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关键词： 口蹄疫病毒   Asia1型   猪源单克隆抗体   抗原表位  

摘要： Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)仍然在我国周边国家存在,对我国畜牧业造成长期威胁。本研究旨在利用单个B细胞抗体技术研制Asia1型FMDV的中和性单克隆抗体,以此为工具,鉴定Asia1型FMDV的保护性抗原位点。以FMDV Asia1/JS/05为诱饵抗原,通过流式细胞术分选免疫猪PBMCs中的抗原特异性B细胞,通过巢式PCR扩增单个B细胞IgG抗体重链与轻链可变区基因序列,分别构建IgG抗体重链与轻链表达质粒,将其共转染CHO-S细胞进行抗体表达;通过间接ELISA、间接免疫荧光试验(IFA)、病毒中和试验(VNT)验证抗体反应性和中和活性,利用免疫印迹、中和抗体逃逸突变株筛选鉴定中和抗体所识别的抗原表位类型和抗原表位关键氨基酸。结果显示:获得了5株反应性良好的Asia1型FMDV特异性抗体,其中PD3和PD7为中和抗体,两株中和抗体识别相同表位,关键氨基酸为VP2蛋白72位残基(D)。本研究首次获得Asia1型FMDV特异性猪源中和抗体,鉴定VP272D是中和表位的关键氨基酸,进一步丰富了Asia1型FMDV抗原位点信息,为FMDV Asia1型分子疫苗和新诊断检测技术研究的奠定了基础。

关键词： 效应功能   程序性细胞死亡   细胞毒性   CD38   抗肿瘤免疫   基因模块   免疫机制   T细胞  

摘要： Relatlimab(rela,抗淋巴细胞激活基因-3)与nivolumab(nivo;抗程序性细胞死亡因子-1)联合用于治疗晚期黑色素瘤被证明是安全且有效的。该课题组设计了一项试验(NCT03743766),让晚期黑色素瘤患者接受rela、nivo或rela联合nivo,以探讨rela联合nivo的免疫机制。对这项正在进行的试验中的生物样本分析显示,rela联合nivo增强了CD8^(+)T细胞受体信号传导能力,并改变了CD8^(+)T细胞的分化,从而在保持耗竭特征下提高了细胞毒性。经过rela联合nivo治疗后,克隆扩展的CD8^(+)T细胞的效应功能上调。该研究结果发现,肿瘤内的rela联合nivo CD8^(+)T细胞特征与良好的预后相关联。此外,这一肿瘤内的rela联合nivo特征在外周血中也得到了验证,表现为CD38^(+)T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白-3^(+)CD8^(+)T细胞频率的升高。

关键词： 类风湿关节炎   感染   病原菌   耐药性   可溶性细胞间黏附分子   趋化因子C-X-C配体10   白细胞介素-17   诊断价值  

摘要： 目的探讨类风湿关节炎合并感染病原菌和血清可溶性细胞间黏附分子(SiCAM)、趋化因子C-X-C配体10(CXCL10)、白细胞介素(IL)-17表达及其诊断价值。方法选取2019年7月-2023年7月解放军联勤保障部队第970医院收治的62例类风湿关节炎合并感染患者为感染组和66例类风湿关节炎未发生感染患者为非感染组,分析病原菌分布特点及耐药性,比较两组血清SiCAM、CXCL10、IL-17表达,分析血清SiCAM、CXCL10、IL-17单独及联合检测对类风湿关节炎患者合并感染的诊断价值。结果62例类风湿关节炎合并感染患者共培养出78株病原菌,主要为大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌。大肠埃希菌对氨苄西林耐药严重,金黄色葡萄球菌对青霉素耐药严重。感染组血清SiCAM、CXCL10、IL-17表达高于非感染组(P<0.05)。血清SiCAM、CXCL10、IL-17指标联合检测对类风湿关节炎合并感染患者的诊断曲线下面积(AUC)值高于单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度为88.71%,特异度为90.91%。结论类风湿关节炎合并感染患者主要病原菌为大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌对氨苄西林耐药严重,金黄色葡萄球菌对青霉素耐药严重。类风湿关节炎合并感染患者血清SiCAM、CXCL10、IL-17呈高表达,且三指标联合检测对类风湿关节炎合并感染诊断价值高。

