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关键词： 视神经脊髓炎谱系疾病   IL-6   免疫球蛋白  

摘要： 目的检测儿童视神经脊髓炎谱系疾病患者IL-6及免疫球蛋白水平,探讨二者的相关性。方法选取2019年1月-2023年12月于新疆医科大学第一附属医院住院的20例儿童视神经脊髓炎谱系疾病患者为观察组,选取同期20例儿童非炎症性神经系统疾病患者为对照组,采用SPSS26.0软件进行统计学分析,比较两组IL-6水平及免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、IgE水平,并探讨二者的相关性。结果观察组IL-6水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组IgG、IgM、IgE水平低于对照组,IgA高于对照组,差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后IL-6水平较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05),观察组治疗前后免疫球蛋白水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组IL-6与IgG呈中等程度负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-6在视神经脊髓炎谱系疾病的发病机制中起到了一定的作用,且与免疫球蛋白(IgG)具有一定的相关性。

关键词： 单克隆抗体   N-糖谱   RapiFlior-MS荧光检测   超高效液相色谱  

摘要： 目的 建立定量检测单克隆抗体中N-糖谱分布的亲水相互作用超高效液相色谱(hydrophilic interaction ultrahigh performance liquid chromatography,HILIC-UPLC)RapiFlior-MS荧光检测法,并进行验证。方法 采用GlycoWorks RapiFluor-MS N糖分析试剂盒,用N-糖苷酶(PNGase F)和衍生试剂对N糖链快速酶切释放,再对游离N糖进行标记衍生,最后经UPLC进行分离检测:激发波长265 nm,发射波长425 nm,进样量10μL,柱温60℃。按峰面积归一化法计算,各N糖型峰面积占所有峰面积之和的百分比即为该N糖的相对百分含量。对建立的方法进行系统适用性、专属性、线性及范围、定量限、精密度、准确度、溶液稳定性和耐用性验证。用建立的方法检测6批单克隆抗体的N-糖谱分布。结果 建立的方法系统适用性、专属性良好,抗体浓度在0.002~5.2 mg/mL范围内,糖型G0F标准曲线线性较好,R^(2)> 0.99;定量限为0.09%;中间精密度验证中,G0F的相对百分含量的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.33%;准确度验证中,G0F、G1Fa、G1Fb、G2F各N糖型的回收率在90%~110%范围内;抗体原液在(5±3)℃放置48 h,各糖型相对百分含量的RSD均≤2.0%;对色谱柱批次、流动相pH、柱温、试剂盒批次均具有一定的耐用性。6批抗体原液中,G0F、G1Fa、G1Fb相对百分含量的RSD均<5.0%,G2F相对百分含量的RSD<10.0%,生产过程工艺稳定,批间一致性良好。结论 建立的GlycoWorksRapiFluor-MS N糖分析试剂盒检测抗体中N-糖谱分布的方法专属性强,系统适用性、精密度、准确度、耐用性、稳定性良好,可用于抗体研发及生产过程中N-糖谱的监测。

摘要： The authors regret that Figure 5A in the original article reanalyzed RNA sequencing data from a previously published study by van Rosmalen et al. ( Cell Reports 2024;43(3):113951, https://***/10.1016/***.2024.113951), but the figure legen...

