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关键词： 新布尼亚病毒   Gn蛋白   蛋白表达纯化   单克隆抗体  

摘要： 目的:制备并鉴定针对新布尼亚病毒(SFTSV)JS2012-70株N端糖蛋白(Gn)的单克隆抗体,为深入研究SFTSV的致病机制和开发检测及治疗策略提供工具。方法:通过生物信息学分析Gn蛋白的免疫原性,去除跨膜域后构建pET-28a(+)-Gn重组表达载体,利用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达Gn蛋白并通过镍离子亲和层析柱纯化。将纯化后的Gn蛋白用于免疫Balb/c雌性小鼠,采用杂交瘤技术和亚克隆技术筛选稳定分泌抗Gn蛋白单克隆抗体的细胞株,并通过蛋白质印迹法(Western blot)验证抗体的特异性。结果:Gn蛋白包含多个抗原表位,去除跨膜域后蛋白的三维结构未发生显著改变。成功表达并纯化Gn重组蛋白,浓度为0.5 mg/mL。筛选出四株稳定分泌抗Gn蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2C3,2F6,5E9,6C8),其腹水效价均高于1∶409600,均为IgG1/Kappa型,并能够特异性识别Gn重组蛋白及SFTSV病毒液。结论:成功制备了针对SFTSV Gn蛋白的高效价单克隆抗体,为进一步探索SFTSV的致病机制、开发检测方法和治疗策略奠定了基础。

关键词： 副猪嗜血杆菌   树突状细胞   细胞因子   PLGA   表面分子  

摘要： 将小鼠骨髓源树突状细胞(DCs)分别与副猪嗜血杆菌的Omp16蛋白、载Omp16的PLGA微球(PLGA-Omp16微球)以及LPS进行24 h共培养后,收集细胞提取RNA,用qPCR方法检测DCs细胞因子(IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ、CCL2和CXCL10)和表面标志物(MHC-II、CD80和CD86)mRNA的转录水平。结果显示,与各组抗原共培养24 h后,DCs细胞因子和表面标志物的mRNA转录水平显著高于PBS组(P<0.01);PLGA-Omp16微球组的TNF-α、IL-1β、CCL2、CXCL10、MHC-II、CD80和CD86等免疫分子mRNA转录水平显著高于Omp16组(P<0.05)。结果表明,PLGA-Omp16微球可增进DCs细胞因子转录水平,促进DCs的成熟。

关键词： 主要组织相容性复合体   肿瘤免疫   器官移植免疫   免疫逃逸   免疫耐受   排斥反应   抗原提呈细胞   树突状细胞  

摘要： 主要组织相容性复合体在免疫应答过程中扮演着重要角色,与肿瘤的发生发展和器官移植密切相关。细胞免疫在肿瘤免疫和器官移植免疫中占据重要地位,体液免疫在器官移植免疫中的作用同样不可忽视。器官移植需要诱导和维持免疫耐受,而肿瘤发展过程中会产生免疫逃逸现象。深入探讨和比较肿瘤免疫逃逸与器官移植免疫耐受的机制,对于制定合理的免疫耐受诱导策略、提高器官移植患者的生存质量及延长存活时间具有重要意义。

关键词： 盐酸羟甲唑啉喷雾剂   克拉霉素   慢性鼻窦炎  

摘要： 探讨盐酸羟甲唑啉喷雾剂联合克拉霉素对慢性鼻窦炎TNF-α、IL-8等的影响。方法 将我院2023年7月-2024年7月收治的100例慢性鼻窦炎患者按照抽签法分为对照组和实验组,各50例,分别给予克拉霉素治疗和盐酸羟甲唑啉喷雾剂联合克拉霉素治疗,对比两组临床效果。结果 治疗后,实验组各项临床症状评分、炎性因子水平以及复发率比对照组低(P<0.05)。结论 针对慢性鼻窦炎患者的症状缓解及炎性因子水平优化,采用盐酸羟甲唑啉喷雾剂联合克拉霉素治疗的效果显著。

