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关键词： 非洲猪瘟病毒(ASFV)   分子内佐剂   亚单位疫苗   体液免疫   细胞免疫  

摘要： 为了探究两种分子内佐剂促吞噬肽Tuftsin和破伤风毒素肽TT联合作用对非洲猪瘟病毒(ASFV)重组蛋白P753体液和细胞免疫的影响,本试验采用生物信息学软件确定了ASFV结构蛋白P72、P54和P30的优势表位并构建重组载体pET-28a(+)-p753和pET-28a(+)-p753-Tuftsin-TT,利用大肠杆菌表达系统表达重组蛋白,经纯化和透析复性后采用蛋白质印迹法(Western blot)和斑点酶联免疫吸附测定(Dot-ELISA)鉴定重组蛋白的免疫原性和免疫反应性。将2种重组蛋白与兽用商品化疫苗佐剂ISA 61 VG混匀后免疫小鼠,通过检测小鼠血清抗体水平、脾脏淋巴细胞增殖情况和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)分泌水平来评价2种重组蛋白诱导的体液和细胞免疫效果。结果显示,2种重组蛋白在37℃、0.5 mmol/L IPTG条件下诱导表达4 h时以包涵体形式表达且表达量最高,经纯化复性后均具有免疫原性和免疫反应性。免疫小鼠后,P753组和P753-Tuftsin-TT组抗体水平均在首免42 d进入平台期,抗体水平均高于PBS组,其中,P753-Tuftsin-TT组抗体水平最高,抗原刺激指数和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)含量极显著高于P753组(P <0.000 1)。结果表明,分子内佐剂Tuftsin和TT联合使用可显著提升P753重组抗原引起的体液和细胞免疫应答能力,为ASFV亚单位疫苗佐剂的研发提供参考。

关键词： 病毒性肝炎肝硬化   干扰素α2a   5’-核苷酸酶   天冬氨酸转氨酶/丙氨酸转氨酶   肝储备功能   腹水   预测价值  

摘要： 目的:探究病毒性肝炎肝硬化患者血清干扰素α2a(IFN-α2a)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、天冬氨酸转氨酶/丙氨酸转氨酶(AST/ALT)水平变化与肝储备功能的关系及其对合并腹水的预测价值。方法:纳入病毒性肝炎肝硬化患者85例为研究组,纳入同期体检健康者85例为对照组。比较两组肝功能指标[AST、ALT、白蛋白(ALB)、总胆红素(STB)]、肝储备功能指标[吲哚菁绿15 min滞留率(ICGR 15)、肝有效血流量(EHBF)、肝功能CTP评分]以及IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT水平。分析IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT水平与肝储备功能指标的相关性。根据患者是否合并腹水将研究组患者分为无腹水组和腹水组,比较两组上述指标。分析IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT对病毒性肝炎肝硬化患者合并腹水的预测价值。结果:与对照组比较,研究组AST、ALT、STB、ICGR15、IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT水平和CTP评分升高,ALB、EHBF水平降低(均P<0.05)。IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT水平与ICGR15、CTP评分呈正相关,与EHBF呈负相关(均P<0.05)。85例患者中,未合并腹水54例(无腹水组),合并腹水31例(腹水组)。与无腹水组比较,腹水组ICGR 15、IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT水平和CTP评分升高,ALB、EHBF水平降低(均P<0.05)。IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT对病毒性肝炎肝硬化合并腹水有较高的预测价值,三项联合检测的预测价值更高(均P<0.05)。结论:病毒性肝炎肝硬化患者血清IFN-α2a、5’-NT、AST/ALT水平升高,与肝储备功能具有相关性,三项联合检测对合并腹水亦有良好的预测价值。

关键词： CT   急性淋巴细胞白血病   肺部真菌感染   风险评估  

摘要： 目的 探讨CT在急性淋巴细胞白血病患儿肺部真菌感染风险评估中的应用价值。方法 选取78例急性淋巴细胞白血病患儿,根据支气管肺泡灌洗液的真菌检测结果分为未感染组和感染组。记录肺部真菌感染的主要类型,对比X线、 CT对肺部真菌感染的阳性检出率,分析患儿的CT图像特征。结果 感染组患儿以白色念珠菌、曲霉菌及热带念珠菌为主要感染真菌。CT对肺部真菌感染的阳性检出率为71.05%,高于X线的21.05%(P <0.05)。感染组的CT晕征、空气新月征占比均高于未感染组,肺叶段实变、支气管血管束占比均低于未感染组(P <0.05)。结论 急性淋巴细胞白血病患儿化疗后,肺部真菌感染的CT表现复杂;当CT示多肺段、多叶、多形、多灶病变时,应高度怀疑真菌感染。

