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关键词： 慢性肾衰竭   浊毒理论   核转录因子κB   白细胞介素-6   肿瘤坏死因子-α   Ⅳ型胶原  

摘要： 目的探讨基于“浊毒理论”指导下的健脾补肾化浊解毒方对5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠肾组织中核转录因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)表达的影响。方法取60只雄性SD大鼠,随机选择其中12只作为假手术组,其余大鼠实施5/6肾切除手术建立慢性肾衰竭模型。将成模存活大鼠随机分为模型组12只、氯沙坦组11只、尿毒清组11只、健脾补肾化浊解毒方组11只,氯沙坦组给予氯沙坦钾5.25 mg/(kg·d)灌胃,尿毒清组给予尿毒清颗粒2.10 g/(kg·d)灌胃,健脾补肾化浊解毒方组给予健脾补肾化浊解毒方2.35 g/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予等体积0.9%NaCl灌胃,均1次/d。连续灌胃12周后,检测各组大鼠血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平,HE染色观察残余肾组织病理形态,Western blot法与RT-qPCR法分别检测残余肾组织中NF-κB p65、TNF-α、IL-6、Col-Ⅳ蛋白和mRNA表达情况。结果模型组大鼠血清SCr、BUN水平和肾组织中NF-κB p65、TNF-α、IL-6、Col-Ⅳ蛋白及mRNA相对表达量均明显高于假手术组(P均<0.05);各药物组大鼠血清SCr、BUN水平和肾组织中NF-κB p65、TNF-α、IL-6、Col-Ⅳ蛋白及mRNA相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05),且健脾补肾化浊解毒方组大鼠血清SCr、BUN水平和肾组织中Col-Ⅳ蛋白及mRNA相对表达量均明显低于氯沙坦组和尿毒清组(P均<0.05)。结论健脾补肾化浊解毒方可明显改善慢性肾衰竭大鼠的肾功能及肾组织病理改变,其作用机制可能与降低NF-κB p65、TNF-α、IL-6、Col-Ⅳ的表达,从而改善微炎症状态,减少细胞外基质沉积,减轻肾间质纤维化有关。

关键词： IL-22   肺结核   结核合并糖尿病   细胞因子   免疫  

摘要： 结核病的防治是全世界关注的公共卫生问题,糖尿病会增加结核病的发病风险,故结核合并糖尿病是一个值得关注的重点问题,近年来,细胞因子与抗结核感染的免疫机制密切相关,其中尤以IL-22与结核病的免疫联系紧密,IL-22与结核合并糖尿病的免疫联系的研究也是值得重点关注的,本文拟从IL-22的来源、结构、信号通路及IL-22在结核中,在结核合并糖尿病中的相关机制及作用的研究进展做一综述,从几个方面一同来探讨IL-22对于结核合并糖尿病疾病中的研究意义和价值,讨论IL-22能否成为这一合并病的评估疾病病情程度及预后的观测指标之一。The prevention and control of tuberculosis is a public health issue of global concern. Diabetes increases the risk of tuberculosis, making the co-occurrence of tuberculosis and diabetes a significant issue worthy of attention. In recent years, cytokines have been closely related to the immune mechanisms against tuberculosis infection, particularly IL-22, which has a strong immunological connection with tuberculosis. The research on the immune relationship between IL-22 and tuberculosis complicated by diabetes is also deserving of special focus. This paper aims to provide a review of the research progress on IL-22, including its sources, structure, signaling pathways, and its related mechanisms and roles in tuberculosis and in tuberculosis complicated by diabetes. Several aspects will be explored to discuss the significance and value of IL-22 in the context of tuberculosis and diabetes co-occurrence, as well as to evaluate whether IL-22 could serve as a potential observational indicator for assessing disease severity and prognosis in this comorbidity.

关键词： 肺炎支原体肺炎   炎症因子   病情程度   预后  

摘要： 目的探讨肺炎支原体肺炎(MMP)患儿血清粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、可溶性B7-H3(sB7-H3)、肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)水平与其病情程度及预后的相关性。方法选取108例MMP患儿(2020年6月-2023年9月),根据其病情程度分组,67例纳入轻症组,41例纳入重症组,另选取54例同期健康体检儿童作为正常对照组。比较3组及不同预后患儿血清G-CSF、sB7-H3、SP-D、IL-6、CRP水平及临床肺部感染(CPIS)评分,分析各血清指标对重症MMP的诊断价值。结果各组血清G-CSF、sB7-H3、SP-D、IL-6、CRP水平差异有统计学意义(P<0.05);重症组CPIS评分高于轻症组(P<0.05);血清G-CSF、sB7-H3、SP-D、IL-6、CRP与CPIS评分均呈正相关(P<0.05);血清G-CSF、sB7-H3、SP-D、IL-6、CRP单独诊断重症MMP的AUC分别为0.782(95%CI:0.692-0.856)、0.815(95%CI:0.728-0.883)、0.745(95%CI:0.652-0.824)、0.778(95%CI:0.688-0.853)、0.774(95%CI:0.683-0.849),联合预测的AUC为0.914,敏感度为77.61%,特异度为95.12%,优于各血清指标单独诊断;预后不良患者血清G-CSF、sB7-H3、SP-D、IL-6、CRP水平均较预后良好患者高(P<0.05)。结论血清G-CSF、sB7-H3、SP-D、IL-6、CRP升高可加重MMP进展,联合检测可作为临床早期诊断重症MMP的重要辅助指标,还能为临床评估预后提供有效信息。

