课程文献中心 更多>>

关键词： 发热持续时间   回顾性研究   足月儿   儿科急诊室   瑞典哥德堡   早期诊断   严重细菌感染   婴儿  

摘要： 目的探讨IL-6在发热婴儿严重细菌感染(SBI)早期诊断中的作用,并与CRP进行比较。方法一项回顾性研究,纳人2014年至2017年期间在瑞典哥德堡儿科急诊室就诊的日龄<60d、既往健康、无明显诱因出现发热(FWS)的足月儿。结果共纳入536例FWS的足月儿,其中364例(68%)进行IL-6检测,494例(92%)进行CRP检测。大约70%的婴儿发热持续时间少于12h。

关键词： 白血病,淋巴细胞,急性   高白细胞性   生存   儿童  

摘要： 目的探讨儿童高白细胞急性淋巴细胞白血病(HL-ALL)临床特点及预后。方法回顾性病例系列研究。回顾性分析2016年1月至2023年4月苏州大学附属儿童医院153例初诊HL-ALL患儿临床资料。记录患儿临床特征、细胞遗传学及分子生物学特点、免疫分型、治疗反应及预后。根据免疫分型将患儿分为B系组与T系组;比较两组患儿临床特征;采用Kaplan-Meier法分析两组患儿总生存(OS),并进行log-rank检验;采用Cox比例风险模型分析OS的影响因素。结果153例患儿中,105例检出与疾病相关的融合基因,其中费城染色体阳性(Ph+)/费城染色体样(Ph-like)31例。诱导期出现肿瘤溶解综合征(TLS)28例,肺部感染53例,颅内出血6例,败血症12例。免疫分型86例为B系,67例为T系。B系组与T系组患儿性别及年龄比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);B系组凝血功能异常发生率和血红蛋白、乳酸脱氢酶、尿酸水平均低于T系组(均P<0.01);B系组Ph+/Ph-like、MLL重排、E2A-PBX1、TEL-AML阳性率均高于T系组(均P<0.05),SIL-TAL阳性率低于T系组(P<0.05);在早期并发症方面,B系组TLS发生率低于T系组(P<0.05)。随访至2024年4月30日,中位随访时间[M(Q1,Q3)]为1150(460,2000)d,B系和T系组患儿3年OS率分别为80.6%和67.1%;两组患儿OS比较,差异无统计学意义(P=0.168)。单因素Cox分析结果显示,白细胞计数、Ph+/Ph-like阳性、发生TLS、肺部感染、颅内出血是B系HL-ALL患儿OS的影响因素(均P<0.05);白细胞计数、凝血功能异常是T系HL-ALL患儿OS的影响因素(均P<0.05)。结论HL-ALL中B系和T系组患儿性别、年龄、实验室指标及遗传学方面存在差异。白细胞计数、Ph+/Ph-like阳性、发生TLS、肺部感染、颅内出血是影响B系HL-ALL患儿OS的因素;白细胞计数、凝血功能异常是影响T系HL-ALL患儿OS的因素。

关键词： 川崎病   小檗碱   补体和凝血级联   冠状动脉病变   人冠状动脉内皮细胞  

摘要： 目的探讨小檗碱(berberine,BBR)通过调节补体和凝血级联改善川崎病(Kawasaki disease,KD)冠状动脉内皮细胞损伤的作用。方法将人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cell,HCAEC)分为健康对照组、KD组和BBR处理组(各组n=3)。健康对照组、KD组分别加入健康儿童和KD患儿的15%血清,BBR处理组加入KD患儿的15%血清后再加入浓度20 mmol/L BBR。采用同位素标记相对和绝对定量技术和液相色谱-串联质谱技术分析和鉴定差异蛋白表达,并对差异蛋白进行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析;采用Western blot法检测差异蛋白表达。结果KD组与健康对照组之间共鉴定出518个差异蛋白(上调蛋白300个,下调蛋白218个)。BBR处理组与KD组之间共鉴定出422个差异蛋白(上调蛋白221个,下调蛋白201个)。生物信息学分析结果显示,与健康对照组比较,KD组差异蛋白富集于补体和凝血级联、真核生物的核糖体生物发生;与KD组比较,BBR处理组差异蛋白富集于补体和凝血级联、真核生物的核糖体生物发生。Western blot结果显示,与健康对照组比较,KD组补体C1q亚组分亚基C(complement C1q subcomponent subunit C,C1QC)、激肽原-1(kininogen-1,KNG1)、补体C1s子组件(complement C1s subcomponent,C1S)、C4b结合蛋白α链(C4bbinding protein alpha chain,C4BPA)蛋白表达升高(P<0.05);与KD组比较,BBR处理组KNG1、C1S、C1QC、C4BPA蛋白表达降低(P<0.05)。结论补体和凝血级联可能参与调控BBR治疗KD冠状动脉损伤,C1QC、KNG1、C1S和C4BPA可作为其生物标志物。

