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关键词： 细胞免疫   胞内细胞因子染色   方法验证  

摘要： 目的对胞内细胞因子染色法检测抗原特异性T细胞免疫反应的方法进行验证。方法以重组带状疱疹病毒gE蛋白为抗原免疫小鼠,取小鼠脾脏淋巴细胞,通过细胞表面抗原和细胞内细胞因子染色进行细胞免疫反应评价。从专属性、重复性、批间精密度、区间精密度、稳定性五个指标进行方法验证。结果无肽刺激条件下免疫组小鼠和PBS组小鼠细胞因子CD4^(+)TNF-α、CD4^(+)IFN-γ、CD4^(+)IL-2均不表达,肽库刺激条件下PBS组小鼠细胞因子CD4^(+)TNF-α、CD4^(+)IFN-γ、CD4^(+)IL-2不表达,但免疫组小鼠细胞因子CD4^(+)TNF-α、CD4^(+)IFN-γ、CD4^(+)IL-2阳性表达。重复性、区间精密度、批间精密度和稳定性考察结果的CV值均小于20%。结论方法有良好的专属性,重复性、批间精密度、区间精密度和稳定性均符合要求。

关键词： Immunotherapy   Lung Cancer   Tumor infiltrating lymphocyte - TIL  

摘要： Background A subset of CD4+ T cells with cytotoxic activity has been identified, and these cells exert their effects by expressing perforin and granzymes. Despite the progress made in characterizing cytotoxic CD4+ T cells in various diseases, the status of cytotoxic CD4+ T cells in non-small cell lung cancer (NSCLC) and the underlying mechanisms involved in promoting intratumoral cytotoxic CD4+ T-cell activation remain *** We used flow cytometry to examine the phenotypic and functional properties of CD4+GzmB+ T cells in the peripheral blood and tumor tissues of patients with NSCLC. Loss-of-function analyses and RNA sequencing were used to identify the underlying mechanisms involved in the effects of interleukin (IL)-15 on the restoration of CD4+GzmB+ T-cell function in vitro. A patient-derived lung cancer explant model and an animal model were used to verify the effects of immune checkpoint inhibitors on CD4+GzmB+ T-cell *** In patients with NSCLC, impaired cytolytic function of tumor-infiltrated granzyme B (GzmB)-expressing CD4+ T cells was restored by IL-15 through activation of the AKT-FOXO1-T-bet axis. Moreover, IL-15 stimulation increased solute carrier family 7 member 5 (SLC7A5) expression in CD4+GzmB+ T cells in an Protein Kinase B (AKT)-dependent manner, and inhibition of SLC7A5 abrogated the effect of IL-15 on CD4+GzmB+ T cells. Additionally, we showed that the immune checkpoint molecules programmed cell death-1 (PD-1) and CD85j were mutually exclusively expressed in CD4+GzmB+ T cells and that dual targeting of PD-1 and CD85j enhanced the effector function of CD4+GzmB+ T cells by activating the AKT pathway. Notably, tumor cells expressing major histocompatibility complex (MHC)-II and IL-15 determine the effectiveness of CD4+GzmB+ T-cell-mediated antitumor immunity in response to *** Our study demonstrated that tumor-infiltrating CD4+GzmB+ T cells fail to eliminate tumors. Dual blockade of PD-1 and CD85j along

关键词： 急性缺血性脑卒中   氧化三甲胺   中性粒细胞与淋巴细胞比值   诊断   肠道微生物代谢产物   动脉粥样硬化   受试者工作特征曲线   高效液相色谱串联质谱法  

