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关键词： 弥漫性大B细胞淋巴瘤   IFN-γ   IL-2   T淋巴细胞   NK细胞   预后   预测  

摘要： 目的探讨血浆IFN-γ、IL-2及外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞对弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后的预测价值。方法选取弥漫性大B细胞淋巴瘤患者106例,通过门诊或电话随访,其中生存74例(生存组),死亡32例(死亡组)。采用流式细胞仪检测IFN-γ、IL-2、CD3+、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T、NK细胞,多因素Logistic回归分析影响弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后因素,ROC曲线分析血浆IFN-γ、IL-2及外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞预测弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后的价值。结果生存组与死亡组基线资料性别、年龄、BMI、病理类型、临床分期比较,差异无统计学意义(P>0.05);生存组与死亡组IFN-γ、IL-2及外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T)、NK细胞水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示IFN-γ(OR=0.144,95%CI:0.057~0.364)、IL-2(OR=0.951,95%CI:0.933~0.970)、CD3+(OR=0.648,95%CI:0.549~0.765)、CD3+CD4+T(OR=0.777,95%CI:0.710~0.850)、NK细胞(OR=0.397,95%CI:0.270~0.586)水平均为弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后的保护性因素(P<0.001)。ROC曲线分析显示,与单一检测指标比较,联合检测价值更高。结论血浆IFN-γ、IL-2及外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞可能成为弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后评估的潜在生物标志物,为临床诊断和治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤提供重要的参考依据。

关键词： 过敏性紫癜   正五聚蛋白3   CXC趋化因子配体16   T淋巴细胞亚群   诊断价值  

摘要： 目的:探究正五聚蛋白3(PTX3)、CXC趋化因子配体16(CXCL16)联合T淋巴细胞亚群在过敏性紫癜(HSP)患儿诊断中的价值。方法:选取我院从2020年10月-2022年10月收治的120例HSP患儿作为研究组。另取同期健康体检儿童100例记作健康体检组。对比两组血清PTX3、CXCL16与T淋巴细胞亚群指标水平。此外,将HSP患儿按照病情严重程度的差异分作轻度组(n=47)、中度组(n=42)及重度组(n=31)。对比三组血清PTX3、CXCL16与T淋巴细胞亚群指标水平。结果:研究组血清PTX3、CXCL16水平均高于健康体检组(均P<0.05)。研究组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均低于健康体检组,而CD8^(+)水平高于健康体检组(均P<0.05)。重度组患儿血清PTX3、CXCL16水平均高于轻度组与中度组,且中度组高于轻度组(均P<0.05)。重度组患儿CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均低于轻度组与中度组,且中度组低于轻度组;重度组患儿CD8^(+)水平高于轻度组与中度组,且中度组高于轻度组(均P<0.05)。结论:PTX3、CXCL16联合T淋巴细胞亚群作为HSP病情发生、发展的重要监测指标,在临床诊断及病情严重程度评估方面具有重要作用。

关键词： 白鹇   蓝鹇   MHC   遗传多样性  

摘要： 为探究白鹇和蓝鹇两种雉鸡在主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)BF基因的遗传多样性和双拷贝结构,通过设计引物、PCR扩增其MHC-BF基因第2外显子序列,采用高通量测序PCR产物,进而检测与分析这2个雉鸡物种的多态性。结果表明:扩增得到白鹇和蓝鹇的MHC-BF基因第2外显子序列长度为259bp或265bp,存在1个6bp“CCTGGG”的插入缺失,可作为MHC-BF基因2个拷贝的识别位点。白鹇包含了本次检测到的全部80个变异位点,而蓝鹇只有其中的62个。白鹇共有29个单倍型,蓝鹇仅有13个单倍型,两者共享8个单倍型。白鹇比蓝鹇的遗传多样性高,核酸多样性分别为0.104和0.076,单倍型多样性分别为0.959和0.868。蓝鹇作为岛屿物种,其MHC-BF基因的遗传多样性低于白鹇这个大陆物种,为2个物种的遗传管理提供了理论基础。