关键词： 单克隆抗体   轻链   肾组织石蜡切片   免疫荧光法  

摘要： 目的:探索单克隆轻链抗体行肾组织石蜡切片染色的临床意义。方法:分析2022年1月至2023年12月在国家肾脏疾病临床医学研究中心住院行自体肾活检的临床病理资料,在8376例肾活检患者中筛选了757例同时行冰冻切片和石蜡切片轻链染色的患者资料,对两种免疫染色的结果进行分析比较。结果:757例患者中284例无冰冻组织或冰冻组织无肾小球,450例冰冻组织和石蜡组织轻链染色结果基本一致,23例冰冻切片单克隆轻链抗体荧光染色结果不能明确沉积物是否为单克隆,而石蜡切片单克隆轻链抗体荧光染色能更好地区分两种轻链的染色强度,得以明确肾脏疾病诊断,包括增生性肾小球肾炎伴单克隆免疫球蛋白沉积10例,系统性轻链型淀粉样变性8例,骨髓瘤管型肾病3例,轻链近端肾小管病2例。结论:本文首次全面分析了轻链染色的质量和应对策略,发现单克隆轻链抗体石蜡切片荧光染色作为冰冻切片荧光染色的补充,具有重要诊断价值,尤其是对于单克隆免疫球蛋白相关肾病。

关键词： KL-6   特发性肺含铁血黄素沉着症   儿童肺炎   生物标志物  

摘要： 目的本研究旨在探讨涎液化糖链抗原-6(krebs von den lungen-6,KL-6)在特发性肺含铁血黄素沉着症(idiopathic pulmonary hemosiderosis,IPH)患儿辅助诊断中的临床应用价值。方法收集2014年6月至2024年7月期间于广州医科大学附属第一医院就诊的140例患儿,分为病例组与对照组,其中病例组根据疾病类型细分为IPH组(32例)、间质性肺炎(interstitial lung disease,ILD)组(22例)、肺炎(pneumonia,PN)组(60例),对照组为非肺部疾病(non-pulmonary disease,NPD)组(26例)。以上患儿检测血清KL-6水平,分析KL-6在各组患儿中的表达差异。结果KL-6阳性率在各组患儿中从高到低分别为IPH(68.75%)、ILD(45.45%)、PN(1.69%)和NPD(0.00%),组间阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=66.10,P<0.001)。IPH组患儿血清KL-6平均水平高于PN组患儿(Ζ=-6.92,P<0.001)。诊断试验结果显示ROC曲线下面积为0.940(95%CI:0.89~1.00,P<0.001),截断值为392.00 U/mL,灵敏度为81.30%,特异度为95.00%。结论KL-6在鉴别IPH患儿与PN和NPD患儿中具有较高的诊断价值,可作为IPH辅助诊断的血液生物标志物。

关键词： 铜绿假单胞菌   外膜蛋白OprF   单克隆抗体   生物膜干涉技术   胶体金免疫层析试纸   灵敏度   特异性   稳定性  

摘要： [目的]筛选一对抗OprF蛋白单克隆抗体,制备快速检测铜绿假单胞菌的胶体金免疫层析试纸。[方法]将重组OprF蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,通过间接ELISA检测、BLI技术以及Western Blot鉴定抗体的特异性及结合力,以双抗体夹心法制备胶体金免疫层析试纸,对其灵敏度、特异性、稳定性进行分析测试。[结果]筛选出2株高亲和力抗体,均能特异性识别OprF蛋白,所制备胶体金免疫层析试纸检测铜绿假单胞菌的检出限达到2.5×10^(3) CFU/mL;试纸检测特异性强,与呼吸道常见病原菌如肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肺炎支原体、嗜肺军团菌、卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、唾液链球菌、化脓链球菌均无交叉反应;试纸稳定性高,室温下保存1年仍具有良好的稳定性。[结论]所研制的免疫层析试纸在15 min内对铜绿假单胞菌快速检测,灵敏度为2.5×10^(3) CFU/mL,对呼吸道常见的10种病原体均无交叉反应,且在室温可稳定保存1年,满足临床应用的相关要求。