摘要： 目的探讨外周血氧化三甲胺(TMAO)联合中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)在急性缺血性脑卒中(AIS)患者中的诊断价值。方法选取100例AIS患者为研究组,100例同期体检的非卒中患者为对照组,采集所有研究对象的血液样本,采用高效液相色谱串联质谱法测定血浆TMAO水平。比较2组TMAO水平及NLR,应用Spearman相关分析、多因素Logistic回归分析、受试者工作特征(ROC)曲线评估TMAO、NLR在AIS中的诊断价值。结果与对照组比较,AIS组TMAO水平、NLR上升,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,TMAO、NLR与AIS的发生呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic分析显示,年龄、TMAO、NLR、高血压是AIS发生的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,TMAO、NLR预测AIS的最佳截断值分别为3.749μmol/L、2.210,TMAO联合NLR预测AIS的曲线下面积为0.902,高于TMAO或NLR单独诊断(0.808、0.801),且联合预测的约登指数更大。结论外周血TMAO和NLR与AIS的发生呈正相关,且TMAO联合NLR能明显提高AIS的诊断效能,为临床早期识别AIS提供依据。

关键词： 肺心病   炎症   中性白细胞   淋巴细胞   血小板  

摘要： 目的:分析老年慢性肺源性心脏病(CPHD)患者外周血系统免疫炎症指数(SII)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)与病情程度及预后的关系。方法:纳入2021年9月-2023年1月宣城市中心医院收治的180例老年CPHD患者(病例组),选择同期于本院进行体检的健康志愿者作为对照组(n=50),根据28d预后情况将病例组分为死亡组(n=45)和生存组(n=135)。比较各组SII、NLR、PLR;Spearman法分析CPHD患者外周血SII、NLR、PLR与心功能分级及预后的相关性;多因素Logistic回归分析影响老年CPHD患者死亡的危险因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析SII、NLR、PLR对老年CPHD患者死亡的预测价值。结果:与对照组比较,病例组外周血SII、NLR、PLR水平显著升高(P均<0.001)。与纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级Ⅱ级组、Ⅲ级组比较,Ⅳ级组外周血SII[(1759.87±179.43)比(1148.33±121.57)比(1392.44±146.36)]、NLR[(8.65±0.89)比(7.14±0.75)比(7.76±0.81)]、PLR[(152.45±16.79)比(125.29±13.46)比(138.77±13.58)]均显著升高;且Ⅲ级组外周血SII、NLR、PLR均显著高于Ⅱ级组(P均<0.001)。与生存组比较,死亡组的外周血SII[(1723.86±189.65)比(1296.81±142.33)]、NLR[(8.24±0.89)比(7.63±0.78)]、PLR[(148.75±15.26)比(134.41±14.58)]显著升高(P均<0.001)。Spearman相关分析显示,外周血SII、NLR、PLR水平与患者病情严重程度(r=0.336~0.432,P<0.05或<0.01)及预后不良呈正相关(r=0.319~0.504,P<0.05或<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,外周血SII、NLR、PLR、吸烟史是老年CPHD患者死亡的独立危险因素(OR=1.024~9.514,P<0.05或<0.01);ROC曲线显示,SII、NLR、PLR联合预测老年CPHD患者死亡的曲线下面积(AUC)为0.979(95%CI 0.946~0.995),显著高于均高于各单独检测[SII:0.847(95%CI 0.786~0.896),NLR:0.832(95%CI 0.769~0.883),PLR:0.881(95%CI 0.825~0.925),Z=3.988,4.386,4.217,P均<0.01]。列线图校准曲线、决策曲线表明该模型具有良好的一致性和净收益。结论:外周血SII、NLR、PLR与老年CPHD患者病情程度及预后相关,对患者预后有一定的预测价值。