关键词： 卵巢癌   自然杀伤细胞   免疫细胞   免疫治疗  

摘要： 自然杀伤(NK)细胞是固有免疫细胞的重要组成部分,在肿瘤治疗领域具有重大潜力。NK细胞不仅可以直接识别卵巢癌细胞、利用强烈的细胞毒性作用杀灭卵巢癌细胞,还可以激活抗肿瘤免疫反应,间接发挥抗癌效应。目前,随着NK细胞过继回输和嵌合抗原受体(CAR)-NK细胞的研究快速发展,NK细胞免疫疗法已成为卵巢癌靶向治疗的重要策略。本文详细介绍了NK细胞的表型、免疫学特征和抗肿瘤机制。同时,从NK细胞过继回输、CAR-NK细胞疗法、抗体依赖细胞毒性(ADCC)途径和NK细胞活性调节等多方面综述了NK细胞免疫疗法在卵巢癌治疗中的最新进展,以期为NK细胞免疫疗法的临床应用提供理论依据。

关键词： 肺炎支原体感染   体液免疫   外周血T淋巴细胞亚群  

摘要： 目的:探讨在肺炎支原体感染患儿中外周血体液免疫指标、T淋巴细胞亚群的检测价值。方法:选取2021年2月—2023年5月安阳市妇幼保健院就诊的62例肺炎支原体感染患儿为研究组,另选同期在医院行健康体检的62例健康者作为对照组。采集所有受检者3 mL空腹静脉血检测外周血T淋巴细胞亚群、体液免疫及炎症反应指标,对比两组受检者各指标水平差异。结果:研究组患儿CD4^(+)T、CCD3^(+)T、CD4^(+)T/CD8^(+)T细胞比值较对照组低,CD8^(+)T较对照组高,差异有统计学意义(t=2.990、2.994、7.559、3.273,P<0.05);组间比较免疫球蛋白G(IgG)检测值,差异无统计学意义(t=1.007,P>0.05);与对照组相比,研究组患儿免疫球蛋白M(IgM)检测值较高,免疫球蛋白A(IgA)检测值较低,差异有统计学意义(t=7.793、4.496,P<0.05);研究组患儿肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)检测值较对照组高,白细胞介素-13(IL-13)、白细胞介素-10(IL-10)检测值较对照组低,差异有统计学意义(t=26.113、40.350、20.416、27.557,P<0.05)结论:肺炎支原体感染患儿机体存在免疫功能及炎症因子水平紊乱的情况,免疫功能及炎症反应可能与肺炎支原体感染发生存在一定关系,临床需加以重视。

关键词： 高龄妊娠   母胎界面   免疫调节   淋巴细胞亚群   蜕膜NK细胞   细胞因子  

摘要： 目的:观察高龄妊娠女性早孕期母体免疫环境的变化。方法:收集2024年1月至4月于重庆医科大学附属第三医院行早期人工流产的女性外周血及蜕膜组织,分为高龄组和对照组,其中高龄组蜕膜标本16例、外周血12例,对照组蜕膜标本23例、外周血13例。通过流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群:CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD19+B细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞以及蜕膜NK(decidual NK,d NK)细胞亚群:d NK1(CD103-CD18-CD39+)、d NK2(CD103-CD18+CD39-)、d NK3(CD103+CD18+CD39-)。并采用化学发光免疫分析技术,检测外周血血清中的细胞因子。结果:相较于对照组,高龄组外周血中CD3^(+)T细胞、CD19+B细胞、NK细胞数量和百分比无明显差异,但高龄组CD4^(+)T细胞占比[(40.25±6.40)%]较对照组[(35.29±3.95)%]增多(P=0.030),高龄组CD8^(+)T细胞占比[(21.83±6.20)%]较对照组[(26.69±4.76)%]减少(P=0.041);2组的d NK占总淋巴细胞的百分比无明显差异,d NK1及d NK2细胞亚群在蜕膜NK细胞中占比无明显差异,但高龄组的d NK3亚群占比[(45.21±11.40)%]相较于对照组[(22.93±6.93)%]明显增多(P<0.001)。高龄组血清细胞因子白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)水平低于对照组(P=0.017),同时干扰素γ(Interferon-γ,IFN-γ)水平也低于对照组(P=0.011),肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α TNF-α)水平高于对照组(P=0.014)。结论:高龄妊娠女性妊娠早期母体的免疫环境存在明显变化,d NK细胞亚群中d NK3细胞比例明显增高;外周血中存在CD4^(+)T细胞比例增多和CD8^(+)T细胞比例减少,IL-4和IFN-γ水平明显降低。