关键词： 分枝杆菌,结核   结核,骨关节   破骨细胞   白细胞介素类  

摘要： 目的:探讨白细胞介素22(IL-22)通过p38 MAPK信号通路影响骨关节结核骨质破坏的作用机制。方法:(1)选取2021年1—12月在新疆维吾尔自治区传染病医院骨科接受手术治疗的骨关节结核患者作为病例组,共58例;选取相同时间段该医院接受手术治疗的骨折患者作为对照组,共51例。收集研究对象的血清样本,使用酶联免疫吸附试验检测IL-22水平;收集骨组织样本,应用Western blot检测p38、p-p38、CatK和MMP9蛋白表达水平。(2)将小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)诱导为破骨细胞模型,实验分为6组,分别为破骨细胞组、破骨细胞+H37Rv组、破骨细胞+H37Rv+阴性对照组、破骨细胞+H37Rv+IL-22-shRNA组、破骨细胞+H37Rv+p38抑制剂组、破骨细胞+H37Rv+p38抑制剂+IL-22-shRNA组。通过TRAP染色法观察破骨细胞的活性,使用qRT-PCR和Western blot检测p38、CatK和MMP9的基因和蛋白表达水平。结果:(1)临床研究结果显示,对照组血清中IL-22的表达水平[中位数(四分位数)]为34.61(28.29,76.92)pg/ml,明显低于病例组[102.74(56.12,132.78)pg/ml],差异有统计学意义(Z=-3.840,P=0.001)。病例组p38、p-p38、CatK和MMP9蛋白表达水平分别为0.649±0.043、0.856±0.062、0.506±0.072,均明显高于对照组(分别为0.346±0.078、0.708±0.094、0.366±0.046),差异均有统计学意义(t值分别为-8.368、-3.203、-4.025,P值均<0.05)。(2)细胞实验结果显示,破骨细胞+H37Rv组每光镜视野(×100)TRAP染色阳性细胞个数为51.333±12.858,明显高于其他组,差异有统计学意义(F=26.270,P<0.001);破骨细胞+H37Rv组p-p38、CatK和MMP9蛋白表达水平明显升高,与之相比,在IL-22-shRNA和p38抑制剂干预后明显下调。结论:敲减IL-22抑制p38 MAPK信号通路可减轻骨关节结核的骨质破坏。

关键词： 苯并[a]芘   鱼腥草素钠   哮喘   IL-33-ST2/ERK  

摘要： 目的探讨鱼腥草素钠治疗环境污染物苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,BaP)和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)共暴露诱导的过敏性哮喘气道炎症的疗效和机制。方法将30只BALB/c小鼠按区组随机化方法分为对照组、BaP组、哮喘模型组(OVA组)、BaP加重哮喘组(BaP+OVA组)和鱼腥草素钠治疗BaP加重哮喘组(BaP+OVA+SH组)(n=6)。建立BaP和OVA共暴露诱导的哮喘加重小鼠模型。检测小鼠气道高反应性、肺泡灌洗液中白细胞分布和IL-4、IL-13、IL-25、IL-33、胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)、IFN-γ等相关细胞因子表达水平,以及血清OVA特异性抗体(IgE、IgG2a和IgG1)、肺组织丙二醛、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平和肺组织病理变化。Western blot和qRT-PCR检测肿瘤发生抑制蛋白2(suppression of tumorigenicity 2,ST2)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和磷酸化ERK(phosphorylated ERK,p-ERK)的蛋白质及mRNA表达情况。使用方差分析等统计方法对结果进行差异显著性分析。结果与BaP+OVA组比较,小鼠经鱼腥草素钠治疗后气道高反应性显著降低(P<0.01),肺泡灌洗液中白细胞(P<0.01)、中性粒细胞(P<0.05)、淋巴细胞(P<0.01)数量减少,细胞因子(IL-4、IL-13、IL-25、IL-33、TSLP)分泌显著下调(P<0.01),IgE(P<0.01)和IgG1(P<0.05)的产生也减少。此外,鱼腥草素钠治疗显著降低了BaP诱导的哮喘加重小鼠肺组织的丙二醛水平(P<0.05),减少了气道炎性细胞、黏液和胶原纤维的增生。鱼腥草素钠通过下调ST2和ERK的表达(P<0.05),抑制ERK磷酸化(P<0.01),减轻肺组织氧化应激损伤及胶原纤维增生,从而阻断BaP加重的哮喘炎症进展。结论环境污染物BaP可通过IL-33-ST2/ERK通路诱导气道重塑来加重OVA致敏哮喘小鼠气道炎症,而鱼腥草素钠能抑制这一通路激活,从而阻断BaP加重哮喘炎症进展。本研究为不同表型哮喘的防治提供了新思路。

