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关键词： 非小细胞肺癌   同种异体移植炎症因子1   白细胞介素6   血管内皮生长因子  

摘要： 目的研究同种异体移植炎症因子1(AIF-1)、白细胞介素6(IL-6)和血管内皮生长因子(VEGF)对非小细胞肺癌(NSCLC)诊断和预后评估的价值。方法选取183例NSCLC患者和120例健康体检者,分为NSCLC组和对照组,比较2组血清AIF-1、IL-6和VEGF的表达差异;分析其与CEA、SCCA、CYFRA21-1等肿瘤标志物及NSCLC临床病理特征的关系;应用受试者工作特征(ROC)曲线分析三者对NSCLC的诊断价值;分析血清AIF-1、IL-6、VEGF与生存的关系。结果NSCLC患者血清AIF-1、IL-6、VEGF高于健康对照组(P<0.05),与CEA、SCCA、CYFRA21-1呈正相关(P<0.05);三者与淋巴结转移、远处转移、癌组织分化程度、TNM分期有关(P<0.05),IL-6还与癌组织大小有关(P<0.05);ROC曲线分析结果显示:三者联合检测,诊断NSCLC的敏感性为0.88,特异性为0.78,曲线下面积(AUC)为0.88,95%CI为0.84-0.92,优于单一指标;生存分析显示,AIF-1和IL-6高表达组的NSCLC患者总体生存率比低表达组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AIF-1、IL-6和VEGF参与了NSCLC的发生发展过程,有助于NSCLC的临床诊断和预后评估。

关键词： 再生障碍性贫血   环孢素软胶囊   细胞免疫   血小板  

摘要： 目的观察探讨再生障碍性贫血患者应用环孢素软胶囊联合达那唑胶囊治疗的临床效果.方法回顾性分析2019年1月至2023年12月就诊于厦门市第三医院的30例再生障碍性贫血患者的资料,根据治疗方法的不同,分为观察组和对照组,每组15例.对照组给予达那唑胶囊治疗,观察组给予环孢素软胶囊治疗.连续用药6个月后评估治疗效率,比较症状评分,检测血常规(Hb、RBC、WBC、PLT)和免疫功能指标[总T淋巴细胞(CD3^(+))百分比、辅助/诱导T淋巴细胞(CD4^(+))百分比],观察不良反应发生情况.结果观察组的治疗有效率为93.33%,高于对照组的53.33%(P<0.05).治疗6个月后,两组患者的皮肤黏膜出血、头晕、疲乏及气短症状评分均降低(P<0.05),且观察组的降低幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).与治疗前相比,治疗后观察组和对照组Hb、RBC、WBC、PLT及CD3^(+)、CD4^(+)水平均升高(P<0.05),观察组的升高幅度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).两组的不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05).结论环孢素软胶囊联合达那唑胶囊治疗再生障碍性贫血患者安全有效,可有效缓解贫血相关临床症状,提升外周血Hb、RBC、WBC、PLT水平,同时改善患者免疫功能指标。

