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关键词： 外感发热药浴方   白细胞介素1β   薄层鉴别   指标成分   含量测定  

摘要： 【目的】建立基于功效主治的外感发热药浴方(由连翘、前胡、荆芥穗、板蓝根、石膏、菊花、淡竹叶等药味构成)质量标准。【方法】薄层色谱鉴别(TLC)法建立君药前胡、连翘的鉴别方法。酶联免疫吸附分析(ELISA)测定方中主要成分的白细胞介素1β(IL-1β)调控活性。高效液相色谱(HPLC)法测定10批样品中活性成分的含量。【结果】供试品中成功检出前胡、连翘斑点。ELISA法发现方中白花前胡甲素、胡薄荷酮、芦丁、白花前胡乙素、连翘苷、(R,S)-告依春等活性成分。10批样品含量测定结果显示,白花前胡甲素含量为0.493~0.694 mg·mL^(-1)。【结论】基于功效主治建立了外感发热药浴方的TLC鉴别和HPLC含量测定方法,所得标准能够更加准确地对药效进行控制。

关键词： ABO血型   表型   等位基因   血型血清学   家系调查  

摘要： 目的探讨4例由ABO^(*)AW等位基因导致的ABO正反定型不符样本及家系的血清学和分子生物学特性,研究其遗传方式。方法常规血型血清学方法鉴定样本的ABO血型表型;PCR方法扩增ABO基因7个外显子及其侧翼内含子,对扩增产物进行直接测序和克隆测序进行分析,并对其中1例先证者的亲属进行家系调查。结果先证者1,2,3血型血清学结果为A弱B,存在IgM-A1抗体;先证者4血型血清学结果为A弱B;测序显示:4例先证者基因型分别为ABO^(*)AW.25/B.01,ABO^(*)AW.26/B.01,ABO^(*)AW.37/B.01,ABO^(*)AW.37/B.01。与ABO^(*)A1.01等位基因比对,ABO^(*)AW25存在c.467C>T,c.829G>A和c.1061del G突变位点;ABO^(*)AW26存在c.467C>T,c.527G>A和c.1061del G突变位点;ABO^(*)AW.37存在c.940A>G突变位点。家系调查显示先证者4父亲、母亲、丈夫和儿子血型血清学结果分别为A弱型、B型、A型及A型,其中先证者4父亲及儿子的ABO基因均存在ABO^(*)AW.37等位基因。结论ABO^(*)A1.01等位基因上点突变产生ABO^(*)AW等位基因,导致红细胞上A抗原的弱表达,且能够稳定遗传突变。

关键词： 原发性高血压   自拟活血降压汤   苯磺酸左旋氨氯地平片   中医证候积分   血压变异性  

摘要： [目的]研究自拟活血降压汤联合苯磺酸左旋氨氯地平片治疗原发性高血压(PH)患者的疗效及对血压变异性、血清相关细胞因子的影响。[方法]回顾性选取82例PH患者作为研究对象,根据治疗方案分为对照组、研究组,每组41例。对照组采用苯磺酸左旋氨氯地平片治疗,研究组采用自拟活血降压汤联合苯磺酸左旋氨氯地平片治疗,两组均治疗8周。[结果]治疗后,研究组总有效率为97.56%,高于对照组的80.49%(P<0.05),两组患者中医证候积分、血压及血压变异性指标[24 h平均收缩压(24 h SBP)、24 h平均舒张压(24 h DBP)、24 h收缩压变异性(24 h SBPV)、24 h舒张压变异性(24 h DBPV)]、血清细胞因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胱抑素C(Cys C)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)]水平均低于治疗前(P<0.05),研究组上述指标均显著低于对照组(P<0.05);研究组、对照组不良反应发生率分别为12.20%、7.32%,组间比较无显著性差异(P>0.05)。[结论]采用自拟活血降压汤联合苯磺酸左旋氨氯地平片治疗可有效减轻PH患者临床症状,降低血压水平,缓解炎症状态,提高疗效,且安全性良好。