关键词： 网络药理学   肺炎喘嗽口服液   儿童   急性肺炎   医院制剂   肿瘤坏死因子-α   核因子κB  

摘要： 目的 探索医院制剂肺炎喘嗽口服液(FYCS)对急性肺部炎症的保护作用及其分子机制。方法 通过网络药理学识别潜在靶点和通路,分子对接验证活性化合物和靶点之间的相互作用。利用脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺部炎症模型和RAW264.7细胞炎症模型评估FYCS的抗炎作用。在动物实验中,检测肺组织的湿重/干重比、肺组织病理变化,评估FYCS对急性肺部炎症的干预效果。同时,采用酶联免疫吸附法、蛋白免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)等方法对动物和细胞样本中信号通路相关蛋白和因子进行检测。结果 基于分子复合物检测(MCODE)、GO功能注释及KEGG通路富集分析结果,锁定肿瘤坏死因子(TNF)/核因子κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症通路。实验表明,FYCS可减轻LPS导致的小鼠肺水肿,改善急性肺部炎症病理损伤,并降低炎症细胞因子TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)分泌水平。蛋白免疫印迹法和RT-qPCR结果显示,与对照组相比,模型组中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、IL-1β、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)和TNF-α的表达水平显著增加,但是这种增加在FYCS处理组得到有效抑制,并显示出与地塞米松和MCC950相似的效果。结论 FYCS具有多成分多靶点的作用,主要通过抑制TNF/NF-κB/NLRP3通路缓解急性肺部炎症,为儿科急性肺部炎症中药开发提供了依据。

关键词： 山羊支原体   DnaK蛋白   重组质粒   多克隆抗体  

摘要： 本研究旨在解析山羊支原体肺炎亚种(Mccp)分子伴侣DnaK的遗传与亚细胞分布特征。通过密码子优化、原核表达及纯化获得高纯度rDnaK蛋白,免疫家兔制备高效价多克隆抗体(效价1:102 400)。Western blot分析显示,DnaK蛋白无信号肽,具良好免疫原性,分布于Mccp胞质与细胞膜中,且膜含量略高。该研究为阐明Mccp致病机制及开发诊断与疫苗产品提供了理论基础。

关键词： 百日咳   肺炎   血清   肺泡灌洗液   T淋巴细胞亚群   炎症因子   预后  

摘要： 目的 探讨百日咳合并肺炎患儿的免疫反应及炎症因子水平的变化,并分析其与临床预后的关系。通过监测血清和肺泡灌洗液(BALF)中的T淋巴细胞亚群及炎症因子水平,评估免疫系统在疾病进展中的作用。方法 回顾性分析2021年8月至2024年12月在东莞市第八人民医院就诊的35例百日咳合并肺炎患儿病例,按预后分为预后良好组(n=15)和预后不良组(n=20)。治疗前后,分别测定血清及BALF中总T淋巴细胞(CD3~+)、辅助性T淋巴细胞(CD4~+)、细胞毒性T淋巴细胞(CD8~+)和白细胞介素(IL)-6、IL-8、C反应蛋白(CRP)和IL-1β的水平,采用流式细胞仪和全自动生化分析仪进行检测,分析两组患儿的免疫反应与临床预后的关系。结果 治疗前,预后良好组血清CD3~+、CD4~+占比均高于预后不良组(P<0.05),而CD8~+占比明显低于预后不良组(P<0.05);治疗后,两组血清中CD3~+、CD4~+占比逐渐增高(P<0.05),而CD8~+占比逐渐降低(P<0.05)。预后良好组治疗3、14 d BALF中CD3~+、CD4~+占比增高幅度均明显大于预后不良组(P<0.05),预后良好组治疗3、14 d BALF中CD8~+占比降低幅度均明显低于预后不良组(P<0.05)。治疗前,预后良好组血清中IL-6、IL-8、CRP、IL-1β水平均低于预后不良组(P<0.05);治疗后,两组血清中IL-6、IL-8、CRP、IL-1β水平逐渐降低(P<0.05)。预后良好组治疗3、14 d BALF中IL-6、IL-8、CRP、IL-1β水平降低幅度均明显大于预后不良组(P<0.05)。结论 百日咳合并肺炎患儿的免疫反应和炎症因子水平与临床预后密切相关。预后良好组在免疫调节和炎症控制方面表现出更好的反应,这可能有助于改善临床结局。因此,免疫反应和炎症因子的监测可作为百日咳合并肺炎患儿预后的重要指标,并为个性化治疗方案的制定提供依据。

