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关键词： 白细胞衍生性指标   25羟基维生素D   免疫球蛋白   过敏性紫癜   病情进展   诊断  

摘要： 目的:分析白细胞衍生性指标、25羟基维生素D、免疫球蛋白在过敏性紫癜患儿中的检测意义。方法:选取2021年至2024年我院收治的89例过敏性紫癜患儿,将其分为病例组,另取同期89名在我院体检的健康志愿者为对照组。检测其白细胞衍生指标[淋巴细胞与单核细胞比值(Ratio of lymphocytes to monocytes,LMR)、血小板与淋巴细胞比值(Platelet to lymphocyte ratio,PLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(Neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)]、25羟基维生素D[25 hydroxyvitamin D,25-(OH)D]及免疫球蛋白[免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)G、IgA、IgM、补体C3、补体C4]水平,建立受试者工作特征(ROC)曲线,分析白细胞衍生性指标、25羟基维生素D、免疫球蛋白对过敏性紫癜的诊断价值。随后依照患儿病情严重程度将其分为轻度组(31例)、中度组(37例)及重度组(21例),比较其白细胞衍生指标、25-(OH)D及免疫球蛋白水平,采用Logistic回归分析过敏性紫癜疾病进展影响因素。结果:病例组患儿LMR、PLR、NLR水平高于对照组(P<0.05);病例组患儿25-(OH)D低于对照组(P<0.05),IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4水平高于对照组(P<0.05);血清白细胞衍生性指标、25羟基维生素D、免疫球蛋白的联合诊断灵敏度、特异度均明显高于单一指标诊断(P<0.05);重度组患儿LMR、PLR、NLR水平高于中度组与轻度组(P<0.05);重度组患儿25-(OH)D低于中度组与轻度组(P<0.05),IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4水平高于对照组(P<0.05);LMR、PLR、NLR、25-(OH)D、IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4均为过敏性紫癜疾病进展的影响因素(P<0.05)。结论:白细胞衍生性指标、25羟基维生素D及免疫球蛋白联合在过敏性紫癜诊断方面具有较高特异度和灵敏度,且对过敏性紫癜疾病进展预测有较高临床价值。

关键词： 异基因造血干细胞移植   新鲜脐血移植   β重型地中海贫血   移植物抗宿主病   儿童  

摘要： 背景:异基因造血干细胞移植是目前根治重型地中海贫血最有效的方法,然而仅有不到一半的患者能找到相合的骨髓或外周血干细胞。同胞来源脐血干细胞与骨髓和外周血干细胞具有不同的特征,是重型地中海贫血患者移植治疗的一种潜在造血干细胞替代来源。目的:探讨应用人类白细胞抗原相合同胞新鲜脐血移植治疗儿童β重型地中海贫血的疗效。方法:选择2010年6月至2020年6月南方医科大学南方医院收治的β重型地中海贫血患儿48例,男28例,女20例,中位年龄4岁,均接受人类白细胞抗原相合同胞新鲜脐血移植治疗,脐血移植前均采用清髓性不含抗胸腺细胞球蛋白的预处理方案,脐血移植后均采用环孢素A+吗替麦考酚酯+/-短程甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病。结果与结论:(1)48例患儿输注的总有核细胞中位数为8.17×10^(7)/kg,输注的CD34^(+)细胞中位数为2.40×10^(5)/kg,脐血移植后中位随访时间98个月,44例植入成功,粒细胞和血小板植入中位时间分别为28 d和31 d,其中37例移植后植入证据检测为供者型完全嵌合,7例移植后早期检测为供受者稳定混合嵌合;(2)44例植入成功患儿中,4例发生急性移植物抗宿主病,分别为Ⅰ级(n=2)和Ⅱ级(n=2),受累器官均为皮肤,均未发生慢性移植物抗宿主病;(3)脐血移植后,48例患儿中5例发生巨细胞病毒感染及激活,12例发生败血症,3例发生侵袭性真菌病,21例发生口腔炎,8例发生出血性膀胱炎,1例发生肝静脉闭塞;(4)48例患儿中,47例存活,1例在移植后28 d因重症肺炎合并急性心力衰竭死亡,43例无病存活,3例发生原发性植入失败,1例发生移植后全血细胞减少,5年总生存率和无病生存率分别为98%和89%,1年时移植相关死亡的累计发病率为2.1%;(5)结果显示,人类白细胞抗原相合同胞新鲜脐血移植治疗儿童β重型地中海贫血的效果良好,移植物抗宿主病的发生风险低。