关键词： 神经母细胞瘤   神经节苷脂   单克隆抗体   免疫疗法  

摘要： 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)源于原始神经嵴细胞,占儿童恶性肿瘤8%~10%,病死率达15%。神经节苷脂-2(ganglioside-2,GD2)在NB细胞中高表达,在正常细胞中表达受限,因此是神经母细胞瘤免疫的理想靶点。抗GD2单克隆抗体结构均一、纯度高,可特异性靶向NB而不影响正常组织,在肿瘤治疗尤其是改善高危神经母细胞瘤患儿临床结局方面具有较大的优势,有望成为未来使用单克隆抗体免疫治疗肿瘤的模型。本文总结anti-GD2 mAbs在神经母细胞瘤治疗中的研究进展,包括其作用机制、制剂类型、免疫疗法及临床应用,并阐述其面临的挑战及治疗NB的前景展望,以期为临床转化应用及设计给药方案提供思路。

关键词： 慢性阻塞性肺疾病   急性加重期   中性粒细胞淋巴细胞比值   炎症   再住院  

摘要： 目的探讨中性粒细胞淋巴细胞比值变异度对急性加重期慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)患者再住院的预测价值。方法选取2018年1月至2022年6月温州市中西医结合医院收治的AECOPD患者180例。收集所有患者临床资料,近3个月内稳定期及住院首次实验室检查结果。出院后,对患者进行为期6个月的随访,记录患者因AECOPD再次住院发生情况。采用多因素Cox回归分析探究影响再住院的相关因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估相关指标的预测价值。结果单因素Cox回归分析显示,年龄、慢性阻塞性肺疾病(COPD)病程、家庭氧疗、口服糖皮质激素、白细胞计数、中性粒细胞百分数、淋巴细胞百分数、急性加重期中性粒细胞和淋巴细胞计数比值(NLR)、NLR变异度(NLR)及血小板与淋巴细胞比值(PLR)是6个月内AECOPD再住院的相关影响因素(均<0.05)。多因素Cox回归分析显示,COPD病程、家庭氧疗、口服糖皮质激素、白细胞计数、急性加重期NLR及NLR是6个月内AECOPD再住院的独立影响因素(均<0.05)。ROC曲线分析显示,NLR曲线下面积为0.868,大于白细胞计数及急性加重期NLR。高NLR组住院天数多于低NLR组,6个月内急性加重再住院,静脉糖皮质激素、无创呼吸机应用及联合两种以上抗生素占比均高于低NLR组(均<0.05)。结论NLR能有效反映COPD患者病情程度,对于6个月内急性加重再住院的预测价值优于常用临床炎症指标。

关键词： G蛋白偶联受体   T淋巴细胞   免疫   结核  

摘要： G蛋白偶联受体(GPCRs)是一类跨膜受体超家族,参与多种信号转导通路,在细胞迁移、代谢等生理过程中发挥重要功能。T淋巴细胞是重要的免疫细胞,参与炎症反应过程并在细胞免疫中发挥重要作用。目前已发现多种GPCRs在T淋巴细胞中表达并参与T淋巴细胞免疫调节过程,本文将对GPCRs在T淋巴细胞免疫调节中的作用进行综述。

关键词： 羚牛   IFN-γ   基因克隆   生物信息学分析   原核表达   IPTG诱导  

摘要： 旨在研究羚牛γ干扰素(IFN-γ)基因结构与功能,为进一步增强羚牛的免疫调节能力提供理论依据。通过RT-PCR方法克隆羚牛IFN-γ基因,并运用多种生物信息学分析工具对其结构与功能进行深入研究。将IFN-γ基因序列连入原核表达载体,并转化大肠杆菌诱导表达。结果显示,羚牛IFN-γcDNA序列全长501 bp,编码166个氨基酸。蛋白高级结构预测结果显示,二级结构以α螺旋为主,存在13个磷酸化修饰位点,并含有1个信号肽、1个低度复杂区、1个跨膜结构域及1个IFN-γ结构域,其中IFN-γ结构域位于胞外区。序列比对分析发现其与绵羊、山羊、家牛、水牛、人、黑猩猩、小鼠、鸡的核苷酸序列同源性分别为99.0%、98.8%、97.2%、96.2%、75.8%、75.4%、64.1%、54.1%,氨基酸序列同源性分别为99.4%、99.4%、95.8%、95.8%、62.7%、62.7%、43.9%、33.5%。系统进化树分析结果显示,羚牛与山羊、绵羊的亲缘关系最近。经SDS-PAGE和Western-blot检测发现,重组IFN-γ蛋白以可溶性形式大量表达,分子质量约为34 ku。通过密码子优化及不同浓度IPTG诱导表达等原核表达优化策略发现,密码子优化能促进重组蛋白的高效表达,且最佳诱导浓度为0.9 mmol·L^(-1)。