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关键词： 核心素养   体验式教学实践   体液免疫  

摘要： 本文结合“体液免疫”一节的体验式教学实践,从情境体验、过程体验、共享体验、成就体验四个环节,引导学生通过小组合作、体验探究共同构建体液免疫过程模型,促进学生学以致用,用所学知识解释生活现象、解决实际问题,多维度评价学生,发展其生物学学科核心素养。

关键词： 猪IL-15   单克隆抗体   双抗体夹心ELISA   定量检测  

摘要： 旨在制备猪白细胞介素-15(IL-15)的单克隆抗体(McAb),建立IL-15-ELISA定量检测方法。首先构建猪IL-15原核表达载体pET-28a-IL-15,应用大肠杆菌原核表达系统表达该重组蛋白,随后用其免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,在加强免疫后第3天,分离小鼠脾细胞,将脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选阳性杂交瘤细胞,并对其分泌的IL-15单克隆抗体进行鉴定;然后基于单克隆抗体建立IL-15夹心ELISA方法。结果显示:获得9株分泌抗IL-15 McAb的杂交瘤细胞(1E8、1F4、2D3、2C10、2F3、2D10、3F4、3D4、3D5),分泌的抗体均为IgG2bκ型。以制备的单抗2D10和2C10分别为捕获抗体及酶标抗体建立的夹心ELISA最低可检测31.25 ng·mL^(-1)的IL-15蛋白,与其它细胞因子或蛋白(IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、Gzms-B、IFN-γ、TNF-α)无交叉反应,批内和批间重复的变异系数分别为2.56%和3.39%。该夹心ELISA可定量检测血清、组织液和细胞培养物等样品中的IL-15。综上,成功制备了猪IL-15单克隆抗体,建立了定量检测IL-15的双抗体夹心ELISA方法,为IL-15相关研究提供了重要工具。

关键词： 阵发性睡眠性血红蛋白尿症   疗效评估   随访  

摘要： 近年来,补体抑制剂的出现和临床应用,显著提升了阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者的生存和生活质量,PNH的治疗目标从控制溶血升级为脱离输血和血红蛋白正常化。由于PNH疾病的异质性、克隆演变的存在,即使补体抑制剂初始治疗有效,仍可能出现突破性溶血、血管外溶血、血栓事件和疾病演变等问题。由于PNH克隆一般不会消失,患者需要接受长期甚至终身的补体抑制剂治疗,疾病管理应遵从慢性病管理的模式。需要整合实验室数据、临床评估、患者报告,进行合理的疗效评估和规范化的随访,以实现长期的疾病控制,提高患者的生活质量。

关键词： 霉菌性阴道炎   红核妇洁洗液   克霉唑阴道片   炎性因子   免疫球蛋白   阴道内环境  

摘要： 目的:探讨霉菌性阴道炎(CM)患者应用红核妇洁洗液联合克霉唑阴道片治疗对阴道内环境的影响。方法:选取2021年2月—2024年2月江西省进贤县人民医院收治的180例CM患者作为研究对象,按照随机数表法将其分为3组,每组各60例。对照1组采用克霉唑阴道片治疗,对照2组采用红核妇洁洗液治疗,观察组采用克霉唑阴道片联合红核妇洁洗液治疗,3组患者均连续用药7 d。结果:3组患者临床疗效比较,差异有统计学意义(χ^(2)=9.297,P<0.05);治疗后,观察组肿瘤坏死因子(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-1β(IL-1β)、阴道pH值均低于对照1组和对照组2组,免疫球蛋白M(IgM)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、免疫球蛋白G(IgG)、乳酸杆菌含量、健康调查简表(SF-36)评分均高于对照1组和对照2组,差异均有统计学意义(F=14.374、15.123、16.254、10.350、22.463、30.436、26.425、12.130、23.257,P<0.001);3组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=3.580,P>0.05);对照2组和观察组复发率均低于对照1组,差异均有统计学意义(χ^(2)=4.013、8.360,P<0.001)。结论:与单纯应用克霉唑阴道片治疗相比,联合红核妇洁洗液治疗CM的效果更佳,可有效减轻机体炎症,增强机体免疫功能,改善阴道内环境,降低复发率,提高患者生活质量。