关键词： 糖尿病酮症酸中毒   细菌感染   正五聚蛋白3   可溶性白细胞分化抗原14   相关性   影响因素   预测价值  

摘要： 目的:探讨血清正五聚蛋白3(PTX3)和可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)水平检测对糖尿病酮症酸中毒(DKA)合并细菌感染的预测价值。方法:选取DKA合并细菌感染患者116例为DKA合并感染组,选取DKA未合并感染者115例为DKA未合并感染组。入院后24 h内收集临床资料并进行实验室生化指标检测。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测入院后24 h内和治疗后血清PTX3、sCD14水平,分析DKA合并细菌感染患者入院后24 h内血清PTX3、sCD14与序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、急性生理与慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分、白细胞计数(WBC)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)的相关性,DKA合并细菌感染的影响因素,以及入院后24 h内血清PTX3和sCD14水平对DKA合并细菌感染的预测价值。结果:DKA合并感染组入院后24 h内SOFA评分、APACHEⅡ评分、WBC、CRP、PCT、PTX3、sCD14水平高于DKA未合并感染组(均P<0.05)。两组治疗后血清PTX3、sCD14水平较入院后24 h内降低(均P<0.05)。DKA合并细菌感染患者入院后24 h内血清PTX3和sCD14水平与SOFA评分、APACHEⅡ评分、WBC、CRP、PCT呈正相关,且血清PTX3和sCD14水平呈正相关(均P<0.05)。入院后24 h内SOFA评分、APACHEⅡ评分、WBC、CRP、PCT、PTX3、sCD14是DKA患者合并细菌感染的独立危险因素(均P<0.05)。入院后24 h内血清PTX3、sCD14联合预测DKA合并细菌感染的曲线下面积(AUC)大于单项(均P<0.05)。结论:DKA合并细菌感染患者入院后24 h内血清PTX3和sCD14水平升高,两项联合检测对DKA合并细菌感染具有较高的预测价值。

关键词： HLA-B抗原   B~*35∶186   基因重组   序列分析   蛋白三维结构分析  

摘要： 目的 研究HLA-B等位基因座位上的重组交换,探讨HLA新等位基因产生的分子遗传机制,预测分析重组氨基酸残基改变对编码蛋白分子三维空间结构的影响。方法 应用基于Luminex平台的聚合酶链式反应-序列特异性寡核苷酸探针(polymerase chain reaction-sequence specific oligonucleotide probes, PCR-SSOP)方法对先证者进行HLA基因分型,采用直接DNA测序方法和基因克隆方法进行外显子1~4序列分析。将该基因序列经IMGT/HLA database中“Alignment”程序进行比对,以确定B等位基因重组发生的位置。用Swiss-Model软件进行同源建模后,采用Swiss Pdb Viewer软件对分子间三维结构进行模拟,FATCAT在线软件对分子间三维结构进行差异比对。结果 PCR-SSOP基因分型显示先证者HLA-B位点反应格局异常,疑为HLA新等位基因。基因克隆后测序结果显示,其中1个等位基因为B^(*)13∶02,另1个等位基因序列与所有已知HLA等位基因不同,与同源性最高的HLA-B^(*)35∶01∶01∶01基因序列相比在第2外显子c.259-c.299位置发生12个碱基替换,导致了8氨基酸改变。该序列外显子1、3、4及内含子1、2、3和外显子2在c.74-c.258序列与HLA-B^(*)35∶01∶01∶01序列一致,外显子2的c.259-c.343序列与HLA-B^(*)46∶01∶01序列完全一致。蛋白分子三维空间结构分析变异等位基因与B^(*)35∶01∶01∶01和B^(*)46∶01∶01结构相似,重组部位氨基酸p.63-p.79局部氢键发生改变。结论 本研究在中国汉族人群发现了1例B等位基因间重组形成的HLA新等位基因,被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B^(*)35∶186,阐明了新等位基因产生的来源,为深入研究基因重组及HLA多态性形成机制提供了理论依据。