关键词： 活血化瘀   当归-红花药对   银屑病   网络药理学   分子对接  

摘要： 目的运用网络药理学及分子对接技术,探讨活血化瘀药对当归-红花治疗银屑病的有效成分及分子作用机制。方法挖掘文献并检索TCMSP数据库,获取当归-红花药对的活性成分及作用靶点,使用TCMSP、OMIM和GeneCards等数据库检索收集银屑病相关靶点。Cytoscape软件构建“中药-活性成分-靶点”网络。E Venn平台取交集靶点后导入STRING数据库获得蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,Cytoscape 3.9.1软件分析筛选获得核心靶点。DAVID在线分析平台对交集靶点进行基因本体(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析。AutoDock Vina软件将核心成分槲皮素等与关键靶蛋白肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-17A进行分子对接。结果“中药-活性成分-靶点”网络中有槲皮素等18个活性成分和205个靶点,将205个药物靶点与659个疾病靶点取交集后获得59个交集靶点。交集靶点主要富集于IL-17信号通路、TNF信号通路和辅助性T细胞17(Th17)等信号通路,涉及炎性反应和血管内皮生长因子(VEGF)产生的正调节等367个生物过程,参与69个分子功能,主要富集于29个细胞组成部分。分子对接结果显示,核心成分槲皮素等与关键靶蛋白TNF、IL-6和IL-17A均可以相互结合,且结合能<-2 kcal/mol。结论初步表明当归-红花药对参与银屑病治疗的分子作用机制,为活血化瘀药治疗银屑病的机制研究提供理论参考。

关键词： 急性支气管炎   黄龙止咳颗粒   孟鲁司特钠   炎性因子   肺功能   免疫球蛋白  

摘要： 目的:观察黄龙止咳颗粒联合孟鲁司特钠治疗急性支气管炎患儿的效果。方法:选取2021年11月至2023年12月该院收治的154例急性支气管炎患儿进行前瞻性研究,按照随机数字表法将其分为对照组与研究组各77例。对照组采用孟鲁司特钠治疗,研究组在对照组基础上联合黄龙止咳颗粒治疗。比较两组临床症状(鼻塞流涕、咳嗽、喘息、咳痰)消失时间,治疗前后肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF)]水平、免疫球蛋白(Ig)指标(Ig A、Ig G、Ig M)水平、炎性因子[降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)]水平和不良反应发生率。结果:研究组鼻塞流涕、咳嗽、喘息、咳痰等临床症状消失时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组FEV_(1)、FVC、PEF水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组Ig A、Ig G、Ig M水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组PCT、TNF-α、IL-4、IL-17水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄龙止咳颗粒联合孟鲁司特钠治疗急性支气管炎患儿可提高肺功能指标和Ig指标水平,缩短临床症状消失时间,以及降低炎性因子水平的效果优于单纯孟鲁司特钠治疗。

