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关键词： 猪流行性腹泻病毒   S1蛋白   生物信息学   杆状病毒表达   多克隆抗体  

摘要： 以猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S1蛋白为研究对象,构建PEDV S1的杆状病毒系统并稳定表达高纯度的S1蛋白,制备高特异性的S1蛋白多克隆抗体。基于多种基因型PEDV S1基因序列信息,使用生物信息学技术分析其理化特性、跨膜结构域、抗原表位和二级结构等性质。进一步对S1基因序列进行适用于昆虫细胞表达的密码子优化,通过基因合成、载体构建、杆粒转化、细胞培养等步骤,构建适用于表达PEDV S1重组蛋白的Bac-to-Bac杆状病毒表达系统。通过镍柱亲和层析和超滤技术纯化S1重组蛋白,将其与弗氏佐剂混合乳化后免疫BALB/c小鼠,制备鼠多克隆抗血清(多抗血清)。通过间接免疫荧光(IFA)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western Blot)等方法,成功证明了本研究所建立的杆状病毒表达系统能够有效地表达S1重组蛋白。ELISA和IFA验证了所得抗体在特异识别PEDV感染Vero细胞方面的有效性。本文成功构建了PEDV S1的杆状病毒表达系统,稳定表达了高纯度的S1蛋白,并制备了具有高特异性的S1蛋白多克隆抗体,为未来猪流行性腹泻单克隆抗体的制备及检测试剂的研发奠定了基础。

关键词： 中性粒细胞与淋巴细胞比值   空腹血糖   急性心肌梗死   交互作用  

摘要： 目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)和空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者预后的交互作用。方法纳入诊断为AMI的患者436例,通过临床或电话联系对患者随访48(45,53)个月。分别研究NLR和FBG对心脏死亡的影响,并计算它们对心脏死亡的加性和乘性交互作用。结果随访期间,26例(6.0%)患者发生心脏死亡。NLR与FBG之间不存在乘性交互作用,但对心脏死亡有正加性交互作用。协同指数显示,同时暴露于这两种危险因素的心脏死亡风险是单独暴露于这两种危险因素的心脏死亡风险总和的5.894倍(P<0.05)。归因比显示,77.9%的心脏死亡可归因于NLR和FBG的交互作用(P<0.05),这意味着高NLR和高FBG同时存在时的影响大于它们单独存在时的影响。结论高NLR和高FBG具有积极的协同作用,为AMI患者的预后识别提供了额外的信息。

关键词： 益生菌制剂   腹膜透析   细胞因子  

摘要： 目的探讨复方嗜乳酸杆菌对合并胃肠道症状的腹膜透析患者血清及腹腔IL-17,VEGF,TGF-β1水平的影响,为复方嗜乳酸杆菌的临床应用提供科学依据。方法选取2021年6月至2022年9月在杭州市中医院腹膜透析中心接受透析治疗并伴有胃肠道症状的腹膜透析患者(PD)40例。收集患者治疗前(第0天)、治疗中期(第90天)及治疗后期(第180天)的血清及腹透液,并测定血清及腹透液的VEGF、TGF-β1、IL-17水平。通过治疗前后对照研究,观察复方嗜乳酸杆菌对腹膜透析患者血清及腹透液的VEGF、TGF-β1、IL-17的影响。结果经复方嗜酸乳菌片干预治疗后,PD患者血清TGF-β1、VEGF水平下降,腹透液IL-17、TGF-β1、VEGF水平下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。血清IL-17表达水平有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方嗜乳酸杆菌能降低腹膜透析患者腹腔IL-17、TGF-β1及VEGF水平,减轻局部炎症反应,从而保护合并胃肠道症状的腹膜透析患者的腹膜功能。