关键词： 中性粒细胞/淋巴细胞比值   心房颤动   全因死亡   心血管死亡  

摘要： 目的 探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与老年非瓣膜性心房颤动(NVAF)患者全因死亡及心血管死亡的相关性。方法 本研究采用回顾性队列研究,选取2022年1—12月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院的老年NVAF患者为研究对象,进行生存情况的随访。采用Cox比例风险回归模型和Kaplan-Meier生存曲线评估NLR与老年NVAF患者死亡率的关系。采用限制性立方样条曲线评估NLR与死亡风险的影响,ROC曲线分析NLR的预测能力。结果 共纳入484例患者,高NLR水平组患者的全因死亡及心血管死亡风险显著增加。Cox回归分析显示NLR是老年NVAF患者全因死亡的独立预测因素。NLR对老年NVAF患者死亡风险具有较好的预测能力。结论 NLR水平升高与老年NVAF患者死亡风险具有显著相关,有助于识别临床预后较差的老年NVAF患者。

关键词： 脑小血管病   认知障碍   白细胞介素6   甲状腺激素   影像学总负荷  

摘要： 目的探讨血清IL-6、胱抑素C(cystatinC,CysC)、三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)水平以及影像学总负荷评分与脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)患者认知障碍的相关性。方法回顾性连续纳入2021年1月—2023年1月就诊的CSVD患者,根据住院期间MoCA评分分为认知障碍组和认知功能正常组。收集患者的人口学信息、既往病史、实验室及影像学检查等数据。分析血清IL-6、CysC、T3水平以及影像学总负荷评分对CSVD患者认知障碍的预测价值。结果共纳入CSVD患者142例,其中认知障碍组61例(43.0%),认知功能正常组81例(57.0%)。与认知功能正常组相比,认知障碍组IL-6、Hcy、CysC水平较高,T3水平较低,影像学总负荷中度和重度的比例较高,差异有统计学意义。多因素logistic回归分析显示,血清IL-6水平升高(OR 1.070,95%CI 1.039~1.103,P<0.001)、CysC水平升高(OR 2.117,95%CI 1.027~5.500,P=0.004)、T3水平降低(OR 2.314,95%CI 1.361~3.935,P=0.003)以及影像学总负荷中度(OR 1.017,95%CI 1.002~1.032,P=0.029)和重度(OR 9.032,95%CI 6.076~18.012,P<0.001)是CSVD患者发生认知障碍的独立相关因素。血清IL-6、CysC、T3水平和重度影像学总负荷预测认知障碍的AUC分别为0.888、0.812、0.918、0.889,最佳截断值分别为2.010 pg/mL、0.982 ng/L、1.302 nmol/L和3.6分。结论血清IL-6和CysC水平升高、T3水平降低以及中、重度影像学总负荷与CSVD患者发生认知障碍有相关性,可作为识别CSVD患者认知障碍的依据。

关键词： 胸腔镜   椎旁神经阻滞   全身麻醉   肺叶切除   应激反应   T淋巴细胞亚群  

摘要： 目的探讨腔镜直视下椎旁神经阻滞(PVNB)对全身麻醉胸腔镜下肺叶切除术病人术后疼痛、应激反应及T淋巴细胞亚群的影响。方法2021年1月~2023年8月择期行胸腔镜下肺叶切除术的病人104例,采用随机数字表法分成对照组和观察组,每组52例。对照组予以全身麻醉,观察组基于对照组予以PVNB,两组术后均使用静脉自控镇痛(PCIA)。记录两组术后1小时(T_(1))、术后6小时(T_(2))、术后12小时(T_(3))、术后24小时(T_(4))及术后48小时(T_(5))的视觉模拟疼痛(VAS)评分变化;比较两组PCIA药物使用状况、术后应激反应、T淋巴细胞亚群变化及不良反应发生率。结果T_(1)~T_(5)时刻两组VAS评分呈现先升后降的趋势变化,且T_(1)~T_(4)时刻观察组VAS评分均低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组和对照组PCIA首次按压时间分别为(11.18±3.29)小时和(9.61±2.48)小时,PCIA按压次数分别为(4.63±1.51)次、(7.22±1.86)次,舒芬太尼输注用量分别为(46.29±6.24)ml、(55.41±7.88)ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后24小时,观察组皮质醇、去甲肾上腺素、血糖分别为(252.27±19.75)ng/ml、(346.63±25.06)ng/ml和(5.48±0.72)mmol/L,对照组分别为(275.78±21.46)ng/ml、(381.71±23.71)ng/ml和(6.03±0.64)mmol/L,观察组上述指标均低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后24小时,观察组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞计数、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞计数分别为(0.57±0.05)×10^(9)/L、(0.39±0.04)×10^(9)/L、(0.26±0.02)×10^(9)/L、(1.50±0.35),对照组上述指标分别为(0.55±0.05)×10^(9)/L、(0.36±0.03)×10^(9)/L、(0.29±0.04)×10^(9)/L、(1.24±0.31),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率分别为1.92%、2.77%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对全身麻醉胸腔镜下肺叶切除术病人予以腔镜直视下PVNB有利于减轻病人术后疼痛感,减少机体应激反应及对免疫系统的影响。