关键词： 原发性急性闭角型青光眼   微小核糖核酸-210-3p   白细胞介素-4   房水   白内障  

摘要： 目的 探究微小核糖核酸(miR)-210-3p和白细胞介素(IL)-4在原发性急性闭角型青光眼(APACG)患者房水中表达及意义。方法 纳入2022年8月至2024年12月于攀枝花市中心医院行小梁切除术治疗的120例(120眼)APACG患者为APACG组,另选同期于本院行白内障超声乳化术治疗的120例(120眼)白内障患者为白内障组,比较两组房水miR-210-3p、IL-4水平。另根据手术结果将APACG组分为完全成功组(70例,70眼)、条件成功组(16例,16眼)与失败组(34例,34眼),采用多分类Logistic回归分析房水miR-210-3p、IL-4水平与APACG患者小梁切除术失败的关系,并以受试者工作特性曲线(ROC)分析其预测效能。结果 APACG组房水miR-210-3p及IL-4水平均较白内障组更高,差异有统计学意义(P<0.05);多分类Logistic回归分析显示,房水miR-210-3p及IL-4水平降低为完全成功组、条件成功组的可能性高(P<0.05)。ROC曲线分析显示,房水miR-210-3p及IL-4单独、联合检测的曲线下面积为0.751、0.715以及0.816,且联合检测的预测价值最佳(P<0.05)。结论 miR-210-3p及IL-4在APACG患者房水中表达量均显著上调,且二者联合检测对APACG患者小梁切除术的失败风险具有较高预测价值。

关键词： 脓毒血症   PD-1   T淋巴细胞亚群   细胞因子  

摘要： 目的通过分析T淋巴细胞亚群中程序性死亡受体蛋白1(PD-1)表达与血清TH1/TH2细胞因子间的关系,以探讨其在儿童脓毒血症的作用。方法应用流式细胞术检测47例脓毒血症患儿T淋巴细胞亚群以及PD-1在T细胞亚群中的表达。CBA方法检测脓毒血症患儿血清TH1/TH2细胞因子表达水平。同时以35例健康儿童作为对照组。结果脓毒血症患儿T细胞亚群中CD4^(+)细胞表达明显低于对照组[(28.64±3.10)%vs.(42.06±4.15)%,P<0.01],CD8^(+)细胞表达明显高于对照组[(41.10±4.90)%vs.(27.17±3.42)%,P<0.01]。脓毒血症患儿中休克组CD4^(+)细胞表达低于未休克组[(26.23±1.53)%vs.(29.77±3.02)%,P<0.01],休克组CD8^(+)表达高于未休克组[(46.01±4.34)%vs.(38.80±3.15)%,P<0.01]。脓毒血症患儿CD3^(+)/PD-1,CD4^(+)/PD-1,CD8^(+)/PD-1表达均高于对照组,分别为[(19.48±5.01)%vs.(9.68±1.82)%],[(27.60±3.83)%vs.(10.10±1.62)%],[(28.42±6.61)%vs.(9.98±1.35)%],均P<0.01。脓毒血症患儿中休克组CD3^(+)/PD-1、CD4^(+)/PD-1和CD8^(+)/PD-1表达显著高于脓毒血症未休克组,分别为[(25.40±3.84)%vs.(16.71±2.41)%],[(27.60±3.83)%vs.(17.76±1.63)%],[(36.41±4.56)%vs.(24.67±3.18)%,均P<0.01]。脓毒血症组患儿血清IFN-γ、IL-2表达水平与对照组比较显著降低,分别为[(3.12±0.82)pg/ml vs.(3.49±0.57)pg/ml],[(2.59±0.70)pg/ml vs.(3.73±0.82)pg/ml,均P<0.01]。脓毒血症组患儿血清IL-6、IL-10表达水平显著高于对照组,分别为[(506.47±108.14)pg/ml vs.(4.39±0.64)pg/ml],[(77.98±21.23)pg/ml vs.(4.02±0.64)pg/ml](均P<0.01)。脓毒血症组患儿休克组血清IFN-γ、IL-2表达水平与脓毒血症组患儿未休克组比较显著降低,分别为[(2.32±0.70)pg/ml vs.(3.49±0.57)pg/ml]、[(2.04±0.56)pg/ml vs.(2.85±0.61)pg/ml](均P<0.01)。脓毒血症组患儿血清IL-6、IL-10表达水平显著高于脓毒血症组患儿休克组,分别为[(612.98±76.12)pg/ml vs.(456.55±81.70)pg/ml]、[(105.60±10.36)pg/ml vs.(65.03±8.84)pg/ml,均P<0.01]。PD-1在CD3、CD4^(+)、CD8^(+)中的表达与IFN-γ、IL-2表达水平负相关(均P<0.01),与IL-6、IL-10表达水平呈正相关(均P<0.01)。结论PD-1在脓毒血症患儿T细胞亚群中的表达增高,至脓毒血症休克期更为明显,提示PD-1过表达抑制T细胞功能,可能促进脓毒血症病程进展。