关键词： CD1d   iNKT细胞   α-半乳糖酰神经酰胺   细胞因子  

摘要： 目的检测多种肿瘤细胞系的CD1d表达情况,探讨iNKT细胞对不同肿瘤细胞系杀伤的敏感性。方法将肿瘤细胞系制备成单细胞悬液,使用CD1d抗体与肿瘤细胞共孵育,通过流式细胞术检测CD1d在各种肿瘤细胞系中的表达;将iNKT细胞与肿瘤细胞按照效靶比E:T=10:1、5:1和1:1共孵育,RTCA eSight成像检测仪监测iNKT细胞对肿瘤细胞杀伤情况,流式细胞术检测iNKT细胞表面分子的表达,ELISA检测iNKT细胞激活后的细胞因子分泌。结果在Jurkat、Jeko-1、U2OS、A375、Hep-3B细胞系均可检测到CD1d表达,其阳性比例分别为98.40%、93.80%、67.10%、43.80%、11.00%;而在肿瘤细胞系Huh7、OVCAR3、MKN45、AGS、H460、MKN7、MDA-MB-453中CD1d为阴性。激活的iNKT细胞表达NK细胞激活受体CD226、NKG2D,同时能够迅速分泌大量的细胞因子和细胞毒性分子如IFNγ和颗粒酶B等。结论iNKT细胞对CD1d阳性(除Jeko-1细胞)及阴性肿瘤细胞系具有广泛杀伤能力,且在高效靶比时杀伤效果最强;α-Galcer可增强iNKT细胞对CD1d阳性肿瘤细胞系的杀伤能力。

关键词： CD3^(+)   CD4^(+)   CD8^(+)   T淋巴细胞   肺炎支原体肺炎  

摘要： 目的观察CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞计数检验对肺炎支原体肺炎患儿的临床诊断价值。方法选取2022年9月-2023年11月信丰县人民医院收治的60例肺炎支原体肺炎患儿作为研究组,另选取同期60例健康儿童作为对照组。比较两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞计数指标水平,分析单项指标检测的阳性率及联合检测的阳性率结果,并分析以上三项T淋巴细胞计数在诊断肺炎支原体肺炎患儿中的敏感性、特异性和有效性。结果研究组CD3^(+)、CD4^(+)水平低于对照组,而CD8^(+)水平高于对照组(P<0.05)。研究组中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)单独检测后的诊断准确率分别为78.33%、75.00%、80.00%,CD3^(+)^(+)CD4^(+)^(+)CD8^(+)联合检测后的诊断准确率为98.33%,且单项指标检测阳性率低于联合检测阳性结果(P<0.05)。相比CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)三项T淋巴细胞计数单一诊断而言,三者联合诊断下的疾病诊断敏感性、特异性、有效性更高,分别为95.31%、99.98%和91.96%(P<0.05)。结论肺炎支原体肺炎患儿常伴有T淋巴细胞水平异常,因此在临床诊治中可将T淋巴细胞亚群检测作为辅助诊断指标,从而为后续治疗提供依据。

关键词： 番茄环纹斑点病毒   RdRP   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)的依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)是病毒复制和转录的核心酶。本研究通过原核表达RdRP的部分片段并制备多克隆抗体,旨在为TZSV的检测和诊断提供关键材料,并为后续研究RdRP在病毒基因表达调控以及病毒与宿主互作等方面的作用奠定基础。结果表明:从TZSV染病番茄中扩增出大小为903 bp的TZSV RdRP-a片段,原核表达获得大小为36 kDa的重组蛋白;蛋白纯化后免疫小鼠,制备多克隆抗体,获得的多抗血清效价可达到1∶128000;经Western blot鉴定,所制备的多克隆抗体能够特异性识别TZSV-RdRP重组蛋白和天然TZSV。