关键词： 白内障术后感染   危险因素   病原菌   白细胞介素-17   基质金属蛋白酶-2   胰岛素样生长因子-1  

摘要： 目的探讨白内障术后感染性眼内炎危险因素、病原菌分布、外周血白细胞介素-17(IL-17)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及其意义。方法选择大庆眼科医院2018年1月-2024年6月收治的60000例行白内障手术患者为研究对象,取术后感染性眼内炎患眼房水及玻璃体液鉴定病原菌;对比基本资料分析感染性眼内炎危险因素,对比血清IL-17、MMP-2和IGF-1水平,并分析其对感染性眼内炎的预测效能。结果本研究60000例患者共65600眼,其中21眼(21例患者)确诊为感染性眼内炎,发生率为0.032%。21只患眼标本均培养出病原菌,以革兰阳性菌为主(73.08%)。单因素及多因素分析显示,合并糖尿病、玻璃体溢出是白内障术后感染性眼内炎的危险因素。术后3 d感染组和非感染组血清IL-17、MMP-2和IGF-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线显示,白内障手术患者术后3 d的血清IL-17、MMP-2和IGF-1水平均可预测白内障手术后感染性眼内炎的发生,且三指标联合的预测效能最高(P<0.05),曲线下面积为0.950,敏感度为95.24%,特异度为81.91%。结论白内障术后眼内炎发生率为0.032%,合并糖尿病、玻璃体溢出是危险因素。病原菌以革兰阳性菌为主。血清IL-17、MMP-2和IGF-1水平变化与眼内炎的发生密切相关,有预测价值。

关键词： 肺腺癌转移相关转录子1   miR-876-5p   叉头框蛋白质M1   细胞增殖   银屑病  

摘要： 目的:探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录子1(lncRNA MALAT1)/miR-876-5p/叉头框蛋白质M1(FOXM1)轴对TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响。方法:将HaCaT细胞分为Ct组、Model组、si-NC组、si-MALAT1组、mimic NC组、miR-876-5p mimic组、si-MALAT1+inhibitor NC组、si-MALAT1+miR-876-5p inhibitor组,除Ct组外,其余组细胞均需用25μg/L TNF-α处理以诱导银屑病体外细胞模型,TNF-α诱导24 h后再转染对应的转染物48 h,用于后续实验。qRT-PCR检测细胞中MALAT1、miR-876-5p表达;CCK-8、EdU染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞上清液中IL-6、TNF-α、IL-1β水平;Western blot检测FOXM1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证MALAT1与miR-876-5p、miR-876-5p与FOXM1的关系;RNA pull down实验验证MALAT1与miR-876-5p的关系。结果:相较于对照组,实验组MALAT1、FOXM1蛋白表达增加,miR-876-5p表达下降(P<0.05);相较于Ct组,Model组HaCaT细胞中MALAT1表达、FOXM1蛋白表达、A450值、EdU阳性率、细胞上清液中IL-6、TNF-α、IL-1β水平、PCNA、Bcl-2蛋白表达升高,miR-876-5p表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低(P<0.05);沉默MALAT1或过表达miR-876-5p可抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖、炎症反应,促进细胞凋亡;miR-876-5p inhibitor恢复了MALAT1敲低对TNF-α刺激的HaCaT细胞凋亡、增殖及炎症反应的作用;MALAT1靶向下调miR-876-5p,miR-876-5p靶向下调FOXM1。结论:敲低MALAT1可能通过提高miR-876-5p表达来下调FOXM1表达,进而促进TNF-α刺激的HaCaT细胞凋亡,减轻炎症反应并降低增殖。