关键词： 传统讲授教学   自主案例教学   医学检验   流式细胞技术   本科带教   教学管理  

摘要： 目的比较传统讲授教学与自主案例教学方法的差异及优势,帮助优化教学设计,提升学生岗位胜任力。方法以2022年7月-2023年5月广东省人民医院检验科42名医学检验专业本科实习生为研究对象,在流式细胞组的细胞免疫教学中,分为传统讲授教学组和自主案例教学组各21人,对两组学生的学习效果进行综合考评,包括理论和操作考试,同时评价学习感受。结果与传统讲授教学组比较,自主案例教学组理论、操作考试成绩均显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。自主案例教学组学生评价学习积极性、循证思维、报告判读、临床沟通、语言表达以及团队协作能力方面的表现,与传统讲授组教学相比,评价分数显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自主案例教学可提高学生学习的主动性和积极性,提升其对知识和技能的掌握程度,克服了流式细胞免疫教学内容难点,可作为医学检验专业本科生教学新模式推广。

关键词： 两栖动物   采血方法   嗜中性粒细胞   淋巴细胞   应激   生理权衡  

摘要： 两栖动物血液中的白细胞数量与其健康状态有关,嗜中性粒细胞与淋巴细胞的比值被认为是指示其应激水平的替代指标。本文概述了两栖动物常用的采血部位、采血方法和注意事项,总结了物种、发育阶段、城市化、环境污染物、温度和病原微生物等因素对两栖动物嗜中性粒细胞和淋巴细胞的百分比及两者比值的影响,以及两栖动物嗜中性粒细胞和淋巴细胞比值与应激反应能力的关系。结合两栖动物的生活史特征,认为至少在下述三方面急需开展工作:1)优化和标准化两栖动物蝌蚪、幼体和成体的活体采血技术,使之适用于野外研究;2)清楚界定单一因素与两栖动物蝌蚪、幼体和成体血液中嗜中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比及两者比值的关系,并阐明多种因素复合作用下短期内或较长时期其健康状态与这些指标的关系;3)从免疫学观点出发,澄清两栖动物水陆转换关键生活史阶段免疫系统内部各组分之间、免疫功能与其他耗能的生理活动之间是否存在权衡关系,为预估种群未来命运贡献新思路。两栖动物血液中嗜中性粒细胞和淋巴细胞的百分比及两者的比值受多种因素影响,但目前的研究仍聚焦于单一因素的种内比较,若推广至多因素背景下或物种间的比较研究,建议仍需与其他生理指标配合使用,谨慎解释其生态学意义。

关键词： 长链非编码RNA   浆细胞瘤变体易位1   微小RNA-484   Krüppel样因子12   宫颈癌   白细胞介素6/信号转导及转录激活因子3信号通路  

