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关键词： Introgression line   Fruit shape   Fruit size   Epistasis   Marker-assisted selection   QTL  

摘要： Traditional melon varieties with high value in local markets are grown in the Iberian Peninsula. However, their cultivation is declining, being replaced by modern varieties. Five high quality traditional were selected ('Piel de Sapo', 'Amarillo', 'Rochet', 'Tendral' and 'Blanco') to modify their fruit morphology in order to make them more appealing for consumer using a set of introgression lines (IL) from the accessions 'Vedrantais' (VED, cantaloupe, France), PI 273438 (DUD, Dudaim, Iraq), Ames 24,297 (TRI, wild melon, Pakistan), and PI 124112 (CALC, acidulus, India) in the genetic background of two 'Piel de Sapo' cultivars. The ILs contained QTLs that induced round fruits (CALC8-1, DUD4-2, VED11-2), large fruits (TRI05-2), and small fruits (TRI08-2, DUD1-2, DUD4-2). Hybrids between ILs and traditional varieties were studied to verify the effect of ILs in the traditional genetic backgrounds and IL x genetic background (IL x GB) interactions. The ILs with more stable effects were TRI08-2 (reducing fruit weight), TRI05-2 (increasing fruit weight), and CALC8-1 (round shape). ILxGB interactions were also found, mainly in VED11-2 and DUD4-2 for fruit weight. These results allowed us to identify the best ILs to modify fruit morphology in the traditional varieties by breeding programs. Additionally, the identification of IL x GB interactions for some ILs, such as VED11-2 and DUD4-2 for fruit weight provides an experimental system to shed insights into the genetic basis of QTLxGB interactions.

关键词： 儿童龋病   免疫球蛋白   口腔微生物群落   龋病严重程度  

摘要： 目的分析儿童龋病患儿唾液中免疫球蛋白水平及口腔微生物群落的变化,探讨其与龋病严重程度的多因素关联性。方法选取2023年5月—2024年5月山西省儿童医院收治的109例龋病患儿。根据龋病严重程度将患儿分为轻度组(47例)、重度组(62例),选取同期该院50例健康儿童作为对照组。通过免疫透射比浊法检测患儿唾液中免疫球蛋白水平,荧光定量聚合酶链反应分析唾液样本中的口腔微生物群落结构。比较各组免疫球蛋白水平、口腔微生物群落变化,并结合龋失补指数(DMFT)评估其与龋病严重程度的相关性。采用多元线性回归模型评估免疫球蛋白、口腔微生物群落与龋病严重程度的关系。结果重度组与轻度组患儿的分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)水平均高于对照组(P<0.05),重度组患儿的sIgA、IgA、IgG和IgM水平均高于轻度组(P<0.05)。重度组与轻度组患儿的变形链球菌、远缘链球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌丰度均高于对照组(P<0.05),重度组患儿的变形链球菌、远缘链球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌丰度均高于轻度组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明,唾液免疫球蛋白(sIgA、IgA、IgG、IgM)与唾液口腔微生物(变形链球菌、远缘链球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌)均呈正相关(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,sIgA、IgA、IgG、IgM及变形链球菌、远缘链球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌水平升高与DMFT增加有关(P<0.05)。结论儿童龋病的严重程度与唾液中的免疫球蛋白水平及口腔微生物群落的变化密切相关。免疫球蛋白浓度和特定微生物群落的丰度可作为评估龋病严重程度的潜在生物标志物,为龋病的早期诊断和干预提供新思路。

关键词： 利水强心汤   老年   慢性心力衰竭   心室重构   炎症因子   可溶性肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂   超敏C反应蛋白   白细胞介素6   生活质量  