关键词： 严重创伤   大量输血   凝血功能   血清白细胞介素-6  

摘要： 目的:探讨严重创伤患者大量输血前后凝血功能、血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、可溶性白介素-2受体(sIL-2R)水平变化及意义。方法:选取2022年10月—2023年9月河南省漯河市医学高等专科学校第二附属医院收治的50例严重创伤患者作为研究对象,对比患者大量输血前后凝血功能指标、血清IL-6、IL-10及sIL-2R水平变化情况,并分析以上指标与大量输血的相关性。结果:输血前后患者凝血功能指标有一定变化,其中凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)输血后均长于输血前,而输血后不同时间对比,其中输血3 d后以上指标更长,纤维蛋白原(FIB)及血小板计数(PLT)水平输血后均低于输血前,而输血后不同时间对比,其中输血3 d后以上指标更低,差异均有统计学意义(F=159.983、184.764、150.693、136.547、1209.002,P<0.001);患者输血前后钾离子及钠离子变化显著,输血1 d及3 d后,钾离子水平高于输血前,且输血3 d后钾离子水平高于输血1 d后,钠离子低于输血前,且输血3 d后钠离子水平低于输血1 d后,差异均有统计学意义(F=11.252、200.733,P<0.001);患者输血前后血清IL-6、IL-10及s IL-2R水平变化显著,输血1 d及3 d后,钾离子水平高于输血前,且输血1 d后以上指标高于输血3 d后,差异均有统计学意义(F=969.690、297.761、224.263,P<0.001);Pearson线性分析可知,严重创伤患者大量输血与PT、APTT TT、IL-6、IL-10及sIL-2R呈正相关(r=0.423、0.523、0.417、0.423、0.323、0.412,P<0.001),与FIB及PLT呈负相关(r=-0.378、-0.223,P<0.05)。结论:大量输血可帮助严重创伤患者尽快恢复其血容量,但其凝血功能指标及血清IL-6、IL-10、sIL-2R水平会出现一定变化,因此大量输血时医护人员要对以上指标进行动态监测,以防出现凝血功能障碍及免疫抑制,威胁生命安全。

关键词： 定性研究   急性淋巴细胞白血病   化疗相关性口腔黏膜炎   照顾者   照护需求  

摘要： 目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿住院治疗并发化疗相关性口腔黏膜炎(CTOM)后主要照顾者的照护需求,为提升主要照顾者照护能力、促进患儿病情恢复提供依据。方法采用质性研究中的现象学研究方法,使用目的抽样法选择2022年9月至2023年8月中山市人民医院10名发生CTOM的ALL患儿主要照顾者进行半结构化深度访谈。采用Colaizzi分析法对访谈资料进行分析。结果10例患儿中,男5例,女5例,年龄3~13岁;10名主要照顾者中,男3名,女7名,年龄31~44岁。主要照顾者照护需求提炼为4个主题,即伤口护理能力需求(积极的口腔清洁及卫生保持、缺乏伤口观察能力、期待更有效的新药);疾病相关知识需求(缺乏CTOM发病相关知识、缺乏护理及用药知识、多渠道寻求信息);营养知识及饮食护理能力需求(积极的营养补充意识、饮食选择受限、缺乏具体的营养知识);社交网络和心理支持需求(主要照顾者网络的经验分享、主要照顾者网络的心理支持)。结论主要照顾者在ALL并发CTOM患儿的照护过程中存在护理知识和实践技能需求、社会支持需求等诸多问题,医护专业人员应给予足够重视,从专业资源、医院管理资源及社会资源方面提供必要的支持和协助。

关键词： 宫颈癌   宫颈上皮内瘤变   白介素-6/信号转导和转录激活因子3通路   人乳头瘤病毒感染  

摘要： 目的探讨宫颈组织中白介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路相关蛋白表达与宫颈癌(CC)恶性进展及人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法选取2019年1月至2023年12月上海市徐汇区中心医院收治的57例CC患者作为CC组,43例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者作为CIN组,并纳入同期30例液基薄层细胞检测结果异常的经活检证实为慢性宫颈炎的患者作为慢性宫颈炎组。采用免疫组织化学法检测三组宫颈组织中IL-6、STAT3相关蛋白表达情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HPV 16/18感染情况。比较三组宫颈组织中IL-6、STAT3相关蛋白阳性表达率、HPV 16/18感染率,采用Spearman法分析宫颈组织中IL-6、STAT3相关蛋白阳性表达与宫颈病变恶性程度及HPV 16/18感染的相关性。结果CC组宫颈组织中IL-6、STAT3相关蛋白阳性表达率高于CIN组及慢性宫颈炎组,CIN组高于慢性宫颈炎组(P<0.05)。宫颈组织中IL-6、STAT3相关蛋白阳性表达与宫颈病变恶性程度呈正相关(P<0.05)。CC组HPV 16/18感染率高于CIN组及慢性宫颈炎组,CIN组高于慢性宫颈炎组(P<0.05)。宫颈组织中IL-6、STAT3相关蛋白阳性表达与HPV 16/18感染呈正相关(P<0.05)。结论IL-6/STAT3信号通路可促进CC恶性进展,且随着宫颈病变恶性程度进展和HPV 16/18感染率上升,IL-6/STAT3异常表达也随之升高。