摘要： 为探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)浆细胞瘤变体易位1(plasmacytoma variant translocation 1, PVT1)对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,和其对miR-484、 Krüppel样因子12(Krüppel-like factor 12, KLF12)的调控,以及其对IL-6/STAT3信号的调节机制,采用qRT-PCR检测宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中lncRNA PVT1、 miR-484以及KLF12 mRNA的表达;双荧光素酶试验检测lncRNA PVT1、 miR-484、 KLF12的关系;以Sh-PVT1、 Sh-PVT1+antagomir、 Sh-PVT1+antagomir+pcDNA3.1转染细胞,检测细胞的增殖、凋亡、迁移以及侵袭性能;检测肿瘤细胞的体内生长与转移性能;Western blotting检测各组细胞和小鼠肿瘤组织中KLF12、 B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2, Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)的表达;免疫组化法检测各组细胞和小鼠肿瘤组织中IL-6、磷酸化JAK2(phosphorylated JAK2, p-JAK2)、磷酸化STAT3(phosphorylated STAT3, p-STAT3)的表达。结果显示,lncRNA PVT1、 KLF12在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中的表达显著升高,miR-484的表达显著降低(P<0.05)。双荧光素酶试验证实,lncRNA PVT1靶向调控miR-484的表达;miR-484靶向调控KLF12的表达。抑制lncRNA PVT1能明显抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭,诱导细胞趋于凋亡,下调KLF12、 Bcl-2、 IL-6、 p-JAK2和p-STAT3的表达,上调Bax的表达(P<0.05),但antagomir能部分解除抑制lncRNA PVT1对宫颈癌进展的阻滞作用,而pcDNA3.1能部分恢复抑制lncRNAPVT1对宫颈癌进展的阻滞作用。该研究提示,在宫颈癌中lncRNA PVT1内源性竞争miR-484,上调KLF12的表达,促进宫颈癌细胞的体外增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡,并促进肿瘤细胞的体内生长与转移,推动宫颈癌的恶性进展,这可能与激活IL-6/STAT3信号通路有关。

关键词： EB病毒   传染性单核细胞增多症   慢性活动性EB病毒感染   淋巴细胞亚群   儿童  

摘要： 目的探讨EB病毒感染所致的儿童传染性单核细胞增多症(IM)和慢性活动性EB病毒感染(CAEBV)两组外周血中淋巴细胞亚群变化并且对比两组外周血EBVDNA水平,探讨EBV感染导致的传染性单核细胞增多症发展为慢性活动性EB病毒感染的高危因素。方法选取航天中心医院2015年1月至2021年8月儿科病房住院并确诊为EBV感染的IM115例和CAEBV13例的临床资料及实验室检测结果进行回顾性分析,分析感染EB病毒后的传染性单核细胞增多症和慢性活动性EBV感染患儿的临床特点。选取同期体检健康儿童73例比较患儿感染EBV后淋巴细胞亚群的变化,采用Python软件方法统计学分析,配对t检验比较组间差异。结果传染性单核细胞增多症(IM)115例、慢性活动性EB病毒感染(CAEBV)13例及对照组正常儿童73例外周血中淋巴细胞免疫亚群。采用配对t检验分别比较3组淋巴细胞亚群的变化是否有统计学差异。IM组CD3、CD8、NK细胞绝对值显著高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义;IM组CD4、B淋巴绝对值显著低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。CAEBV组CD3、CD4、CD8、B淋巴、NK细胞绝对值显著低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。CAEBV组CD3、CD4、CD8、B淋巴、NK细胞绝对值显著低于IM组(P<0.05),差异有统计学意义。结论EB病毒感染引起的IM患儿存在免疫失衡,IM患儿外周血中CD8+T和总CD3细胞在明显增多,CD4、B淋巴细胞较正常儿童相对减少。而CAEBV儿童存着严重免疫功能紊乱和免疫功能低下,CD3、CD4、CD8、B淋巴、NK细胞计数均明显低于正常儿童和IM组。EB病毒感染的患儿检测外周血中淋巴细胞亚群变化、EB病毒核酸载量有助于鉴别诊断和评估病情。