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关键词： 猫泛白细胞减少症病毒   VP2重组蛋白   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 本研究构建了猫泛白细胞减少症病毒（FPV）VP2蛋白的原核表达体系，并制备其特异性多克隆抗体，为FPV的血清学诊断及疫苗效果评价提供基础实验材料。以本实验室分离的FPV-SH0918株DNA为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增VP2中和抗原表位区，插入pCold I载体，构建重组质粒FPV-VP2-pCold I，并转化Rosetta（DE3）感受态细胞在16℃诱导表达。纯化后的VP2重组蛋白用于免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。经间接免疫荧光（IFA）及蛋白质印迹（Western blot）检测均具有良好的反应性和特异性，通过血凝抑制试验（HI）证实制备的多克隆抗体具有1：128的HI效价。本研究为后续探究VP2蛋白的结构与功能研究、FPV疫苗免疫效果评价及抗原诊断方法开发提供了重要的生物材料。

关键词： 血糖间隙   NLR   低密度脂蛋白胆固醇   高密度脂蛋白胆固醇   急性冠脉综合征   MACE  

摘要： 目的探讨血糖间隙、中性粒细胞计数/淋巴细胞计数(NLR)结合血脂这三个指标对诊断为急性冠脉综合征(ACS)的患者住院期间发生主要心血管不良事件(MACE)影响的临床研究。方法回顾性分析确诊ACS的患者235例,搜集临床资料及检验资料,根据其住院时出现MACE与否,分为事件组和非事件组,进行单因素及多因素逐步logistic回归分析ACS患者住院期间发生MACE的相关危险因素。利用受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)分析NLR、血糖间隙以及血脂对ACS患者住院期间发生MACE的预测价值。结果多因素logistic回归分析显示NLR、血糖间隙、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇是患者住院期间发生MACE的独立危险因素。四者联合预测MACE的敏感度和特异度均较高。结论血糖间隙、NLR、低密度脂蛋白胆固醇联合高密度脂蛋白胆固醇对ACS患者近期MACE发生的预测价值较高。

关键词： CAR-T   IL7R alpha   Immune escape   Tumor microenvironment   Glioblastoma  

摘要： Tumor heterogeneity and an immunosuppressive microenvironment pose significant challenges for immunotherapy against solid tumors, particularly glioblastoma multiforme (GBM). Recent studies have highlighted the crucial role of glioma stem cells (GSCs) in tumor recurrence and therapeutic resistance. In this context, we developed a tandem chimeric antigen receptor (CAR)-T cell targeting CD44 and CD133 (PROM1), containing a truncated IL-7 receptor alpha intracellular domain (Delta 7R) between the CD28 costimulatory receptor and the CD3 zeta signaling chain (Tan zeta-T28-Delta 7R). Our target identification and validation were carried out using GSCs, samples from GBM patients, and the corresponding sequencing data. The antitumor efficacy of CAR-T cells was evaluated in patient-derived GSCs, intracranial xenograft models, patient-derived xenograft models, and glioblastoma organoids (GBOs). Single-cell RNA sequencing and mass cytometry were used to determine the immune phenotypes of CAR-T cells. We showed that locoregionally administered Tan zeta-T28-Delta 7R CAR-T cells induced longterm tumor regression with the desired safety outcomes. Patient-derived autologous Tan zeta-T28-Delta 7R CAR-T cells showed robust antitumor activity against GBOs. Our pre-clinical data has demonstrated the translational potential of Tan zeta-T28-Delta 7R CAR-T cell against GBM.