关键词： 人偏肺病毒感染   病毒感染   辅助性T细胞1/2细胞因子   哮喘  

摘要： 目的 探究辅助性T细胞1(Th1)/Th2细胞因子在人偏肺病毒(hMPV)感染患儿中的表达变化及其在哮喘发病中的作用。方法 回顾性分析2023年2月至2024年3月于河北省儿童医院就诊的hMPV感染患儿245例的临床资料,根据患儿病情严重程度分为轻症组(170例)和重症组(75例)。收集患儿一般资料,检测患儿气道炎症指标、肺功能指标及Th1/Th2细胞因子水平。使用多元线性回归模型分析Th1/Th2细胞因子水平与气道炎症因子水平的相关性;采用二元Logistic回归模型分析影响hMPV感染患儿发生哮喘的相关危险因素。结果 重症组肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)、IL-6、CD_(8)^(+) T淋巴细胞水平均高于轻症组,IL-10、γ-干扰素、CD_(3)^(+) T淋巴细胞、CD_(4)^(+) T淋巴细胞、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)/FVC比值均低于轻症组(均P<0.05)。245例患儿中,58例诊断为哮喘(哮喘组)、187例无哮喘(非哮喘组)。哮喘组TNF-α、IL-4、IL-6、CD_(8)^(+) T淋巴细胞水平均明显高于非哮喘组,IL-10、γ-干扰素、CD_(3)^(+) T淋巴细胞、CD_(4)^(+) T淋巴细胞、FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC比值均低于非哮喘组(均P<0.05)。二元Logistic回归模分析结果显示,较高的TNF-α、IL-4、IL-6及CD_(8)^(+) T淋巴细胞水平,较低的IL-10、γ-干扰素、CD_(3)^(+) T淋巴细胞、CD_(4)^(+) T淋巴细胞、FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC比值水平均为影响hMPV感染患儿发生哮喘的独立危险因素(均P<0.05)。CD_(3)^(+) T淋巴细胞与IL-4、IL-6呈负相关,CD_(4)^(+) T淋巴细胞与IL-6呈负相关、与IL-10呈正相关,CD_(8)^(+) T淋巴细胞与IL-4、IL-6呈正相关,与IL-10呈负相关(均P<0.05)。结论 发生哮喘的hMPV感染患儿Th1/Th2细胞因子水平存在更为明显的异常变化,且Th1/Th2细胞因子水平与患儿疾病严重程度密切相关,临床可通过检测Th1/Th2细胞因子水平对hMPV感染患儿哮喘发作进行预测。

关键词： 黄精多糖   TLR4   特异性免疫反应   OVA   淋巴细胞   IgG   炎症因子   干扰素  

摘要： [目的]评价黄精多糖对Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的激活作用,并明确其增强小鼠体内特异性免疫反应的作用。[方法]用稳定转染了人TLR4基因和分泌型胚胎碱性磷酸酶报告基因的HEK-Blue^(TM) h TLR4细胞模型快速评价滇黄精中性水提多糖(Polygonatum kingianum NP H_(2)O,PKNH)、滇黄精碱提多糖(Polygonatum kingianum AP H_(2)O,PKAH)、滇黄精水提醇洗多糖(Polygonatum kingianum NP 5%Et OH,PKNEt)、滇黄精碱提醇洗多糖(Polygonatum kingianum AP 5%Et OH,PKAEt)4种不同黄精多糖对TLR4的激活作用;采用C57BL/10Sc NJ(TLR4^(-/-))小鼠确认药物作用与TLR4的关系;采用卵白蛋白(ovalbumin,OVA)免疫小鼠模型评价药物对特异性免疫反应的增强作用;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中血清免疫球蛋白G1(immunoglobulin G1,Ig G1)抗体及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、干扰素诱导蛋白-10(interferon-γ inducible protein-10,IP-10)等TLR4信号通路相关细胞因子的水平,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-5-(3-羧甲基苯基)-2-(4-磺苯基)-2氢-四唑内盐(5-[3-(aarboxymethoxy)phenyl]-3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)法评价脾脏淋巴细胞增殖;逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测与TLR4信号通路相关的细胞因子m RNA表达水平。[结果]PKNH作用24 h对TLR4的激活率最高(P<0.001)。与野生型比较,PKNH对C57BL/10Sc NJ (TLR4^(-/-))小鼠脾脏淋巴细胞增殖以及TNF-α、IL-6、IP-10等细胞因子表达的促进作用明显减弱(P<0.001)。PKNH灌胃能显著提高OVA免疫小鼠血清Ig G1水平(P<0.01),并促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖(P<0.05)。[结论]黄精多糖PKNH能通过激活TLR4,增强小鼠特异性免疫反应。