关键词： 多房棘球蚴   Calpain A   序列分析   基因克隆   表达纯化   多克隆抗体  

摘要： 目的分析并克隆多房棘球蚴Calpain A(Em-Calpain A)基因开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)序列,进行体外诱导表达并制备兔多克隆抗体。方法从WormBase数据库下载多房棘球绦虫Em-Calpain A基因ORF序列。采用ProtParam、SMART等在线工具对其理化性质、蛋白结构域等进行分析和预测;利用MEGA 7.0软件的邻接法构建系统进化树。提取原头蚴总RNA并反转录为cDNA,PCR扩增Calpain A基因,构建pET28a-Em-Calpain A原核表达载体,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,采用10%SDS-PAGE、Western blot和ELISA对重组蛋白纯度和抗体滴度及反应性进行鉴定。结果序列分析表明Em-Calpain A基因ORF长度为2469 bp,编码822个氨基酸,推测理论分子质量约92.13 ku,等电点为5.3。蛋白结构分析显示Em-Calpain A具有1个高度保守的钙蛋白酶样硫醇蛋白酶结构域(CysPc)、1个钙蛋白酶Ⅲ结构域(CalpainⅢ)和2个E、F的螺旋-环-螺旋结构(EF-hand),说明其属于钙蛋白酶家族。系统进化分析显示Em-Calpain A序列与带科绦虫聚于一类,与肝片吸虫、日本血吸虫、人、犬、牛及原虫亲缘关系较远。重组蛋白主要以包涵体形式表达,蛋白分子质量约为93 ku,与预测分子质量大小基本一致。ELISA检测结果显示制备的多克隆抗体效价达1∶262144;该抗体可特异性识别His-Em-Calpain A和原头蚴天然Calpain A蛋白。结论成功构建Em-Calpain A基因的原核表达系统并制备了其多克隆抗体,为研究该基因的功能奠定了基础。

关键词： 六堡茶   儿茶素   胃癌   幽门螺杆菌   炎症  

摘要： 目的:探讨六堡茶经水提取后的儿茶素类成分对幽门螺杆菌(***)与胃癌AGS细胞共培养体系的影响及其潜在作用机制。方法:通过水提取法从六堡茶中提取活性物质,并利用高效液相色谱法(HPLC)检测其儿茶素类含量,从***感染患者的胃黏膜标本中分离并鉴定***临床分离株。在***与胃腺癌AGS细胞的体外共培养体系中,加入六堡茶水提物进行预处理,随后利用RT-qPCR技术检测白细胞介素-8(IL-8)和核因子κB(NF-κB)的mRNA水平。结果:本研究所用的样品中儿茶素含量为519.46 mg/g,表没食子儿茶素含量为6.38mg/g,表儿茶素含量为5.92mg/g,表没食子儿茶素没食子酸酯含量为7.34mg/g,表儿茶素没食子酸酯含量为11.11mg/g,选取两株从梧州市红十字会医院就诊患者胃组织中分离获得的携带空泡细胞毒素A(VacA)基因的***菌株体外感染AGS细胞后,观察到IL-8和NF-κB mRNA升高(P<0.001),然而,在加入30μg/mL六堡茶水提物预处理后,IL-8和NF-κB的mRNA升高被抑制(P<0.01)。结论:六堡茶水提物中含有儿茶素类成分,可抑制***感染的AGS细胞IL-8和NF-κB mRNA升高,具有作为防治***感染的植物膳食补充剂的潜力。

关键词： 肝细胞癌   补体系统   免疫调节   治疗  

摘要： 目的了解补体系统在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)免疫机制中的作用及其潜在的治疗价值。方法查阅国内外关于HCC与补体系统相关研究的文献并进行综述。结果基于HCC作为一种免疫原性癌症,补体系统作为先天免疫系统的一部分,它在免疫治疗中具有潜在的应用价值。已总结了8种补体成分(补体固有成分C1q、C3和甘露糖结合凝集素,补体调节蛋白中的可溶性蛋白补体因子H、C4b和膜型调节蛋白CD46和CD59,以及补体受体C5aR1)与HCC密切相关。补体系统激活可通过多种机制参与HCC的发生及发展,作为补体抑制剂可调控补体相关激活途径的活性,增强抗肿瘤能力,为HCC的免疫治疗提供了潜在的新策略。结论目前研究仅发现了少部分补体成分在HCC中的研究,虽然已有研究成果发现了多种补体成分在调控HCC免疫机制中发挥作用,但是仍无确切或公认的理论基础,未来仍需要进一步探索补体成分在HCC免疫中起保护性或致病性作用的机制,客观评价补体相关抑制剂疗法以及与其他抗肿瘤免疫治疗联合应用存在的风险和益处。