关键词： 支原体肺炎   儿童   微小RNA-155   D-二聚体  

摘要： 目的 研究支原体肺炎(MPP)儿童血清细胞因子水平对预后的预测价值。方法 对陕西省空军军医大学第二附属医院2021年5月至2024年5月确诊并进行治疗的MPP儿童临床资料进行分析。根据预后将其分为预后良好组和预后不良组;采用多因素Logistic回归模型分析MPP儿童预后不良的影响因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清细胞因子水平对MPP儿童预后不良的预测价值。结果 本研究共纳入MPP儿童5 624例,支原体肺炎儿童预后不良发生率为23.88%(1343/5624)。多因素Logistic回归结果显示,肺实变、胸腔积液、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)、血清γ干扰素(IFN-γ)、D-二聚体、白细胞介素(IL)-10、微小RNA-155(miR-155)均是MPP儿童发生预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,TNF-α、CRP、IFN-γ、D-二聚体、IL-10、miR-155水平联合预测MPP儿童预后不良的曲线下面积(AUC)最高,为0.872。结论 高表达的TNF-α、CRP、IFN-γ、D-二聚体、IL-10、miR-155是MPP儿童发生预后不良的危险因素,联合检测上述指标可为MPP患儿预后评估提供参考。

关键词： 多酚类   羟基酪醇醋酸酯   类风湿关节炎   成纤维样滑膜细胞  

摘要： 目的探讨羟基酪醇醋酸酯(HT-AC)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖、迁移、侵袭及炎症反应的抑制作用。方法研究时间2023年6―10月。不同浓度的羟基酪醇醋酸酯(25、50和100μmol/L)预处理后使用10μg/L TNF-α诱导RA-FLS 48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖情况,划痕实验、Transwell细胞迁移和侵袭实验观察细胞迁移和侵袭,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达,蛋白质印迹法检测N-cadherin、MMP-3、IL-1β和组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)的蛋白表达。结果与溶剂对照组相比,TNF-α显著促进RA-FLS增殖[(147.90±10.61)%比(100.00±7.80)%]、迁移[(369.30±45.76)个比(213.70±34.43)个]和侵袭[(143.30±17.90)个比(71.33±16.29)个](P<0.05),而50或100μmol/L的羟基酪醇醋酸酯处理显著降低TNF-α诱导的RA-FLS的增殖[(129.90±7.37)%、(123.10±13.77)%](P<0.05),25、50或100μmol/L的羟基酪醇醋酸酯处理显著降低TNF-α诱导的RA-FLS迁移[(273.70±37.45)个、(239.70±26.58)个、(178.70±19.43)个]和侵袭[(106.00±10.00)个、(85.33±11.06)个、(72.00±7.55)个](P<0.05)。TNF-α显著增加RA-FLS中N-cadherin、MMP-3和IL-1β的mRNA和蛋白表达(P<0.05),而50或100μmol/L的羟基酪醇醋酸酯处理显著抑制TNF-α诱导的RA-FLS中N-cadherin、MMP-3和IL-1β的mRNA和蛋白表达(P<0.05)。此外,50或100μmol/L的羟基酪醇醋酸酯处理显著抑制TNF-α诱导的RA-FLS中HDAC3的蛋白表达(P<0.05)。结论羟基酪醇醋酸酯可能通过调控HDAC3的蛋白表达来抑制FLS的增殖、迁移、侵袭及炎症反应在RA疾病中发挥保护作用。