关键词： 牛巴贝斯虫   球状体蛋白2   生物信息学分析   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 【目的】探究牛巴贝斯虫(Babesia bovis)SBP2蛋白(spherical body protein 2,SBP2)的生物信息学特征并进行原核表达及多克隆抗体制备,为牛巴贝斯虫疫苗和诊断抗原筛选提供理论依据。【方法】对牛巴贝斯虫SBP2基因进行扩增和克隆,运用Mega7.0构建牛巴贝斯虫SBP2蛋白系统进化树,利用IEDB Analysis Resource等生物信息学方法对牛巴贝斯虫SBP2蛋白的磷酸化位点和B细胞抗原表位进行预测分析;对SBP2蛋白与弓形虫致密颗粒蛋白(GRA)的氨基酸序列比对分析;构建原核表达载体p ET-28a-SBP2,诱导表达SBP2重组蛋白并进行蛋白纯化,通过Western blotting验证SBP2重组蛋白反应原性;以SBP2重组蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并利用间接ELISA方法检测其效价。【结果】系统进化树显示,本研究牛巴贝斯虫SBP2蛋白与泰国株(OM46855)的氨基酸序列亲缘关系最近。生物信息学分析显示,SBP2蛋白包含17个B细胞抗原表位和31个磷酸化位点,其中包括12个丝氨酸位点、14个苏氨酸位点及5个酪氨酸位点。牛巴贝斯虫SBP2蛋白氨基酸序列与弓形虫GRA蛋白之间有很强的相关性。成功构建了重组质粒p ET-28a-SBP2;Western blotting结果显示,SBP2重组蛋白分子质量大小约为35ku,具有良好的反应原性;制备的多克隆抗体效价为1∶204800。【结论】本研究通过预测牛巴贝斯虫SBP2蛋白生物学特性,加深了对SBP2蛋白的认识,利用原核表达系统成功获得牛巴贝斯虫SBP2重组蛋白,并获得其小鼠源多克隆抗体,为进一步研究SBP2功能及其在牛巴贝斯虫致病机制中的作用奠定了基础。

关键词： 系统性红斑狼疮   骨质疏松   白细胞介素-6   肿瘤坏死因子-α  

摘要： 系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus, SLE)是一种好发于育龄期女性自身免疫介导的慢性弥漫性结缔组织病,可产生多种自身抗体,累及全身多系统、多器官,临床表现复杂多样。骨质疏松(Osteoporosis, OP)是SLE常见并发症之一,众多细胞因子在其发生过程中发挥了重要作用。有研究发现,白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)均可通过抑制核因子-κB受体活化因子(RANK)信号通路促进破骨细胞的增殖和分化。

关键词： 脓毒血症   急性肾损伤   白细胞介素-10   可溶性白细胞分化抗原14亚型   预测价值  

摘要： 目的 探究血清白细胞介素-10(IL-10)、可溶性白细胞分化抗原14亚型(Presepsin)对脓毒血症并发急性肾损伤(AKI)的预测价值。方法 选择2021年8月至2024年7月阜阳市妇女儿童医院就诊的136例脓毒血症患者记为研究组,另选同期145例在本院体检的健康受试者为对照组,根据研究组患者是否发生AKI分为非AKI组和AKI组。根据AKI分级标准将AKI组分为Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测所有受试者IL-10、Presepsin、降钙素原(PCT)水平、C反应蛋白(CRP)水平,血液分析仪检测白细胞(WBC)水平,生化分析仪检测清蛋白(ALB)、肌酐(Scr)水平,并计算患者估算肾小球滤过率(eGFR)。急性生理与慢性健康评估系统(APACHEⅡ)评分评估脓毒血症患者病情严重程度,序贯器官衰竭评估(SOFA)评分评估患者器官衰竭程度。多因素logistic回归分析脓毒血症患者发生AKI的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析IL-10、Presepsin水平对脓毒血症患者发生AKI的预测价值。结果 与对照组相比,研究组IL-10、Presepsin水平较高(P<0.05);与非AKI组相比,AKI组SOFA评分及Scr、IL-10、Presepsin水平较高,而eGFR较低(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组血清IL-10、Presepsin水平依次升高(P<0.05);SOFA评分、IL-10、Presepsin为脓毒血症患者发生AKI的独立危险因素(P<0.05);IL-10、Presepsin单独预测脓毒血症患者发生AKI的曲线下面积(AUC)为0.819、0.822,联合预测的AUC为0.936,优于各自单独预测(P<0.05)。结论 脓毒血症患者IL-10、Presepsin水平较高,是AKI发生的独立影响因素,二者联合预测AKI的发生优于单独预测。