关键词： 雷公藤甲素   阿糖胞苷   间充质干细胞   PI3K/Akt   急性B淋巴细胞白血病   逆转耐药  

摘要： 目的 探讨低浓度雷公藤甲素(Triptolide,TPL)逆转骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导急性B细胞淋巴细胞白血病(B-ALL)耐药的作用及其分子机制。方法 建立B-ALL细胞株Nalm6和ALL患者MSCs共培养模型,分别以TPL、阿糖胞苷(AraC)单药或者联合处理共培养模型。分离Nalm6和MSCs细胞,CCK-8法检测细胞增殖,用AnnexV-PI试剂盒检测细胞凋亡,Western blot检测MSCs细胞PI3K/Akt信号通路蛋白表达,流式细胞术检测MSCs细胞膜表面VCAM-1表达。结果 AraC作用MSCs共培养的Nalm6细胞48 h的IC_(50)显著高于Nalm6细胞(P<0.001),作用MSCs共培养的Nalm6细胞72 h的凋亡率显著低于Nalm6细胞(P<0.001)。IC_(20)浓度TPL(2 nmol/L)联合AraC作用MSC共培养Nalm6细胞48 h的IC_(50)显著低于AraC单药(P<0.001)。低浓度TPL(2 nmol/L)联合低浓度AraC(0.2μmol/L)作用MSCs共培养的Nalm6细胞48 h的凋亡率显著高于AraC单药和TPL单药(P<0.001)。Western blot显示,TPL与AraC两药联合组MSCs细胞PI3K/Akt通路蛋白PI3Kp110δ、p-AKT、p-GSK-3β较单药组和对照组显著下调。两药联合组MSCs的VCAM-1表达水平显著低于TPL组,AraC组和对照组。结论 低浓度TPL可能通过抑制MSCs内PI3K/Akt-VCAM-1信号通路,增强AraC对B-ALL的杀伤。

关键词： 肺炎   肺炎支原体   维生素D   阿奇霉素   炎症反应   免疫功能  

摘要： 目的探讨维生素D滴剂联合阿奇霉素治疗小儿肺炎支原体肺炎(MPP)的疗效及作用机制。方法选取2024年1月至12月四川省人民医院儿科收治的MPP患儿148例为研究对象。按照患者意愿采用不同治疗方案,将患儿分为对照组与观察组,每组74例。对照组静脉滴注阿奇霉素,先按10 mg/kg剂量连续5 d静脉滴注,然后停药4 d,改为口服阿奇霉素片,按10 mg/(kg·d),连续服用3 d治疗;观察组在对照组基础上加用维生素D滴剂(400 U/次,每天1次)。2组均治疗12 d。对比2组临床疗效,记录患儿症状缓解时间;于治疗前后,对患儿血清C反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素6(IL-6)和外周血CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞百分比水平进行检测。结果观察组总有效率(95.95%)高于对照组(86.49%),(P<0.05);观察组与对照组比较,退热时间、咳嗽消失时间、肺部湿啰音消失时间缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,与对照组比较,观察组血清CRP、LDH、IL-6水平较低(P<0.05),CD4^(+)T细胞百分比水平和CD4^(+)/CD8^(+)比值较高(P<0.05)。结论维生素D滴剂联合阿奇霉素能够促进患儿症状缓解,对小儿MPP有较好疗效,其机制可能与减轻炎症和提升免疫相关。