关键词： 哮喘   T淋巴细胞   呼吸功能试验   数据相关性  

摘要： 【目的】分析支气管哮喘患者CD4^(+)T淋巴细胞水平与肺功能指标的相关性。【方法】选择2017年9月至2023年9月本院收治的115例重症支气管哮喘患者纳入重症组,另选取同期在本院就诊的115例轻中症支气管哮喘患者纳入轻中症组。比较两组CD4^(+)T淋巴细胞[辅助性T细胞(Th1、Th2、Th17)、调节性T细胞(Treg)]水平、肺功能指标[肺活量(VC)、呼气流量峰值(PEF)、第一秒用力呼气容积(FEV_(1))占预计值的百分比(FEV_(1)%pred)、FEV_(1)/用力肺活量(FVC)];采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CD4^(+)T淋巴细胞对重症支气管哮喘发生的预测价值;分析CD4^(+)T淋巴细胞与肺功能指标的相关性。【结果】重症组Th2、Th17、Treg水平及Th17/Treg显著高于轻中症组(P<0.05),Th1、Th1/Th2显著低于轻中症组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示:Th1、Th2、Th17、Treg、Th1/Th2、Th17/Treg预测重症支气管哮喘发生的曲线下面积分别为0.865、0.920、0.910、0.892、0.924、0.872。重症组VC、PEF、FEV_(1)%pred、FEV_(1)/FVC显著低于轻中症组(P<0.05)。相关性分析结果显示:Th1、Th/Th2与VC、PEF、FEV_(1)%pred、FEV_(1)/FVC呈正相关(P<0.05),Th2、Th17、Treg、Th17/Treg与VC、PEF、FEV_(1)%pred、FEV_(1)/FVC呈负相关(P<0.05)。【结论】重症支气管哮喘患者外周血Th1水平、Th1/Th2明显降低,Th2、Th17、Treg水平及Th17/Treg明显升高,且Th1、Th/Th2与肺功能指标呈正相关,Th2、Th17、Treg、Th17/Treg与肺功能指标呈负相关。

关键词： IgA肾病   CD4^(+)T淋巴细胞   预后  

摘要： 目的探讨IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者淋巴细胞亚群和肾脏临床病理特征及肾脏预后的关系。方法回顾性收集和分析2018年1月至2022年1月期间在河北医科大学第四医院肾内科经肾活检确诊的IgAN患者的一般临床资料及病理检查结果。通过相关性检验探讨淋巴细胞亚群与其他重要临床病理参数之间的关系。通过计算约登指数(Youden index)获得CD4^(+)T淋巴细胞的最佳截断值并以此分组。采用Kaplan-Meier生存曲线法及Cox回归法比较IgAN患者CD4^(+)T淋巴细胞与肾功能进展的关系。研究终点事件定义为患者估算肾小球滤过率(eGFR)较基线值下降≥30%,和(或)患者进入终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)[eGFR<15 mL/(min·1.73 m^(2))]或肾脏替代治疗的表现和(或)全因死亡。结果低CD4^(+)T淋巴细胞与IgAN患者的血IgA和肾小球新月体比例呈正相关(P<0.05)。共53例IgAN患者纳入研究,低CD4^(+)T淋巴细胞组20例,高CD4^(+)T淋巴细胞组33例。低CD4^(+)T淋巴细胞组患者男性较多,新月体比例较低(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,CD4^(+)T淋巴细胞低的患者肾脏累积存活率低(Log-Rank检验χ^(2)=4.188,P=0.041)。Cox回归分析结果显示,低CD4^(+)T淋巴细胞是IgAN患者肾功能进展的危险因素(HR=2.614,95%CI:1.006~6.788,P=0.048)。结论CD4^(+)T淋巴细胞水平高时,发生肾脏不良预后的风险低。IgAN患者低CD4^(+)T淋巴细胞的肾脏存活率低。

关键词： 外泌体   子宫内膜炎   淋巴细胞   细胞微环境   胚胎植入   治疗  

摘要： 慢性子宫内膜炎(chronic endometritis,CE)的病理特征为CD138+子宫内膜基质浆细胞异常浸润,这种持续的炎症状态可能会干扰免疫细胞浸润、细胞因子的表达以及子宫内膜蜕膜化进程,进而对胚胎植入产生负面影响,引起学者的广泛关注。外泌体(exosome)作为一种细胞间通讯的纳米级囊泡,目前已有较多的研究发现其在调控免疫微环境中显示出巨大潜力。综述外泌体在治疗CE中的研究进展,特别是其通过调控免疫改善内膜微环境的作用机制,这可能对CE治疗新方法起到指导作用。