关键词： 凡纳滨对虾   肌质钙结合蛋白   稳定性   抗原表位  

摘要： 以凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)为原料,分离纯化和鉴定过敏原肌质钙结合蛋白(sarcoplasmiccalcium-binding protein,SCP),对其理化性质(免疫活性、热稳定性、pH值稳定性及消化稳定性)、二级结构和抗原表位进行研究。结果表明:采用蛋白粗提、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析等步骤纯化得到的蛋白分子质量为21.6 kDa,经鉴定,该蛋白为凡纳滨对虾SCP,肽段覆盖率达93.26%。凡纳滨对虾SCP具有较强的免疫活性,在热处理温度≥65℃和强酸强碱条件下免疫活性减弱;SCP对肠液消化具有较强的稳定性,而对胃液消化稳定性较差。凡纳滨对虾SCP的二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲的相对含量分别为26%、16.9%、17.5%、39.6%。利用生物信息学工具结合免疫学技术最终预测识别出8条凡纳滨对虾SCP抗原表位。

关键词： 早发性卵巢功能不全   细胞免疫   抗体   自身免疫性疾病  

摘要： 早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)是一种临床综合征,以月经紊乱伴高促性腺激素和雌激素水平降低为特征。其全球发病率有逐年上升趋势,其病因较复杂。临床发现淋巴细胞、巨噬细胞、细胞因子、类固醇分泌细胞抗体、卵巢抗体等在POI患者有高阳性率,因此免疫因素可能在POI发生中发挥着重要作用,且与自身免疫性疾病的相关。本文就POI与免疫因素的相关研究进行综述。

关键词： 凡纳滨对虾   大豆抗原蛋白   肠道细胞   致敏机制  

摘要： 本试验旨在探究大豆抗原蛋白7S和11S对凡纳滨对虾肠道细胞的致敏机制。以凡纳滨对虾肠道细胞为研究对象,试验分为对照组(NC组)、7S组、11S组,每组3个重复。细胞培养48 h后,测定各组细胞活性、细胞膜完整性相关指标、细胞抗氧化指标、细胞炎症因子含量、细胞凋亡率、细胞凋亡与紧密连接蛋白相关基因表达。结果表明:与NC组相比,7S组和11S组碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)含量显著升高(P<0.05),总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及白细胞介素-10(IL-10)含量显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),紧密连接蛋白-3(Claudin-3)、闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)mRNA相对表达量显著下调(P<0.05)。大豆抗原蛋白7S诱导ROS累积、加剧炎症反应、促进细胞凋亡及破坏细胞屏障的效果强于大豆抗原蛋白11S。综上所述,大豆抗原蛋白7S和11S通过破坏细胞膜完整性,释放AKP和LDH,诱导ROS累积,促进细胞促炎因子分泌,上调细胞凋亡因子和紧密连接蛋白基因表达水平,抑制细胞活性并导致细胞过敏反应。

关键词： PD-1   靶向纳米投递系统   胃癌   细胞活性   细胞凋亡   T细胞免疫应答因子  

摘要： 目的探讨PD-1靶向纳米投递系统对胃癌细胞活性及T细胞免疫应答因子的影响。方法取胃癌细胞,将其分为空白对照组、程序性细胞死亡蛋白-1(Programmed Cell Death-1,PD-1)抑制剂组和PD-1靶向组3组。用乳化溶剂挥发法制备PD-1靶向纳米投递系统,荧光倒置显微镜下观察转染情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,实时PCR法及免疫印迹法检测T细胞免疫应答因子表达。结果与空白对照组相比,PD-1抑制剂组、PD-1靶向组的转染率和凋亡率依次升高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,PD-1抑制剂组、PD-1靶向组细胞增殖率依次降低,且差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,PD-1抑制剂组、PD-1靶向组细胞INF-γ、IL-2、CD80的mRNA表达及蛋白表达依次升高,TNF-α、TGF-β1、PD-1的mRNA表达及蛋白表达依次降低,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PD-1靶向纳米投递系统可高效传送PD-1抑制剂到胃癌细胞,并有效改善细胞活性,调控T细胞免疫应答因子表达,可为胃癌治疗领域的进一步研究和临床应用提供新的思路和方向。