关键词： 肝癌   IFN-γ   IL-8   迁移   肝癌干细胞  

摘要： 目的探讨IFN-γ在体外对人肝癌细胞分泌IL-8及其恶性生物学功能的影响。方法用不同浓度的IFN-γ分别作用于人肝癌HuH7和Hep3B细胞24或48 h,CCK8试剂盒和流式细胞仪分别检测细胞活性、IL-8分泌水平和CD133阳性肝癌干细胞的比例变化;Western blot检测IFN-γ对肝癌细胞中磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)、波形蛋白和E-钙黏蛋白等分子表达的影响;Transwell试验检测IFN-γ或联合IL-8对肝癌细胞迁移的影响;流式细胞术检测IFN-γ联合IL-8或IL-8受体抑制剂repertaxin对肝癌干细胞分化的影响。统计学分析采用单因素方差分析和Tukey-Kramer检验。结果HuH7和Hep3B细胞分泌的IL-8水平显著高于正常肝细胞LO2(P<0.01),且IL-8基因(CXCL8)高表达与波形蛋白基因(VIMENTIN)、CD133基因(PRCM1)、PD-L1基因(CD274)、PD-1基因(PDCD1)和CD163基因(CD163)表达水平以及肝癌患者的不良预后密切相关(P<0.01)。1~100 ng/ml IFN-γ对HuH7和Hep3B细胞的增殖活性无显著影响(P>0.05),但可通过Akt和JNK通路显著抑制肝癌细胞分泌IL-8、细胞迁移、CD133阳性肝癌干细胞分化和肿瘤细胞悬浮球形成(P<0.01)。IFN-γ联合IL-8可以显著逆转IFN-γ对肝癌细胞迁移和干细胞分化,以及肿瘤细胞悬浮球形成的抑制作用(P<0.01);IFN-γ联合repertaxin可以协同抑制CD133阳性肝癌干细胞的分化(P<0.01)。结论IFN-γ通过Akt/JNK-IL-8信号通路抑制人肝癌细胞的分化和迁移,为临床肝癌免疫治疗提供新的策略。

关键词： 慢加急性肝衰竭   淋巴细胞计数与单核细胞计数比值   iMELD   预后  

摘要： 目的:探讨淋巴细胞计数与单核细胞计数比值(LMR)联合整合终末期肝病模型(iMELD)评分预测慢加急性肝衰竭(ACLF)患者短期预后的价值。方法:回顾性分析2020年1月至2022年8月南通市第三人民医院诊治的ACLF患者的临床资料。根据随访90 d时患者生存状态分为生存组(n=87)与死亡组(n=66),分析LMR联合iMELD评分与ACLF预后预测模型的相关性。logistic回归分析ACLF患者死亡的危险因素;采用Pearson相关性检验分析LMR与凝血酶原活动度(PTA)、终末期肝病评分模型关系;运用受试者工作特征曲线(ROC)评价LMR联合iMELD对ACLF患者预后的临床效能。结果:共纳入ACLF患者153例,其中90 d内死亡患者66例。存活组患者LMR、PTA、单核细胞计数均大于死亡组,差异具有统计学意义(P<0.05);死亡组患者肌酐、国际标准比值(INR)、MELD评分、MELD-Na评分、iMELD评分均高于生存组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示LMR与PTA评分(r=0.174,P<0.05)呈正相关;与MELD评分(r=-0.243,P<0.05)、MELD-Na评分(r=-0.255,P<0.05)、iMELD评分(r=-0.254,P<0.05)均呈负相关。LMR联合iMELD评分预测患者90 d预后的ROC曲线下面积为0.849,均高于单独检测。结论:LMR、iMELD评分是影响ACLF患者预后的重要参数,LMR联合iMELD评分可提高对ACLF患者预后的预测价值,对临床有一定的指导意义。

关键词： D-二聚体   白细胞介素-5   重症肺结核   预后   预测价值  

摘要： 目的检测重症肺结核患者血清D-二聚体(D-D)、白细胞介素-5(IL-5)的水平,并探讨其在重症肺结核患者预后评估中的应用价值。方法选取本院96例在2020年6月-2023年6月期间收治的重症肺结核患者为重症组,重症肺结核患者入院治疗28d后依据预后情况分为预后良好组(n=57),预后不良组(n=39)。另选同期于本院治疗的96例轻症肺结核患者为轻症组。采用酶联免疫吸附测定法检测所有患者血清D-D、IL-5水平;对比预后不良组和预后良好组一般资料;构建Logistic回归模型分析影响重症肺结核患者预后结局的潜在因素;绘制受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线评估血清D-D、IL-5水平在预测重症肺结核患者预后方面的效能。结果重症组患者血清D-D、IL-5水平均高于轻症组(P<0.05);预后不良组肺部感染评分(CPIS)评分、血清D-D、IL-5水平均显著高于预后良好组(P<0.05);IL-5、D-D水平升高、CPIS评分升高均为重症肺结核患者预后不良的危险因素(P<0.05);血清D-D、IL-5水平、CPIS评分单独预测重症肺结核患者不良预后的AUC分别为0.847(95%CI:0.759~0.913)、0.843(95%CI:0.755~0.910)、0.842(95%CI:0.754~0.909),血清D-D、IL-5水平联合预测重症肺结核患者不良预后的AUC为0.942(95%CI:0.874~0.979),二者联合优于血清D-D(Z_(二者联合-D-D)=1.992,P=0.046)、IL-5(Z_(二者联合-IL-5)=2.007,P=0.045)、CPIS评分(Z_(二者联合-CPIS评分)=2.063,P=0.039)单独预测价值。结论D-D、IL-5水平在重症肺结核患者血清中均升高,二者水平变化与重症肺结核患者预后不良显著相关,且二者联合在预测重症肺结核预后不良方面展现出更高效能,可作为预测重症肺结核患者预后的生物标志物。

