关键词:
白细胞介素35
mRNA
脂质纳米粒
脂多糖
急性肺损伤
炎症
摘要:
目的 探讨脂质纳米粒(LNP)递送白细胞介素35(IL-35)mRNA(IL-35 mRNA-LNP)对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法 将56只小鼠随机分成7组,每组8只,分别为正常对照组、IL-35 mRNA-LNP(250μg·kg^(-1))组、LPS组、LPS+IL-35 mRNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组及LPS+地塞米松(DXM)组。IL-35 m RNA-LNP(250μg·kg^(-1))组、LPS+IL-35 m RNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组小鼠iv给予相应剂量的LNP包载IL-35 mRNA复合物,LPS+DXM组小鼠iv给予DXM(5 mg·kg^(-1)),随后除正常对照组和IL-35 mRNA-LNP(250μg·kg^(-1))组外,其他组均采用气管滴注LPS(5 mg·kg^(-1))建立ALI模型,造模24 h后处死小鼠,记录肺系数和肺组织湿/干重比(W/D);乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测肺组织LDH活性;实时荧光定量PCR检测肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6和IL-1β mRNA水平;ELISA法检测肺组织IL-35,TNF-α,IL-6和IL-1β蛋白水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;免疫荧光法检测肺组织淋巴细胞抗原6G(Ly6G)表达水平。结果 与正常对照组、LPS组和LPS+DXM组相比,LPS+IL-35mRNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组肺组织均显著表达IL-35蛋白(P<0.01)。与正常对照组相比,LPS组肺系数、肺组织W/D、LDH活性及TNF-α,IL-6和IL-1β mRNA水平以及蛋白水平均显著升高(P<0.01),出现肺泡出血、肺泡壁增厚和中性粒细胞浸润。与LPS组相比,LPS+IL-35 m RNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组肺系数、肺组织W/D、LDH活性及TNF-α,IL-6和IL-1β mRNA水平以及蛋白水平均显著降低(P<0.01),同时肺泡出血、肺泡壁增厚和中性粒细胞浸润明显改善。结论 IL-35 mRNA-LNP可在小鼠肺组织中表达IL-35蛋白,并通过抑制促炎因子表达,有效改善LPS诱导的小鼠ALI。