细胞,经IPTG诱导后获得IHNV G蛋白;再对该蛋白用盐酸胍复性后采用镍柱亲和层析法进行纯化,纯化的蛋白与弗氏佐剂混合免疫小鼠;最后采用间接ELISA法检测抗体效价及Western blot验证抗体特异性。结果表明:通过基因工程可成功构建pET-28a-G原核表达质粒,获得的IHNV G蛋白在大肠杆菌中能成功表达,大小52.51 kDa;纯化的IHNV G蛋白与弗氏佐剂混合免疫小鼠4次后,可制备出多克隆抗体,抗体效价达到1∶128000,且能特异性识别IHNV G重组蛋白。研究结果表明,原核表达的IHNV G重组蛋白具有较强的免疫原性,可诱导小鼠产生较高效价的抗体,制备的多克隆抗体具有良好的反应性和特异性,为后续胶体金检测方法的开发、G单克隆抗体制备、疫苗研制等奠定基础。

关键词： 免疫球蛋白轻链   肾功能不全   抗体,单克隆   单克隆免疫球蛋白沉积病   达雷妥尤单抗  

摘要： 目的评估达雷妥尤单抗治疗单克隆免疫球蛋白沉积病(monoclonal immunoglobulin deposition diseases,MIDD)肾损害患者的疗效及安全性。方法该研究为病例系列分析研究,纳入2021年12月至2023年10月在上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏内科开始接受达雷妥尤单抗治疗的MIDD肾损害患者作为研究对象,收集其确诊时及随访期间的临床资料,评估其血液学、肾脏疗效,并记录不良反应事件。结果该研究共纳入7例MIDD患者,男女比例为5∶2,年龄为46(43,52)岁,1例为轻-重链沉积病,余6例为轻链沉积病。5例为经治患者(一线与二线治疗为环磷酰胺、硼替佐米、地塞米松方案),2例为初治患者,其中1例确诊时已开始血液透析。接受达雷妥尤单抗治疗前,7例患者血清游离轻链差值(difference of serum free light chain,dFLC)为52(7,295)mg/L;除1例透析患者外,余6例24 h尿蛋白量为1.1(0.2,4.7)g,血肌酐为178.5(157.8,279.8)μmol/L,估算肾小球滤过率为33.9(24.2,41.1)ml·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)。患者接受达雷妥尤单抗的治疗剂量为17(10,20)次,治疗时间为17(9,23)个月,随访时间为24(13,32)个月。治疗后,5例经治患者中,1例基线dFLC<20 mg/L复查骨髓微小残余病灶阴性,余4例达到或优于完全缓解;肾脏疗效评估中,除1例为部分缓解外,余4例均达到或优于非常好的部分缓解(very good partial response,VGPR);2例初治患者中,血液学疗效均达到或优于VGPR,1例肾脏疗效达完全缓解,另1例依赖透析。7例患者dFLC为4.9(2.1,11.5)mg/L,其中6例非透析患者24 h尿蛋白量为0.19(0.06,0.42)g,血肌酐为153.0(120.8,188.0)μmol/L,估算肾小球滤过率为40.4(35.2,57.3)ml·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)。达雷妥尤单抗治疗期间,无严重不良反应发生。结论达雷妥尤单抗用于治疗MIDD肾损害患者具有良好的疗效和安全性。所有患者均获得高质量血液学缓解,肾脏达到或优于VGPR的缓解率较高,肾功能改善。

关键词： 血小板计数   纤维蛋白原   中性粒细胞/淋巴细胞比值   恶性肿瘤   肿瘤分期   相关性  

摘要： 目的探讨恶性肿瘤患者血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(FIB)及中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与肿瘤分期的关系。方法收集134例恶性肿瘤患者的临床资料,依据TNM分期情况分为Ⅰ~Ⅱ期组(n=69)和Ⅲ~Ⅳ期组(n=65)。比较不同肿瘤分期恶性肿瘤患者的PLT、FIB、NLR水平;采用Spearman相关性检验分析PLT、FIB、NLR水平与肿瘤分期的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,以曲线下面积(AUC)评价PLT、FIB、NLR对肿瘤分期的诊断效能。结果Ⅲ~Ⅳ期组恶性肿瘤患者PLT、FIB、NLR水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ期组,差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关性检验结果显示,PLT、FIB、NLR水平与恶性肿瘤患者TNM分期均呈正相关(P<0.01)。ROC曲线显示,PLT、FIB、NLR诊断恶性肿瘤患者TNM分期的AUC分别为0.727、0.756、0.791。结论PLT、FIB、NLR水平与恶性肿瘤患者凝血纤溶系统异常及生理病理状态密切相关,这些指标可作为诊断肿瘤分期的生物学标志物。