关键词： 牙周炎   牙周膜干细胞   瑞香素   炎性损伤   成骨分化   NLRP3/IL‑1β信号通路  

摘要： 目的探讨瑞香素(Dap)对脂多糖(LPS)诱导的牙周膜干细胞(PDLSCs)炎性损伤及成骨能力以及对NOD样受体热蛋白结构域3‑白细胞介素1β(NLRP3/IL‑1β)信号通路的影响。方法收集12~25岁患者PDLSCs,随机分为对照组(Control组)、脂多糖组(Model组)、脂多糖+低、中、高剂量组瑞香素(Dap‑L、Dap‑M、Dap‑H组)、脂多糖+瑞香素高剂量+NLRP3激活剂‑尼日利亚菌素组(Dap‑H+Nigericin组)。用酶消化法分离及培养患者的人PDLSCs,检测PDLSCs的多向分化能力;采用CCK‑8检测并筛选出合适的Dap浓度用于后续实验;比色法检测ALP活性;茜素红染色观察矿化结节情况;实时荧光定量PCR检测与成骨相关基因表达水平;酶联免疫吸附试验检测各组炎症因子水平;Western blot检测各组PDLSCs中NLRP3、IL‑1β、抗凋亡和促凋亡有关蛋白表达量。结果采集并培养的人牙周膜干细胞具有成骨分化和成脂分化的能力;CCK‑8筛选Dap的浓度为10、20及40μg/mL用于后续实验。与Control组相比,Model组细胞ALP活性(0.35±0.02)明显降低,矿化结节数量减少,以及成骨因子ALP(0.21±0.02)、RUNX2(0.40±0.04)、OPN(0.18±0.02)的基因表达水平明显下降,炎症因子TNF‑α(56.80±3.33)、IL‑1β(167.81±11.37)和IL‑6(317.51±15.18)水平以及NLRP3(0.98±0.09)、IL‑1β(1.28±0.11)和促凋亡Caspase‑1(0.98±0.08)蛋白表达水平升高、抗凋亡蛋白Bcl‑2(0.31±0.03)表达水平降低(P<0.05);与Model组相比,Dap‑L、Dap‑M、Dap‑H组细胞活性逐渐升高,矿化结节数量逐渐增多,ALP活性以及成骨因子的基因表达水平逐渐升高,炎症因子水平及NLRP3、IL‑1β和Caspase‑1促凋亡蛋白表达水平逐渐下降、Bcl‑2抗凋亡蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05);与Dap‑H组相比,Dap‑H+Nigericin组细胞ALP活性(0.41±0.04)明显降低,矿化结节数量减少,以及成骨因子ALP(0.26±0.03)、RUNX2(0.47±0.04)、OPN(0.23±0.02)的基因表达水平明显下降,炎症因子TNF‑α(50.47±3.16)、IL‑1β(156.16±12.07)和IL‑6(292.50±19.24)水平以及NLRP3(0.80±0.07)、IL‑1β(1.03±0.09)和促凋亡Caspase‑1(0.91±0.08)蛋白表达水平升高、抗凋亡蛋白Bcl‑2(0.36±0.04)表达水平降低(P<0.05)。结论瑞香素可能减少LPS诱导的牙周膜干细胞的炎性损伤、促进成骨分化,其潜在机制可能与调控NLRP3/IL‑1β信号通路有关。

关键词： 血管内皮生长因子受体2   细胞核增殖抗原   软组织肉瘤   临床病理   生存期  

摘要： 目的探讨组织血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)、细胞核增殖抗原(Ki-67)蛋白表达水平与软组织肉瘤患者生存期的关系。方法选取2018年1月至2023年1月在烟台市烟台山医院手术治疗的106例软组织肉瘤患者(男57例,女49例)肿瘤组织及肿瘤旁组织留存标本,采用免疫组织化学法检测上述标本中的VEGFR-2、Ki-67表达。组间比较采用χ^(2)检验,生存差异行Log-rankχ^(2)检验,多因素COX比例风险模型分析危险因素,Spearman相关性分析相关性。结果软组织肉瘤组织VEGFR-2、Ki-67阳性表达率高于肿瘤旁组织[42.45%(45/106)比9.43%(10/106)、38.68%(41/106)比5.66%(6/106),χ^(2)=30.705、33.488,P<0.05];VEGFR-2阳性患者年龄>60岁、组织学分级3级、临床分期Ⅲ期占比高于VEGFR-2阴性患者[35.56%(16/45)、75.56%(34/45)、62.22%(28/45)、比16.39%(10/61)、47.54%(29/61)、32.79%(20/61),χ^(2)=5.137、8.430、9.056,P<0.05];Ki-67阳性患者组织学分级3级、临床分期Ⅲ期、有淋巴结转移占比高于Ki-67阴性患者[75.61%(31/41)、54.17%(26/41)比49.23%(32/65)、33.85%(22/65),χ^(2)=7.256、8.871,P<0.05]。VEGFR-2、Ki-67阳性患者总生存率均低于阴性患者[48.49%(22/45)、46.34%(19/41)比80.33%(49/61)、80.00%(52/65),Log rankχ^(2)=18.120、22.480,P<0.05]。组织学分级、VEGFR-2阳性、Ki-67阳性为影响患者生存期的危险因素(HR=0.297、3.518、23.220、19.570,P<0.05)。Spearman相关性显示,组织学分级与VEGFR-2、Ki-67阳性表达均呈正相关(r=0.351、0.232,P<0.05)。结论VEGFR-2、Ki-67在软组织肉瘤组织中阳性表达率高,与肿瘤发生发展有关,影响患者生存期。