关键词： SynNotch系统   CAR-T细胞   IL-2   CD19  

摘要： 目的:探讨基于新型单载体SynNotch系统构建的局部分泌IL-2的CAR-T细胞(***-2 CAR-T细胞)对传统CD19 CAR-T细胞功能的影响。方法:基于本课题组前期构建的单载体SynNotch系统,将CD19特异性FMC63抗体与IL-2表达模块整合,通过自失活逆转录病毒载体转导T细胞制备***-2 CAR-T细胞。诱导验证实验分为***-2 CAR-T细胞组和未转导T细胞组,通过ELISA检测抗原刺激后IL-2分泌水平。采用CFSE染色法检测在***-2 CAR-T细胞存在时,CD19 CAR-T细胞与肿瘤Raji-Luc或SW620-CD19-Luc细胞共培养时,IL-2的分泌对CD19 CAR-T细胞增殖的影响。流式细胞术检测CD69表达,观察在***-2 CAR-T细胞分泌IL-2的情况下,CD19 CAR-T细胞与Raji-Luc细胞共培养时的激活情况。结果:成功构建自失活逆转录病毒载体***-2 CAR,制备出***-2 CAR-T细胞,病毒滴度>1×10^(7)拷贝/mL,转导效率达37.1%。抗原刺激后,SynNotch CAR-T细胞IL-2分泌量显著高于未转导T细胞(P<0.001)。在***-2 CAR-T细胞分泌IL-2时,CD19 CAR-T细胞具有更强的增殖能力和更高的活化水平(均P<0.001)。结论:成功构建的***-2 CAR-T细胞能显著增强CD19 CAR-T细胞的增殖和活化能力。

关键词： 急腹症   脓毒症   肝素结合蛋白   降钙素原   白细胞   淋巴细胞  

摘要： 目的:调查急腹症患者的肝素结合蛋白(HBP)、白细胞计数(WBC)、降钙素原(PCT)以及外周血淋巴细胞Fas的表达水平,分析其对患者脓毒症风险的预测价值。方法:回顾性分析2020年11月-2023年11月我院收治的126例急腹症患者的临床资料,所有患者基线资料与各指标的检测结果等资料基本完整,根据治疗期间是否并发脓毒症,将其分为脓毒症组(n=47)与非脓毒症组(n=79),比较两组各指标检测结果,并通过受试者工作特征(ROC)曲线分析,探讨各指标的预测价值。结果:脓毒症组的Fas、WBC、PCT、HBP水平均高于非脓毒症组(P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,HBP的曲线下面积(AUC)最大,为0.933,PCT、Fas、WBC的AUC值依次为0.853、0.811、0.749。采用HBP指标预测患者脓毒症风险,最佳截断值为80.900ng/mL,对应敏感度及特异度分别为85.1%、96.2%。结论:在急腹症患者中,HBP、PCT、WBC以及Fas表达水平对脓毒症风险具有一定的预测价值,临床应对入院后相关指标的检测结果引起高度重视。

关键词： 胸腔镜肺癌根治术   肺部感染   病原菌   微小RNA-1323/白细胞介素-6   白细胞介素-23/白细胞介素-17  

摘要： 目的探讨胸腔镜肺癌根治术后肺部感染病原菌及微小RNA-1323/白细胞介素-6(miR-1323/IL-6)、IL-23/IL-17表达。方法选择2019年1月-2023年11月徐州医科大学附属医院实施胸腔镜肺癌根治术治疗且术后发生肺部感染的110例肺癌患者作为感染组,根据术后6个月后的预后情况分组,另选取同期实施胸腔镜肺癌根治术治疗且术后未发生肺部感染的110例肺癌患者作为未感染组。采集胸腔镜肺癌根治术后肺部感染患者痰液进行病原学检测,统计其病原菌构成。对比感染组与未感染组、胸腔镜肺癌根治术后肺部感染患者不同预后分组miR-1323/IL-6、IL-23/IL-17表达,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-1323/IL-6、IL-23/IL-17评估胸腔镜肺癌根治术后肺部感染患者短期预后的预测效能。结果感染组外周血miR-1323相对表达量、血清IL-6、IL-23、IL-17水平高于未感染组(P<0.05);110例胸腔镜肺癌根治术后肺部感染患者痰液中检出125株病原菌,革兰阴性菌占73.60%(92/125),革兰阳性菌占20.80%(26/125),真菌占比5.60%(7/125);110例胸腔镜肺癌根治术后肺部感染患者预后不良32例,预后良好78例,预后不良组外周血miR-1323相对表达量、血清IL-6、IL-23、IL-17水平高于预后良好组(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,外周血miR-1323、血清IL-6、IL-23、IL-17联合检测对胸腔镜肺癌根治术后肺部感染患者预后的曲下线面积(AUC)为0.944,敏感度和特异度分别为90.60%、87.20%,均高于各指标单独检测(P<0.05)。结论胸腔镜肺癌根治术后肺部感染的病原菌以革兰阴性菌居多,外周血miR-1323、血清IL-6、IL-23、IL-17在胸腔镜肺癌根治术后肺部感染患者中高表达,各指标联合检测对患者预后具有更高预测效能。