关键词： 结直肠肿瘤   中性白细胞   淋巴细胞   血小板   纤维蛋白原   前白蛋白   危险因素   模型,统计学  

摘要： 目的构建基于炎症、营养复合指标的早期结直肠癌诊断模型,并评估该模型的预测价值。方法将2019年1月—2021年4月于青岛大学附属医院行结肠镜检查并治疗的患者作为训练集,根据病变不同分为早期结直肠癌组(106例)和癌前病变组(244例);将2021年5—10月于青岛大学附属医院行结肠镜检查并治疗的患者作为验证集,分为早期结直肠癌组(22例)和癌前病变组(30例)。收集并比较训练集两组患者的临床特征、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、单核细胞/淋巴细胞比值(MLR)、纤维蛋白原/前白蛋白比值(FPR)、纤维蛋白原/白蛋白比值(FAR)及预后营养指数(PNI),分析影响早期结直肠癌发生的独立危险因素。构建早期结直肠癌的诊断模型,使用受试者工作特征(ROC)曲线评估模型的诊断效能,使用Hosmer-Lemeshow检验评估模型拟合度,并将模型应用于验证集进行验证。结果训练集中早期结直肠癌组患者NLR、PLR、MLR、FPR显著高于癌前病变组(Z=-5.269~-2.917,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,NLR>1.71、PLR>169.47、FPR>11.25均为影响早期结直肠癌发生的独立危险因素(P<0.05)。构建的诊断模型诊断训练集早期结直肠癌患者的ROC曲线下面积(AUC)为0.697,Hosmer-Lemeshow检验提示模型拟合度良好(P>0.05);诊断模型诊断验证集早期结直肠癌患者的AUC为0.727,Hosmer-Lemeshow检验提示模型拟合度良好(P>0.05)。结论NLR>1.71、PLR>169.47、FPR>11.25是影响早期结直肠癌发生的独立危险因素,基于NLR、PLR、FPR构建的早期结直肠癌诊断模型具有较高预测价值。

关键词： 甲状腺相关眼病   格雷夫斯眼病   自身抗体   T淋巴细胞  

摘要： 甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)是一种渐进性眼部疾病,其特征是免疫介导的眼外肌和眼眶结缔组织炎症。TAO症状体征复杂多样,具有多样性和隐匿性的特点,严重影响患者生活质量,其发病机制与甲状腺自身免疫关系密切。该文就TAO的发病机制、临床特征、疾病治疗方面对TAO作简要概述。

关键词： 槲皮素   宫颈炎   阴道微生态   细胞因子   磷脂酰肌醇3激酶   蛋白激酶B  

摘要： 目的 探讨槲皮素对宫颈炎大鼠阴道微生态、局部细胞因子及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)蛋白的作用机制,为宫颈炎相关用药提供参考依据。方法 60只大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、西药组、槲皮素低剂量、槲皮素中剂量及槲皮素高剂量组,每组10只。除正常组外,其余大鼠均建立宫颈炎大鼠模型,槲皮素低、中、高剂量组大鼠阴道分别注入浓度为35、55、80μmol/L的槲皮素,西药组大鼠注入阴道0.081 g/kg的抗宫颈炎片研磨冲剂,正常组、模型组大鼠阴道注入等量的生理盐水。采用全自动阴道微生态检测仪检测阴道微生态的pH值、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)及乳酸杆菌,采用全自动血细胞计数分析法检测白细胞、中性粒细胞计数,酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠宫颈组织情况,采用免疫印迹法检测PI3K、Akt蛋白表达水平。结果 各组pH值、乳酸杆菌异常比例、SIgA水平、白细胞计数、中性粒细胞计数,IL-1β、IL-6、IL-8水平及PI3K、Akt蛋白表达水平比较结果显示,正常组<槲皮素高剂量组<槲皮素中剂量组<槲皮素低剂量组<模型组,任意2组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。西药组pH值、乳酸杆菌异常比例、SIgA水平、白细胞计数、中性粒细胞计数及血清IL-1β、IL-6、IL-8水平,以及PI3K、Akt蛋白表达水平高于正常组,低于槲皮素中剂量组、槲皮素低剂量组、模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,槲皮素高剂量组、槲皮素中剂量组、槲皮素低剂量组、西药组宫颈评分高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,各组宫颈评分比较结果显示,模型组<槲皮素低剂量组<槲皮素中剂量组<槲皮素高剂量组<正常组,任意2组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。西药组宫颈评分高于模型组、槲皮素低剂量组、槲皮素中剂量组,低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。低、中、高槲皮素组及西药组随着增加药物浓度,宫颈组织炎症细胞的浸润范围及数量减少。结论 槲皮素可通过平衡阴道pH值,降低SIgA及乳酸杆菌水平,维持阴道微生态环境,减少促炎性细胞因子从而改善宫颈炎症状,可能与抑制PI3K、Akt蛋白表达相关。