摘要： 【目的】分析利水强心汤(由生黄芪、大腹皮、葶苈子、茯苓、猪苓、桂枝、丹参、阿胶、木香等组成)加减治疗老年慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效及其对心室重构和血清可溶性肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(sTWEAK)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)水平的影响。【方法】选取2021年12月至2024年12月在唐山中心医院就诊的150例阳气虚衰、水泛血瘀证老年CHF患者,根据治疗方法的不同将其分为试验组76例和基础组74例。基础组给予标准化西医治疗(包括扩血管、利尿、强心等),试验组在基础组的治疗基础上给予利水强心汤加减治疗,疗程为8周。观察2组患者治疗前后中医证候积分、明尼苏达心力衰竭生活质量问卷(MLHFQ)评分、心室重构指标[左心室质量(LVM)、左心室舒张早期二尖瓣血流最大速度/左心室舒张晚期二尖瓣血流最大速度(E/A)、左室射血分数(LVEF)]及血清sTWEAK、hs-CRP、IL-6水平的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】(1)疗效方面,治疗8周后,试验组的总有效率为97.37%(74/76),基础组为86.49%(64/74),组间比较(χ^(2)检验),试验组的疗效明显优于基础组(P<0.05)。(2)中医证候积分方面,治疗后,2组患者的呼吸困难、面肢浮肿、畏寒肢冷、心悸气短积分均较治疗前降低(P<0.05),且试验组的降低幅度均明显优于基础组(P<0.01)。(3)心室重构指标方面,治疗后,2组患者的LVM均较治疗前降低(P<0.05),E/A、LVEF均较治疗前升高(P<0.05),且试验组对LVM的降低幅度及对E/A、LVEF的升高幅度均明显优于基础组(P<0.01)。(4)血清炎症因子方面,治疗后,2组患者的血清sTWEAK、hs-CRP、IL-6水平均较治疗前降低(P<0.05),且试验组的降低幅度均明显优于基础组(P<0.01)。(5)生活质量方面,治疗后,2组患者MLHFQ量表的情感维度、身体活动维度、症状维度评分及其总分均较治疗前降低(P<0.05),且试验组的降低幅度均明显优于基础组(P<0.01)。【结论】利水强心汤加减可有效缓解阳气虚衰、水泛血瘀证老年CHF患者临床症状,改善左心室功能,降低血清sTWEAK、hs-CRP、IL-6水平,提高生活质量。

关键词： 猪德尔塔冠状病毒   N蛋白   原核表达   单克隆抗体  

摘要： 为了制备猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)N蛋白和抗N蛋白的单克隆抗体(m Ab),将PDCoV N基因克隆至p GEX-6p-1载体中,转化至BL21(DE3)感受态细胞,诱导纯化后获得可溶性重组N蛋白,约43k Da,大小符合预期。用重组N蛋白对小鼠进行免疫,采用细胞融合技术制备单克隆抗体,共获得5株(2D8、2E2、6A1、9C10、5H10)稳定分泌N蛋白抗体的杂交瘤细胞株。通过免疫印迹和间接免疫荧光试验(IFA)判定5株杂交瘤细胞株均能够特异性地识别N蛋白,其中2株(2D8、6A1)腹水抗体效价均高达1∶1 024 000。中和试验表明,2株单克隆抗体均具有病毒中和作用。结果表明,成功表达了N蛋白及制备了5株能稳定分泌与PDCoVN蛋白特异性结合的单克隆抗体,为PDCoVN蛋白的功能和PDCoV检测方法的研究提供了基础,对该疾病的临床诊断、流行病学调查与疫病防控具有重要意义。

关键词： 食管早癌   淋巴细胞   免疫浸润   免疫检查点抑制剂   淋巴细胞激活基因3   程序性死亡配体-2   细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4   T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域-3  