关键词： 脓毒症   气虚热毒证   益气解毒方   JAK/STAT信号通路   炎症因子  

摘要： 目的:探讨益气解毒方对脓毒症气虚热毒证患者Janus酪氨酸蛋白激酶/信号传导和转录激活子(JAK/STAT)信号通路及相关细胞因子的影响。方法:将南通市中医院急诊科收治的60例脓毒症气虚热毒证患者应用随机数表法分为对照组、治疗组,每组30例。对照组给予西医常规治疗,治疗组给予西医常规治疗联合应用益气解毒方治疗,均连续治疗1周。治疗后,比较两组临床疗效、中医证候积分、JAK/STAT相关基因[JAK1、STAT3、细胞信号传导抑制因子3(SOCS3)、Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP2)]mRNA表达、JAK/STAT信号通路相关细胞因子[C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量。结果:治疗后,治疗组总有效率93.33%(28/30)显著高于对照组73.33%(22/30)(P<0.05);中医证候气短乏力、高热汗出、烦躁不宁、神昏目赤、口干欲饮评分及总分显著低于对照组(P<0.05);JAK1、STAT3、SOCS3、SHP2mRNA表达显著低于对照组(P<0.05);血清CRP、PCT、IL-6、TNF-α含量显著低于对照组(P<0.05)。结论:益气解毒方辅助治疗能够改善脓毒症气虚热毒证患者临床症状,提高治疗效果,可能与抑制JAK/STAT信号通路有关。

关键词： 颈动脉粥样硬化   脑卒中   同型半胱氨酸   低密度脂蛋白胆固醇   低密度脂蛋白胆固醇与淋巴细胞比值  

摘要： 目的探讨颈动脉粥样硬化斑块患者同型半胱氨酸(Hcy)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)/淋巴细胞(LYM)比值与脑卒中风险的关系。方法回顾性选择2019年1月至2023年1月温州市中医院收治的179例颈动脉粥样硬化斑块患者,根据2年内是否发生脑卒中分为观察组46例和对照组133例,比较两组患者的一般资料,采用多因素logistic回归分析脑卒中风险的影响因素,采用ROC曲线分析血液指标预测脑卒中风险的价值。结果观察组患者年龄、易损斑块占比、LDL-C、Hcy、LDL-C/LYM高于对照组,他汀药物治疗比例、LYM水平低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。年龄、他汀药物治疗、斑块稳定性、LDL-C、Hcy、LDL-C/LYM均是颈动脉粥样硬化斑块患者发生脑卒中的独立影响因素(均P<0.05)。Hcy、LDL-C/LYM预测脑卒中风险的AUC分别为0.783、0.753。结论Hcy和LDL-C/LYM或可辅助预测颈动脉粥样硬化斑块患者脑卒中风险。

关键词： 槲皮素   IL-17   内皮细胞炎症   单核-内皮细胞黏附   NF-κB  

摘要： 目的:探讨槲皮素是否通过NF-κB通路抑制IL-17诱导的单核-内皮细胞黏附。方法:体外培养人血脐静脉融合细胞株***926,加入不同浓度的IL-17,MTS法检测内皮细胞活力,筛选IL-17的最佳干预浓度,建立IL-17诱导的内皮细胞炎症模型。与人单核细胞株THP-1共同培养,建立单核-内皮细胞黏附模型,以槲皮素进行干预,MTS法筛选槲皮素的最佳干预浓度,免疫荧光法观察槲皮素抑制单核-内皮细胞的黏附及NF-κB p65核转位情况。Western Blot法检测NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表达,RT-PCR及ELISA法检测vWF、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1 mRNA及蛋白表达。结果:150 ng/mL IL-17可以诱导***926建立内皮细胞炎症模型,与单核细胞共培养,可以建立单核-内皮细胞黏附模型,0.5μmol/L是槲皮素的最佳干预浓度。槲皮素可抑制IL-17诱导的内皮细胞炎症模型vWF蛋白及mRNA表达;可减少单核-内皮细胞黏附数,但无浓度依赖性;可显著降低p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα比值,减少NF-κB p65入核数量,显著下调ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的蛋白及mRNA表达水平。结论:槲皮素能有效抑制IL-17诱导的内皮细胞炎症反应,抑制单核细胞与内皮细胞黏附,其机制可能与抑制NF-κB通路及其下游炎症因子ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的表达有关。