关键词： 脑胶质瘤   IDH1突变   替莫唑胺化疗   免疫细胞因子   预后  

摘要： 目的:研究异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变对替莫唑胺化疗治疗脑胶质瘤患者的临床疗效及其对免疫细胞因子、预后的影响。方法:选取2021年10月至2022年10月苏州大学附属独墅湖医院手术切除且经病理证实的脑胶质瘤患者134例作为研究对象,直接测序法测定IDH1突变情况,免疫组化测定脑胶质瘤组织IDH1表达。脑胶质瘤患者均进行替莫唑胺化疗,分析IDH1突变对替莫唑胺化疗治疗脑胶质瘤临床疗效、免疫细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10)及预后生存状态的影响。结果:134例脑胶质瘤组织中79例存在IDH1突变,突变位点多为R132,突变率为58.96%,显著高于正常脑组织(χ^(2)=48.066,P<0.05)。免疫组化显示,134例脑胶质瘤组织中56例IDH1强阳性表达。IDH1突变型组WHO分级Ⅳ级占比低于IDHI野生型组[11.39%(9/79) vs 63.64%(35/55),Z=41.020,P<0.05],IDH1突变型组低分化比例高于IDHI野生型组[50.63%(40/79) vs 20.00%(11/55),χ^(2)=12.907,P<0.05]。IDH1突变型组总有效率高于IDH1野生型组[91.14%(72/79) vs 76.36%(42/55),χ^(2)=5.575,P<0.05]。IDH1突变型组IFN-γ、IL-2水平高于IDH1野生型组[(28.98±3.25) pg/ml vs (20.15±2.54) pg/ml、(33.42±4.25) pg/ml vs (25.23±3.52) pg/ml,t=16.870、11.750, P<0.05],IL-4、IL-10水平低于IDH1野生型组[(7.90±1.02) pg/ml vs(12.38±1.66) pg/ml、(8.79±1.00) pg/ml vs (15.26±1.23) pg/ml,t=19.330、33.500,P<0.05]。IDH1突变与替莫唑胺化疗后IFN-γ、IL-2水平呈正相关(r=0.845、0.772,P<0.05),与替莫唑胺化疗后IL-4、IL-10水平呈负相关(r=-0.786、-0.685,P<0.05)。IDH1突变型组替莫唑胺化疗后生存率高于IDH1野生型组[89.87%(71/79) vs 72.70%(40/55),Log Rank检验χ^(2)=5.208,P<0.05]。Cox回归分析发现,WHO分级Ⅲ级(RR=1.342)、低分化(RR=1.783)、IFN-γ(RR=1.808)、IL-2(RR=2.112)、IL-4(RR=2.342)、IL-10(RR=1.342)为危险因素,替莫唑胺化疗有效(RR=0.653)、IDH1突变(RR=0.895)为保护因素,影响脑胶质瘤患者替莫唑胺化疗预后(P<0.05)。结论:IDH1突变与脑胶质瘤患者疾病分级、分化程度有关,可影响替莫唑胺化疗疗效、免疫细胞因子表达,是替莫唑胺化疗后预后生存的保护因素。