关键词： 清肺化痰汤   阿奇霉素   小儿支原体肺炎   痰热壅肺证   炎症反应   肺功能  

摘要： 目的观察清肺化痰汤联合阿奇霉素治疗痰热壅肺证小儿支原体肺炎的临床疗效及对其白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、降钙素原(Procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平的影响。方法选取2023年1月—2024年9月保定市第一中心医院收治的96例支原体肺炎患儿,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各48例。两组患儿均给予阿奇霉素序贯疗法,在此基础上,观察组联合清肺化痰汤治疗,均连续治疗10 d。观察比较两组患儿的临床疗效、临床指标缓解时间、不良反应情况,治疗前后中医证候积分、炎症因子(IL-6、PCT、CRP)水平、肺功能指标[第1秒用力呼气容积(Forced expiratory volume in the first second,FEV1)、呼吸气流量分值(Peak expiratory flow,PEF)、用力肺活量(Forced vital capacity,FVC)]。结果治疗后两组患儿咳嗽、壮热烦躁、喘促气急、痰稠色黄积分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组中医证候积分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组咳嗽消失时间、炎症消失时间、啰音消失时间、高烧消退时间均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患儿FEV1、PEF、FVC指标均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组FEV1、PEF、FVC指标均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患儿血清IL-6、CRP、PCT水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组血清IL-6、CRP、PCT水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组临床总有效率95.83%(46/48)明显高于对照组77.08%(37/48),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,观察组不良反应发生率8.33%(4/48)明显低于对照组25.00%(12/48),差异有统计学意义(P<0.05)。结论清肺化痰汤联合阿奇霉素能够抑制痰热壅肺证支原体肺炎患儿体内炎症反应,缓解临床症状,改善肺功能,缩短疾病康复时间。

关键词： 聚乙二醇   补体   不规则抗体检测  

摘要： 目的:探讨去除补体对聚乙二醇-微柱凝胶法(PEG-MGT)检测弱抗体试验干扰影响,简化试验受限条件。方法:选取实验室保存的人源IgG型抗体血清5例,抗-D、抗-E、抗-Jka、抗-Jkb、抗-Fyb各1例,用新鲜的AB型血清稀释以上抗体测效价,以效价的稀释度配制模拟弱同种抗体的血清标本。试验血清分为2组,未处理组和56℃孵育30min处理组,比较2组血清在PEG-MGT(抗-IgG+C3d)中抗体反应格局和试验结果,同时用传统的PEG-IAT(试管法+抗-IgG)做对照。并用此处理方法检测2023年血站输血研究室在低离子强度盐溶液-微柱凝胶法(LISS-MGT)中凝集弱(排除IgM型抗体)造成不规则抗体鉴定结果不明确的15例标本。结果:①PEG-MGT法(抗-IgG+C3d)中,未处理血清与谱细胞有泛反应,而处理组血清均能检出相应的抗体;对照PEG-IAT(试管法+抗-IgG)中,未处理的血清均能检出以上抗体。②15例临床标本中检出2例抗-E,1例抗-C,1例抗-e,1例抗-D,4例抗-Fyb,1例抗-Jka,1例抗-Jkb,4例未知抗体。结论:56℃孵育30min灭活补体后可有效去除补体对PEG-MGT法(抗-IgG+C3d)中血型血清学干扰,在基层未配备微柱凝胶卡(抗-IgG)的情况下仍可有效开展PEG-MGT,提高抗体的检出效率及交叉配血的灵敏度,保障输血安全。

关键词： Vialinin A   肝癌   耐药   HepG2/ADM细胞   TNF-α/TRAF6/NF-κB信号通路  

摘要： 目的探究Vialinin A对肝癌耐药细胞HepG2/ADM生长的抑制作用。方法CCK-8法筛选Vialinin A干预浓度,同时检测阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂、长春新碱的抑制作用。将HepG2/ADM细胞分为对照组和Vialinin A 20、30、40μmol/L组,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,RT-qPCR法检测细胞BCRP、MDR1、MRP1 mRNA表达,Western blot法检测细胞BCRP、MDR1、MRP1、TNF-α、TRAF6、TAK1、NF-κB p65、cleaved-Caspase-3蛋白表达。同时验证TNF-α对Vialinin A的逆转作用。结果Vialinin A可以抑制HepG2/ADM细胞增殖活力,IC50值为(31.52±2.76)μmol/L。与对照组比较,Vialinin A 20、30、40μmol/L组HepG2/ADM细胞凋亡率升高(P<0.01),细胞周期阻滞在G_(2)/M期,BCRP、MDR1、MRP1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);Vialinin A 30、40μmol/L组细胞TNF-α、TRAF6、TAK1、NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01),cleaved-Caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),并呈浓度依赖性。使用10 ng/mL TNF-α处理细胞48 h后可以有效逆转30μmol/L Vialinin A的作用。结论Vialinin A对HepG2/ADM细胞生长的抑制作用可能与抑制耐药基因表达和TNF-α/TRAF6/NF-κB信号通路有关。