摘要： 目的探讨食管早癌不同分期淋巴细胞间质浸润情况及免疫检查点基因表达的变化。方法回顾性分析90例食管早癌患者的临床资料,依据病理浸润深度分为T1a-M1型、T1a-M2型和T1a-M3型,每种类型30例。另选取癌旁配对正常黏膜组织30例。采用苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态;采用免疫组化法检测CD3、CD4、CD8、CD20的表达;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测免疫检查点基因[程序性死亡配体-1(PD-L1)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域-3(TIM-3)、淋巴细胞激活基因3(LAG3)、程序性死亡受体-1(PD-1)、程序性死亡配体-2(PD-L2)、T细胞免疫受体和免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(TIGIT)]的mRNA表达水平。结果伴随食管早癌分期进展,肿瘤细胞数与淋巴细胞数比值增高,CD3^(+)T细胞多于CD20^(+)B细胞,CD4^(+)T细胞占总T细胞比例高于CD8^(+)T细胞,差异均有统计学意义(P<0.001)。患者免疫检查点基因mRNA表达水平升高(P<0.05);与正常癌旁组织相比,T1a-M1型、T1a-M2型、T1a-M3型患者PD-L1 mRNA、CTLA4 mRNA、TIM-3 mRNA、PD-1 mRNA、TIGIT mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与正常癌旁组织相比,T1a-M2型、T1a-M3型患者LAG3 mRNA、PD-L2 mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论食管早癌分期进展与免疫检查点基因表达升高、淋巴细胞比例下降存在相关性,提示免疫微环境变化可能参与肿瘤进展。

关键词： CXCL8   glioblastoma   IL1A   IL1B   therapeutic resistance  

摘要： Background/Aim: Glioblastoma multiforme (GBM) is a highly aggressive, treatment-resistant brain tumor with a dismal prognosis, and identifying key molecules involved in its therapeutic resistance is essential to improve patient outcomes. This study was undertaken to identify hub genes associated with the radioresistance and temozolomide (TMZ) resistance of GBM using bioinformatics analysis. Materials and Methods: RNA-seq and microarray datasets from the GEO database were analyzed to identify differentially expressed genes (DEGs). GO and KEGG pathway enrichment analyses were performed using Enrichr. A protein-protein interaction (PPI) network was constructed using STRING and visualized with Cytoscape, and hub genes were identified by MCODE analysis. Expression and survival analyses were conducted on TCGA and GTEx datasets using GEPIA2. Results: Twenty-four DEGs were considered linked to radioresistance and 122 to TMZ resistance. Functional enrichment and PPI network analyses highlighted key therapeutic resistance pathways, including cytokine-mediated signaling and inflammatory response pathways. Notably, CXCL8, IL1A, and IL1B were identified as key hub genes significantly enriched in these pathways. Expression analysis confirmed their up-regulation in GBM, and survival analysis indicated their association with prognosis. Conclusion: This study identifies CXCL8, IL1A, and IL1B as potential therapeutic targets for overcoming the resistance of GBM to radiotherapy and chemotherapy. In addition, these genes might serve as prognostic biomarkers and key regulators of GBM malignancy. Future studies are warranted to explore their functional roles in vivo and assess their potential use as therapeutic intervention targets. © 2025 The Author(s).

关键词： 肺炎支原体肺炎   阿奇霉素   小儿柴桂退热颗粒   中医证候   免疫球蛋白   炎性因子   不良反应  

摘要： 目的:观察小儿柴桂退热颗粒联合阿奇霉素治疗肺炎支原体肺炎(MPP)患儿的效果。方法:选取2021年12月至2023年12月该院收治的78例MPP患儿进行前瞻性研究,按随机数字表法将其分为观察组和对照组各39例。对照组予以阿奇霉素治疗,观察组在对照组基础上联合小儿柴桂退热颗粒治疗。比较两组治疗前后中医证候积分、免疫球蛋白指标[免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)]水平、炎性因子[降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)]水平,以及不良反应发生率。结果:治疗后,两组高热不退、咳嗽、痰黄黏稠、痰涎壅盛、气急鼻扇、面赤口渴等中医证候积分均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组IgG、IgM、IgA水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组PCT、IL-6、CRP水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:小儿柴桂退热颗粒联合阿奇霉素治疗MPP患儿可降低中医证候积分、免疫球蛋白指标水平和炎性因子水平,效果优于单纯阿奇霉素治疗。