关键词： 单克隆抗体   IgG   ADCC   CDC  

摘要： 单克隆抗体作为一种具有靶向性的药物在肿瘤治疗方面具有良好的效果,因此抗体药物的研发一直是国内外学者关注的焦点。目前上市的抗体药物绝大多数为IgG亚型,因其高度的特异性,Fab端能够识别并结合抗原,而Fc端通常能介导机体免疫系统发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)、抗体依赖的细胞吞噬作用(ADCP)以及补体依赖的细胞毒性作用(CDC)。这些细胞毒性作用也是抗肿瘤抗体药物发挥体内药效杀伤肿瘤细胞和清除病毒感染细胞的机制之一,因此对于这一类抗体药物Fc端的药效评价在其整个生命周期内都是尤为重要的。本文就ADCC和CDC的作用机制以及各自的检测方法进行了综述,对单抗药物Fc端功能的认识以及药物质量控制奠定了基础。

关键词： 糖类抗原19-9   胰腺导管腺癌   体检  

摘要： 文章报道体检发现糖类抗原19-9持续升高至上限,2年后确诊胰腺导管腺癌的病例1例。从发现肿瘤标志物异常至确诊胰腺导管腺癌,患者无腹痛、黄疸等临床症状,难以进行针对性更强的检查,为确诊增加了难度。因单位体检套餐项目单一,胆囊切除术后肿瘤标志物指标短暂下降,也一度使诊断陷入误区。患者多次行影像学检查未有阳性发现,未行超声内镜及病理检查,诊疗过程存在不足。及时进行超声内镜检查甚至活检取得组织病理学标本,则可能带来胰腺导管腺癌早诊断、早期根治性手术的机会,将疾病终结在癌前病变或原位癌时期,改善预后。

关键词： 结直肠肿瘤   肿瘤异常蛋白   细胞角蛋白19片段抗原   内皮细胞特异性分子1   复发  

摘要： 目的探讨血清肿瘤异常蛋白(TAP)、细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)及内皮细胞特异性分子1(ESM1)联合检测对结直肠癌患者术后复发转移的预测价值。方法回顾性选取2021年6月至2023年5月浙江金华广福肿瘤医院收治的75例结直肠癌患者(直肠癌组)和同期60例健康体检者(对照组)为研究对象,比较两组血清TAP、CYFRA21-1及ESM1水平;比较不同临床病理特征结直肠癌患者血清TAP、CYFRA21-1及ESM1水平;对所有结直肠癌患者随访1年,失访5例,其中无复发转移组40例,复发转移组35例,比较两组血清TAP、CYFRA21-1及ESM1水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析3项指标对结直肠癌术后复发转移的预测价值。结果结直肠癌组血清TAP、CYFRA21-1、ESM1水平高于对照组[(134.52±26.18)μm^(2)比(95.52±10.03)μm^(2)、(6.96±0.73)μg/L比(3.15±0.42)μg/L、(36.78±4.97)μg/L比(4.21±0.35)μg/L],差异有统计学意义(P<0.01)。不同临床分期、组织分化程度及有无淋巴结转移患者血清TAP、CYFRA21-1、ESM1水平比较差异有统计学意义(P<0.01)。复发转移组血清TAP、CYFRA21-1、ESM1水平高于无复发转移组[(155.25±28.02)μm^(2)比(121.05±21.03)μm^(2)、(8.58±0.93)μg/L比(5.25±0.62)μg/L、(42.05±5.23)μg/L比(34.62±5.01)μg/L],差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,血清TAP、CYFRA21-1、ESM1水平联合检测预测结直肠癌患者术后复发转移的曲线下面积最大,为0.811,高于任一单项指标。结论结直肠癌血清TAP、CYFRA21-1、ESM1水平升高,联合检测TAP、CYFRA21-1、ESM1水平对术后复发转移的预测价值较高。

关键词： PD-1   ILC2s   细胞因子   免疫抑制  

摘要： 免疫失调在肿瘤、感染及过敏性疾病的发展中发挥重要作用。程序性死亡受体-1(PD-1)作为近年来备受关注的共抑制分子,可通过抑制2型固有淋巴细胞(ILC2s)的增殖及活化在各种免疫性疾病中参与免疫调节作用。ILC2s是新近发现的免疫细胞家族亚群,通过分泌2型细胞因子参与肿瘤免疫、抗寄生虫感染及组织损伤修复等。PD-1是其主要的免疫抑制分子,在不同免疫性疾病中可调控ILC2s发挥不同免疫调节作用。现就PD-1调控ILC2s在不同疾病中的作用及机制进行综述。