关键词： 慢性乙型肝炎   乙肝e抗原   乙肝e抗体   复方甘草酸苷片   恩替卡韦   肝功能   临床转归  

摘要： 目的:分析复方甘草酸苷片联合恩替卡韦治疗乙肝e抗原(HBeAg)/乙肝e抗体(HBeAb)双阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的临床效果。方法:选取肇庆市第一人民医院2022年2月—2024年6月收治的200例HBeAg/HBeAb双阳性CHB患者,通过随机数字表法将患者分为对照组(100例,接受恩替卡韦治疗)和观察组(100例,采用复方甘草酸苷片联合恩替卡韦治疗)。比较两组患者临床疗效、肝功能指标及临床转归。结果:观察组临床总有效率高于对照组(P=0.038);治疗后,观察组血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶和总胆红素水平低于对照组(P<0.001);观察组“小三阳”“小二阳”占比高于对照组,“大三阳”占比低于对照组(P<0.05)。结论:复方甘草酸苷片联合恩替卡韦治疗HBeAg/HBeAb双阳性CHB的效果显著,可显著改善患者肝功能,且对临床转归具有积极调控作用。

关键词： 免疫组化   抗原修复   pH   背景着色  

摘要： 目的 探讨抗原修复时间及修复液pH值对Pax-8和CD10免疫组化染色效果的影响。方法 选取肾脏、肝脏手术标本各15份(15例),采用免疫组化EnVision二步法对肾组织Pax-8和肝组织CD10分别进行pH8.0和pH9.0抗原修复,修复时间为1.5 min、2 min、2.5min及3 min,染色后由病理医师进行盲法阅片及评价。结果 Pax-8和CD10在两组修复液中细胞阳性表达均良好(P<0.05)。肾组织Pax-8抗体染色经双因素方差分析显示修复液pH值主效应显著(P<0.01,偏η^(2)=0.424),pH8.0修复液修复1.5 min、2 min、2.5 min及3 min组背景染色均浅于pH值9.0各组,差异具有统计学意义(P<0.01),修复时间及交互效应差异均无统计学意义。肝组织CD10抗体染色经双因素方差分析显示修复液pH主效应显著(P<0.01,偏η^(2)=0.076),修复时间主效应不显著(P>0.05),而两者交互效应显著(P<0.05,偏η^(2)=0.068),经pH8.0修复液修复1.5 min组背景着色显著浅于pH9.0修复1.5 min组(P<0.01),pH值8.0修复液修复组各时间点间背景着色无统计学差异(P>0.05),经pH9.0修复液修复时,随着修复时间的延长,染色背景逐渐降低,3 min组背景最浅(P<0.05)。结论 肾组织Pax-8染色背景与抗原修复时间无关,pH8.0修复液修复可降低染色背景。随着修复液pH值的变化,肝组织CD10染色时修复时间应进行适当调整,pH8.0和pH9.0的修复时间分别宜为1.5 min和3 min。

关键词： 乳腺癌   IL-32   信号通路  

摘要： 目的:探讨白细胞介素-32(interleukin-32,IL-32)在4T1小鼠乳腺癌模型中的作用及机制。方法:4T1小鼠乳腺癌细胞株皮下注射至BALB/c小鼠右侧腋下。IL-32短发夹RNA(IL-32 shRNA)慢病毒肿瘤局部注射,观察肿瘤生长情况,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色法观察肿瘤组织形态学特征,免疫组织化学检测细胞核增殖抗原Ki-67表达。蛋白免疫印迹法Western Blot观察磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)蛋白表达。结果:与对照组(control,Ctrl)组及阴性对照shRNA组(negative control shRNA,NC shRNA)相比,IL-32 shRNA组的小鼠肿瘤生长相对缓慢,肿瘤体积小、重量低(P<0.05)。形态学分析发现IL-32 shRNA组小鼠乳腺癌组织中细胞增殖数量少,可见固缩状态;Ki-67表达低于Ctrl组。Western blot结果显示,IL-32 shRNA组IL-32低表达,p110、p85、p-Akt蛋白水平低于对照组(P<0.05)。结论:IL-32 shRNA能够抑制小鼠4T1移植瘤的生长,机制相关于调控PI3K/Akt信号。提示IL-32参与乳腺癌进展,针对IL-32可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。

关键词： 过敏性哮喘   医药共管   抗IgE单克隆抗体   奥马珠单抗  

摘要： 目的进一步规范抗IgE单克隆抗体治疗过敏性哮喘的合理应用。方法通过系统检索和临床经验总结抗IgE单克隆抗体治疗管理的相关问题,按照证据分级进行质量评价,并运用德尔菲法就共识建议达成共识,形成《抗IgE单克隆抗体治疗过敏性哮喘的医药共管专家共识》(简称《共识》)。结果《共识》以奥马珠单抗为代表,形成了12条建议,涵盖了医药共管的工作模式、工作路径、分级诊疗和培训考核等内容,明确奥马珠单抗治疗过敏性哮喘医药共管的规范化管理路径。结论该《共识》为药师参与奥马珠单抗治疗过敏性哮喘的管理提供切实有效的建议,有助于提高患者的用药依从性和疾病预后,实现抗IgE单克隆抗体的医疗价值。