关键词： 乳腺癌   肿瘤浸润淋巴细胞   TUNAR基因  

摘要： 目的:探索肿瘤浸润淋巴细胞在管腔型乳腺癌中的浸润表达及临床意义。方法:分析癌症基因组图谱(TCGA)中乳腺癌以及管腔型乳腺癌的原始表达数据,对管腔型乳腺癌预后相关基因进行通路富集分析以及预后分析,筛选管腔型乳腺癌的预后保护因子。结果:通过对TCGA数据库中乳腺癌以及管腔型乳腺癌的原始表达数据在分析,共筛选出上调基因1 003个,下调基因1 679个。进一步对管腔型乳腺癌复发组病人的预后保护相关基因的GO分析结果提示,淋巴细胞激活、T细胞受体相关通路被抑制,KEGG通路富集分析结果提示T细胞分化、抗原呈递和T细胞受体信号通路同样被明显抑制。在上述通路选择的基础上,进一步筛选出TUNAR基因是与MHC-Ⅰ类分子呈正相关关系,且与PD-L1呈负相关关系的保护性预后因子。基因相关性分析及预后相关性分析提示,TUNAR通过影响淋巴免疫相关通路在管腔型乳腺癌中发挥预后保护因子作用。结论:TUNAR在管腔型乳腺癌病人组织样本中低表达,且可能通过影响淋巴免疫相关通路,在管腔型乳腺癌病人预后中发挥保护作用。

关键词： 大承气汤   急性胰腺炎   细胞因子   JAK2/STAT3信号通路   大鼠   动物实验   中药药理机制  

摘要： 目的观察大承气汤通过Janus激酶2/信号转导和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路对急性胰腺炎(AP)大鼠细胞因子水平的影响。方法选取30只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组10只。假手术组大鼠开腹后仅翻动十二指肠,模型组和治疗组大鼠经胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠,治疗组大鼠在造模后24 h灌胃10 g/kg大承气汤。比较各组大鼠腹水量、血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;酶联免疫吸附法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平;免疫发光法和免疫扩散法检测大鼠血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠血清磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)和磷酸化信号转导和转录激活子3(p-STAT3)mRNA和蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠腹水量显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠腹水量显著降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠AMY、脂肪酶、ALT水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠AMY、脂肪酶、ALT水平均显著降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠血清炎症因子水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠血清炎症因子水平显著降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠血清p-JAK2和p-STAT3 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠血清p-JAK2和p-STAT3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论大承气汤通过抑制JAK2/STAT3信号通路降低AP大鼠细胞因子水平。

关键词： 支气管哮喘   肺部感染   中性粒细胞/淋巴细胞比值   衍生中性粒细胞/淋巴细胞比值   单核细胞/淋巴细胞比值   急性生理与慢性健康评分  

摘要： 目的探讨支气管哮喘合并肺部感染患者外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、衍生中性粒细胞/淋巴细胞比值(dNLR)、单核细胞/淋巴细胞比值(MLR)及其与病情急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)的相关性。方法选取宜春市人民医院2023年1月至9月收治的105例支气管哮喘患者作为研究对象,根据患者肺部感染情况的不同分为感染组(合并肺部感染患者,n=60)和未感染组(未合并肺部感染患者,n=45),比较两组患者入院时外周血NLR、dNLR、MLR及APACHEⅡ评分。根据病情APACHEⅡ评分的不同将感染组患者分为轻度组(APACHEⅡ评分≤15分,n=41)和中重度组(APACHEⅡ评分>15分,n=19),比较两亚组患者外周血NLR、dNLR、MLR水平及APACHEⅡ评分,绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估外周血NLR、dNLR、MLR对支气管哮喘合并肺部感染患者病情的诊断效能,分析外周血NLR、dNLR、MLR与APACHEⅡ评分相关性。结果感染组患者入院时外周血NLR、dNLR、MLR及APACHEⅡ评分高于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。中重度组患者外周血NLR、dNLR、MLR水平及APACHEⅡ评分均高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,外周血NLR、dNLR、MLR对支气管哮喘合并肺部感染患者病情具有较好的诊断效能(P<0.05),其AUC=0.728、0.707、0.865,敏感度=57.95%、89.47%、78.59%,特异度=89.91%、48.79%、82.89%。外周血NLR、dNLR、MLR水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.382、0.415、0.513,P<0.05)。结论支气管哮喘合并肺部感染患者外周血NLR、dNLR、MLR呈升高趋势,且与病情APACHEⅡ评分具有一定相关性,早期评估其水平,利于准确及时把握病情变化,为疾病诊治提供有力参考。