关键词： 绝经后期   慢性阻塞性肺疾病   乙酰半胱氨酸   呼吸操   肺功能   生存质量  

摘要： 目的分析呼吸操联合乙酰半胱氨酸对绝经后期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者呼吸肌功能、呼吸困难程度及炎症细胞因子的影响。方法选取2019年1月—2023年1月杭州市红十字会医院钱塘院区收治的90例绝经后期COPD患者作为研究对象,按照随机数字方法分为药物组和呼吸操+药物组,每组各45例。药物组患者采用乙酰半胱氨酸溶液雾化治疗,而呼吸操+药物组患者采用乙酰半胱氨酸溶液雾化治疗的同时进行呼吸操干预,比较两组干预前后肺功能、呼吸肌功能、呼吸困难程度评分、炎症细胞因子水平及生存质量。结果干预后,药物组的用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)及呼气流量峰值(PEF)分别为(1.81±0.22)L、(1.30±0.17)L及(1.40±0.18)L/s,显著低于药物+呼吸操组的(1.96±0.18)L、(1.45±0.15)L及(1.55±0.20)L/s,差异均有统计学意义(t=3.540、4.438及3.740,均P<0.05)。干预后,药物组的最大吸气压(MIP)和最大呼气压(MEP)分别为(63.02±7.15)%和(66.33±7.28)%,显著低于药物+呼吸操组的(68.44±8.06)%和(71.15±7.65)%,差异均有统计学意义(t=3.375、3.062,均P<0.05)。干预后,药物组的改良呼吸困难指数(m MRC)评分和COPD评估测试(CAT)评分分别为(1.96±0.31)分和(18.99±2.22)分,高于药物+呼吸操组的(1.78±0.25)分和(16.57±2.08)分,差异均有统计学意义(t=3.032、5.336,均P<0.05)。干预后,药物组的C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平分别为(67.20±6.39)mg/L、(22.08±3.00)pg/ml及(44.60±5.05)pg/ml,显著高于药物+呼吸操组的(62.38±5.90)mg/L、(19.64±2.86)pg/ml及(40.80±3.71)pg/ml,差异均有统计学意义(t=3.718、3.949及4.068,均P<0.05)。药物+呼吸操组的生存质量评分低于药物组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论呼吸操联合乙酰半胱氨酸可显著改善绝经后期COPD患者呼吸肌功能,进而降低呼吸困难程度,同时可抑制炎症细胞因子水平,提高肺功能和生存质量,值得推广应用。

关键词： 副溶血弧菌   型分泌系统   vopD基因   生物学特性   多克隆抗体制备  

摘要： 【背景】副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一种重要的人兽共患病病原菌,能够引发食源性肠胃炎。Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion systems,T3SS)是一种复杂的纳米机器,能够将效应蛋白递送至真核细胞。副溶血弧菌有2套Ⅲ型分泌系统(T3SS1和T3SS2),其中VopD作为T3SS1的易位子,参与效应蛋白的递送,然而VopD的具体生物学功能尚未阐明。【目的】进一步探讨VopD在副溶血弧菌致病机制中的作用,并系统评估对副溶血弧菌生物学特性的影响。【方法】以POR-3为基础菌株,通过同源重组法构建vopD基因缺失株与回补株,明确vopD缺失对副溶血弧菌生长能力、生物被膜形成能力、溶血活性以及细胞黏附能力的影响;同时,检测vopD缺失及回补株对HeLa细胞的毒性作用,并通过制备多克隆抗体检测VopD蛋白的分泌情况。【结果】vopD基因的缺失对副溶血弧菌的生长能力无显著影响,但显著降低了其生物被膜形成能力、溶血活性以及细胞黏附能力。相较于菌株POR-3,vopD基因缺失株对HeLa细胞的毒性作用在感染后60、90、120 min均显著下降,而回补株的毒性恢复至野生株水平;通过构建原核表达载体,诱导表达并纯化VopD蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,免疫印迹分析显示在vopD缺失株和T3SS1功能缺失株POR-2中未检测到分泌的VopD蛋白,并且菌株POR-3、RIMD 2210633以及vopD回补株中成功检测到VopD蛋白分泌,表明VopD蛋白由T3SS1分泌。【结论】vopD基因参与调控副溶血弧菌生物被膜形成、溶血活性和细胞黏附功能,同时影响副溶血弧菌对HeLa细胞的毒性作用,制备的多克隆抗体可有效检测细菌中VopD的分泌与表达。