关键词： rheumatoid arthritis ra   autoantigenic peptide landscape   autoimmune disorder   HLA DRB   rheumatoid arthritis   synovial joint damage   HLA class II  

摘要： Rheumatoid arthritis(RA)is an autoimmune disorder char-acterized by synovial joint damage and progressive loss of *** human leukocyte antigen(HLA)classⅡalleles HLA-DRB1^(*)01:01 and HLA-DRB1^(*)04:01 are strongly linked to RA susceptibility.

关键词： 缺氧缺血性脑病   患儿   高压氧   肿瘤坏死因子⁃α   白介素⁃6   D⁃二聚体   预后   预测价值  

摘要： 目的探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及D-二聚体(D-D)水平对高压氧综合治疗缺氧缺血性脑病(HIE)患儿预后的预测价值。方法回顾性分析2020年1月至2023年12月东营市人民医院儿科收治、均予以高压氧综合治疗的92例HIE患儿的临床资料,按照治疗效果分为预后良好组(n=64)和预后不佳组(n=28)。收集2组患儿的临床资料,采用酶联免疫吸附法测定血清TNF-α、IL-6、D-D水平。采用非条件单因素和多因素Logistic回归分析患儿预后不佳的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估HIE患儿血清TNF-α、IL-6、D-D水平对HIE患儿预后的预测价值。结果预后不佳组患儿出生Apgar评分明显低于预后良好组,临床重度百分比及血清TNF-α、IL-6、D-D水平均明显高于预后良好组(均P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,Apgar评分(95%CI:0.036~0.292)、临床分度(95%CI:3.649~28.351)、TNF-α(95%CI:2.816~24.108)、IL-6(95%CI:2.143~14.381)、D-D(95%CI:1.045~1.110)均为患儿预后不佳的危险因素(P<0.05或P<0.01)。ROC曲线评估显示,TNF-α、IL-6、D-D三者联合预测患儿预后的ROC曲线下面积(AUC)值和敏感度均明显高于TNF-α、IL-6、D-D的单项预测(P<0.05)。结论高压氧综合治疗后,预后良好组HIE患儿血清TNF-α、IL-6、D-D水平均明显低于预后不良组,三者联合应用能较好地预测HIE患儿预后。

关键词： 艾滋病   T淋巴细胞亚群   流式细胞仪   方法学比较  

摘要： 目的评估国产全自动T淋巴细胞前处理系统(A系统)对全血前处理样本制备的技术性能及其与进口设备的等效性。方法采用配对实验设计,收集2022年2-8月泉州市HIV-1感染者EDTA抗凝全血样本。通过双盲平行处理流程,分别采用BD FACS Sample Prep AssistantⅢ系统(B系统)和A系统完成样本制备,采用BD FACS CantoⅡ流式细胞仪检测CD45、CD3、CD4和CD8细胞绝对值计数和百分比。数据分析采用:Shapiro-Wilk正态性检验;配对t检验(正态数据)或Wilcoxon符号秩检验(非正态数据);Bland-Altman分析(CD4细胞预设实验允许误差±50个/μL)和组内相关系数(ICC)评估系统间一致性。结果47份样本中,男性占比87.23%(41人),20~<60岁占89.36%(42人)。检测结果显示:A系统各指标检测结果与B系统在CD45细胞(Z=-2.55,P=0.01)、CD3细胞(Z=-2.42,P=0.02)、CD4细胞(t=2.70,P=0.01)和CD8细胞(Z=-3.26,P=0.001)差异有统计学意义;Bland-Altman分析显示:A系统各指标检测结果普遍高于B系统,CD45细胞检出3例异常值(6.38%);CD3细胞在高值区(>1000个/μL)存在系统误差;CD4细胞95%LoA(-86.5~+144.5个/μL)跨越临床允许阈值;CD8细胞高值区(>1500个/μL)存在显著正向偏移;ICC分析表明系统间一致性水平为:CD3细胞(ICC=0.98)>CD8细胞(ICC=0.97)>CD45细胞(ICC=0.96)>CD4细胞(ICC=0.94)(均P<0.001)。结论国产A系统在全血前处理样本制备性能与B系统具有良好等效性,但存在系统性正偏差,可能影响CD4细胞绝对值计数作为HIV-1免疫分期准确性,建议优化样本处理程序纠正检测结果偏差。