关键词： 大鲵   非特异性免疫因子   免疫组织   组织分布   活性变化  

摘要： 为探究大鲵非特异性免疫因子的组织分布和活性变化,利用化学比色法和酶联免疫吸附法对2个年龄组(1龄和2龄)大鲵肝脏、肠道和脾脏中的一氧化氮(NO)、总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、溶菌酶(LYZ)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、补体C3(C3)、补体C4(C4)和转铁蛋白(Tf)等9种非特异性免疫因子进行了测定。结果显示:9种非特异性免疫因子在2个年龄组大鲵的3个组织中均有分布,但其活性在不同年龄组和不同组织中存在一定的差异。1龄大鲵脾脏中LYZ、ACP、AKP和Tf的活性高于肝脏和肠道,肝脏中NO、C3和C4的活性高于脾脏和肠道,肠道中TNOS和iNOS的活性高于脾脏和肝脏;2龄大鲵肝脏中NO、TNOS、iNOS、C3和C4的活性高于脾脏和肠道,肠道中LYZ和AKP的活性高于脾脏和肝脏,脾脏中ACP和Tf的活性高于肝脏和肠道。结果表明,9种非特异性免疫因子在1龄大鲵中主要分布于脾脏和肝脏,而2龄大鲵主要分布于肝脏。

关键词： VZV   等电点   毛细管等电聚焦电泳   脱糖酶  

摘要： 目的:建立重组带状疱疹gE抗原等电点(isoelectric point, pI)的全柱成像毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing, cIEF)检测方法。方法:通过优化重组带状疱疹gE抗原等电点检测过程中的两性电解质比例、蛋白质浓度、稳定剂比例参数,建立重组带状疱疹gE抗原的等电点检测方法(cIEF法)。在此基础上,对重组带状疱疹gE抗原进行脱糖酶处理后,采用cIEF法检测等电点。结果:优化后的检测条件为2 M尿素、0.35%甲基纤维素(methylcellulose, MC)、4%两性电解质、1%等电点标记物混合溶液作为样品缓冲液,聚焦条件为1500 V 1 min,3000 V 8 min。重组带状疱疹gE抗原经PNGase F酶脱糖后,采用该方法分析等电点,可得到峰型清楚且分离度高的图谱。结论:本研究建立的cIEF方法适用于重组带状疱疹gE抗原的pI检测及分析,可为重组带状疱疹gE抗原的表征以及相关疫苗研发和生产过程中的质量控制提供依据和参考。Objective: To establish a full column imaging capillary isoelectric focusing (cIEF) detection method for recombinant herpes zoster gE antigen isoelectric point (pI). Method: By optimizing the parameters such as reagent ratio, final sample concentration, and sample stabilizer in the process of detecting recombinant herpes zoster gE antigen, a cIEF method for determining recombinant herpes zoster gE antigen was established. Based on this, the recombinant herpes zoster gE antigen was subjected to enzymatic digestion before cIEF detection. Results: The optimized method uses a mixed solution of 2 M urea, 0.35% methylcellulose (MC), 4% zwitterionic electrolyte, and 1% isoelectric point marker as the sample buffer, with focusing conditions of 1500 V for 1 min and 3000 V for 8 min. After PNGase F enzyme deglycosylation, this method can be used to analyze the isoelectric point of recombinant herpes zoster gE antigen, and a clear peak pattern and high separation degree can be obtained. Conclusion: The established cIEF method is suitable for pI detection and analysis of recombinant herpes zoster gE antigen, which can provide a basis for the characterization of recombinant herpes zoster gE antigen and a reference for quality control in the development and production of related vaccines.