关键词： 狂犬病人免疫球蛋白   国家药品抽检   质量评价  

摘要： 目的评价国内上市不同企业生产的狂犬病人免疫球蛋白的质量状况。方法对13家生产企业50批次狂犬病人免疫球蛋白依据法定质量标准进行检验,同时开展了狂犬病抗体效价、比活性及效价稳定性、质量可比性及可能引起不良反应的影响因素[免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)残留量、渗透压]等4个方面的探索性研究。对质量检验及探索性研究的结果进行统计分析,综合评价狂犬病人免疫球蛋白的质量现状。结果50批样品的合格率为100%。采用细胞法测定狂犬病抗体效价,通过半数有效量(median effective dose,ED50)法计算,结果为101~237 IU·mL^(-1)。比活性结果为0.88~2.78 IU·mg-1蛋白质。成品透光率结果为92.3%~98.7%,热稳定性试验后样品透光率结果为3.1%~97.5%,IgA残留量结果为5~1017μg·mL^(-1),渗透压结果为118~858 mOsmol·kg^(-1),企业间差异明显。亚可见微粒结果为每毫升13406~2185154个,两家企业产品均值达到每毫升约100万个。结论本品总体质量状况较好。但不同企业间产品的透光率、亚可见微粒、IgA残留量、渗透压等指标上有较大差异,值得进一步关注。建议进一步完善质量标准,可对狂犬病抗体效价增订统计分析要求。

关键词： 胃癌   circ_0039411   miR-423-5p   IL-8   中性粒细胞胞外诱捕网  

摘要： 目的探讨circ_0039411通过miR-423-5p/白介素-8(interleukin-8,IL-8)调控中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)对胃癌细胞的影响。方法采用定量实时反转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transeription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测胃癌细胞株(HGC-27、SNU-16和AGS)和人胃黏膜细胞(GSE-1)中cire_0039411和miR-423-5p的表达水平。选取HGC-27建立circ_0039411低表达模型,设立实验组(转染cire_0039411的siRNA)和空白对照组(转染对照的siRNA)。在实验组细胞中建立miR-423-5p低表达模型,设立inhibitor组(转染miR-423-5p的抑制物)和NC组(转染空载)。使用佛波肉豆蔻醋酸(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导NETs的形成,设立PMA组(经PMA诱导)和对照组(未经PMA诱导)。构建胃癌细胞与中性粒细胞的共培养模型。采用CCK-8检测胃癌细胞的活性,采用Transwell和划痕检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测IL-8表达水平,采用免疫荧光检测NETs的形成。结果胃癌细胞HGC-27、SNU-16和AGS中circ_0039411和IL-8的表达水平高于人胃黏膜细胞GSE-1,miR-423-5p的表达水平低于人胃黏膜细胞GSE-1,差异有统计学意义(P<0.05)。相比于空白对照组,实验组细胞的活性、迁移能力、侵袭能力及分泌的IL-8水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05),NETs的形成减少。相比于NC组,inhibitor组细胞的活性、迁移能力、侵袭能力及分泌的IL-8水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05),NETs的形成增加。相比于对照组,PMA组胃癌细胞的活性、迁移能力和侵袭能力均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论cire_0039411能够通过miR-423-5p/IL-8轴促进NETs的形成,并进一步促进胃癌细胞的迁移和侵袭。

关键词： 新报告HIV/AIDS病例   CD4^(+)T淋巴细胞   晚发现   检测及时性  

摘要： 目的探究成都市双流区新报告HIV/AIDS病例首次CD4^(+)T淋巴细胞检测结果的影响因素,为调整防控策略提供理论依据。方法采用流式细胞术对2015—2023年成都市双流区新报告HIV/AIDS病例静脉血样进行CD4+细胞检测,所得数据进行逐步Logistic回归分析、χ^(2)检验、Spearman相关性分析。结果2015—2023年双流区新报告HIV/AIDS病例(2223例)完成首次CD4^(+)细胞计数检测的病例数为2115例(95.14%),首次CD4^(+)细胞计数<200个/μL 577例(27.28%),其中确诊后14天内接受CD4^(+)细胞计数检测694例(32.81%)。2015—2023年晚发现率从45.00%降至24.40%,平均为35.60%,整体呈下降趋势。逐步Logistic分析结果显示,最终的模型仅纳入性别、年龄组、人群分类、户籍地区类型和样本来源,结果显示,女性相较于男性更不容易晚发现(OR=0.717,95%CI:0.569~0.902),30~50岁和>50岁比<30岁更容易晚发现(OR=4.059,95%CI:2.949~5.635),民工及务农人员相较于家政家务及待业更不容易晚发现(OR=0.773,95%CI:0.605~0.987),其他区市县相较于本区县更不容易晚发现(OR=0.674,95%CI:0.573~0.837),样本来源为重点人群检测相较于医疗机构检测更不容易晚发现(OR=0.625,95%CI:0.477~0.816)。结论2015—2023年成都市双流区新报告HIV/AIDS病例首次CD4+细胞计数检测率较高,检测及时性较差,晚发现率有下降趋势。应继续加强宣传,扩大检测面,提高检测及时性,进一步降低晚发现率,减少“发现即发病”现象。