关键词： 小儿重症肺炎   suPAR   IL-1R1   CC16  

摘要： 目的分析血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)、白介素1受体1型(IL-IRI)、Clara细胞分泌蛋白16(CC16)水平在小儿重症肺炎鉴别诊断中的效能。方法回顾性分析2023年1月至2024年2月期间我院收治的87例肺炎患儿的病历资料,根据患儿病情程度分为轻症组(n=49)和重症组(n=38),并根据重症组患儿预后情况将其分为预后良好亚组(n=30)和预后不良亚组(n=8)。比较轻症组和重症组以及预后良好亚组与预后不良亚组患儿血清suPAR、IL-1R1及CC16水平,分析血清suPAR、IL-1R1及CC16对重症肺炎患儿的诊断效能及对患儿预后的评估价值。结果重症组小儿危重病评分(PCIS)评分较轻症组低(P<0.05);重症组血清suPAR、IL-1R1水平高于轻症组,血清CC16水平低于轻症组(P<0.05);经Pearson相关性分析,血清suPAR、IL-1R1水平与患儿PCIS评分呈负相关,血清CC16水平与患儿PCIS评分呈正相关(P<0.05);经ROC曲线分析显示,血清suPAR、IL-1R1及CC16水平对重症肺炎患儿的诊断结果中,血清suPAR的效果最佳,其曲线下面积(AUC)为0.910,灵敏度为78.95%,特异性为97.96%,95%CI为0.829~0.961,截断值为2.04ng/mL(P<0.05);预后良好亚组血清suPAR、IL-1R1较预后不良亚组低,CC16水平较预后不良亚组高(P<0.05);经Logistic回归分析显示,suPAR、IL-1R1为影响重症肺炎患儿预后的独立危险因素,CC16为影响重症肺炎患儿预后的保护因素(P<0.05)。结论重症患儿血清suPAR、IL-1R1水平随病情加重而升高,是影响重症肺炎患儿预后的独立危险因素;血清CC16水平随病情加重而下降,是影响重症肺炎患儿预后的保护因素,3者对小儿重症肺炎的诊断和预后评估均具有较高应用价值。

关键词： 跟骨骨折   降钙素原   肿瘤坏死因子-α   基质细胞衍生因子-1   早期感染  

摘要： 目的:分析血清降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)水平单项及联合检测在跟骨骨折术后患者早期感染中的预测价值。方法:选取2023年7月至2024年4月该院收治的93例跟骨骨折患者进行前瞻性研究,根据跟骨骨折术后患者是否发生早期感染将其分为感染组(n=21)和非感染组(n=72)。比较两组血清PCT、TNF-α、SDF-1水平,分析血清PCT、TNF-α、SDF-1水平单项及联合检测在跟骨骨折术后患者早期感染中的预测价值。结果:感染组PCT、TNF-α、SDF-1水平均高于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,血清PCT、TNF-α、SDF-1水平单项及联合检测预测跟骨骨折术后患者早期感染的曲线下面积分别为0.835、0.845、0.829、0.951,且联合检测的预测价值高于三项单项检测。结论:血清PCT、TNF-α、SDF-1水平联合检测预测跟骨骨折术后患者早期感染的价值高于三项单项检测。