关键词： 乳腺癌   靶向治疗   单克隆抗体   酪氨酸激酶抑制剂  

摘要： 乳腺癌严重影响着现代女性的身体健康,其中人表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2,HER2)阳性乳腺癌以其高复发风险、预后差及侵袭性强等特点显得尤为棘手。传统治疗手段(手术、化疗、放疗)存在局限性,靶向疗法作为新兴肿瘤治疗手段,具有精准、高效、对健康组织伤害小的优势。本综述聚焦于单克隆抗体、酪氨酸激酶抑制剂等前沿治疗手段,全面阐述了针对HER2阳性乳腺癌靶向疗法的进展与展望。在单克隆抗体疗法中,曲妥珠单抗辅助治疗HER2阳性早期乳腺癌可提高无病生存率、降低死亡风险;帕妥珠单抗联合治疗HER2阳性转移性及淋巴结阳性乳腺癌,能提高总生存率和无病生存期;马吉妥昔单抗安全性与曲妥珠单抗相当。酪氨酸激酶抑制剂方面,拉帕替尼联合治疗可带来生存获益,奈拉替尼辅助治疗能降低早期患者术后复发风险,图卡替尼对伴有脑转移的HER2阳性乳腺癌患者在总生存期等方面改善明显。综合各种治疗方案,为HER2阳性乳腺癌患者提供更精准有效治疗方案。未来研究应聚焦克服耐药性、优化联合治疗方案和降低不良反应等,以改善患者预后和生活状况。

关键词： direct-acting antivirals   hepatitis C virus infection   relapse   single nucleotide polymorphisms   sustained virological response  

摘要： Cytokines are crucial in controlling inflammation during viral infection, particularly infection with the hepatitis C virus (HCV). Cytokine genetic polymorphisms can change how the immune system responds to this infection. We investigated how the HCV infection treatment was affected by single nucleotide polymorphisms in these genes. The goal of this study was to examine any connections between the cytokine gene polymorphisms for interleukins (IL)-22-binding protein rs6570136, as well as IL-10 rs1800872 and rs1878672 in the Pakistani population and responsiveness to direct-acting antivirals (DAAs) treatment. This study evaluated 155 participants, which included 55 patients who achieved sustained virologic response (SVR), 40 relapse patients, and 60 healthy controls, to assess and compare the clinical parameters. The SVR and relapse groups were compared for their allelic and genotypic frequencies. We discovered that the SVR and the relapse groups had significantly different genotype frequencies for IL-10 rs1800872 and IL-22BP rs6570136 in the Pakistani population. The G/G genotype in rs6570136 and A/A genotype in rs1800872 were significantly associated with relapse following DAA therapy, with P values 0.002 and 0.0004, respectively. In contrast, rs1878672 showed no significant correlation with HCV relapse, P = 0.63.

关键词： 过敏性紫癜   正五聚蛋白3   CXC趋化因子配体16   T淋巴细胞亚群   诊断价值  

摘要： 目的:探究正五聚蛋白3(PTX3)、CXC趋化因子配体16(CXCL16)联合T淋巴细胞亚群在过敏性紫癜(HSP)患儿诊断中的价值。方法:选取我院从2020年10月-2022年10月收治的120例HSP患儿作为研究组。另取同期健康体检儿童100例记作健康体检组。对比两组血清PTX3、CXCL16与T淋巴细胞亚群指标水平。此外,将HSP患儿按照病情严重程度的差异分作轻度组(n=47)、中度组(n=42)及重度组(n=31)。对比三组血清PTX3、CXCL16与T淋巴细胞亚群指标水平。结果:研究组血清PTX3、CXCL16水平均高于健康体检组(均P<0.05)。研究组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均低于健康体检组,而CD8^(+)水平高于健康体检组(均P<0.05)。重度组患儿血清PTX3、CXCL16水平均高于轻度组与中度组,且中度组高于轻度组(均P<0.05)。重度组患儿CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均低于轻度组与中度组,且中度组低于轻度组;重度组患儿CD8^(+)水平高于轻度组与中度组,且中度组高于轻度组(均P<0.05)。结论:PTX3、CXCL16联合T淋巴细胞亚群作为HSP病情发生、发展的重要监测指标,在临床诊断及病情严重程度评估方面具有重要作用。