课程文献中心 更多>>

关键词： 自身免疫性疾病   抗原特异性免疫耐受   调节性免疫细胞   耐受性疫苗   纳米材料  

摘要： 自身免疫性疾病是机体免疫系统对自身抗原失去耐受性,进而发生免疫应答而导致自身抗体生成、自身组织损害的疾病,通常无法彻底治愈,需要终身治疗。内分泌自身免疫性疾病是最常见的自身免疫性疾病之一,目前针对该类疾病的治疗均为改善症状和预防疾病相关并发症的发生,并不能彻底治愈疾病相关的病理性自身免疫。近年来,采用调节性免疫细胞、耐受性疫苗、纳米材料以及黏膜免疫重新诱导机体对自身抗原的特异性免疫耐受治疗内分泌自身免疫性疾病已取得一定进展,未来具有广阔的临床应用前景。

关键词： heterogeneity   IL1R1highPDGFRAhigh umbilical cord-derived Ultroser-G-MSC   osteoarthritis   osteogenic and chondrogenic potential   single-cell RNA sequencing  

摘要： The heterogeneity of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) is culturing-dependent, resulting in functional non-uniformness. To achieve the best clinical benefit, a comprehensive understanding of the origin of the heterogeneity in different culture systems can identify functional subgroups to direct the precise application of hUC-MSCs. Here, we create a single-cell transcriptome atlas of hUC-MSC in different culture systems for the identification of a subgroup of Ultroser-G-MSCs with high osteogenic and chondrogenic potentials featured by high expressions of IL1R1 and PDGFRA. Further experimental validations surprisingly reveal that IL1R1^highPDGFRA^high Ultroser-G-MSCs possess advantages over “traditional” hUC-MSCs in the treatments of modeled osteoarthritis, leading to a cell-cell communication network centered in Clusters 0 and 2. Moreover, we found that Wnt5 signaling is the key pathway for the dynamic transformation of osteogenic and chondrogenic phenotypes in hUC-MSC. Overall, the present study paves the way for the clarification of heterogenetic nature of hUC-MSC in different culture systems for the selection of optimal MSC types to achieve the precision on clinical treatments. © 2025 Wiley Periodicals LLC.

关键词： 神经干细胞   外泌体   黄芪甲苷   缺血性脑卒中   细胞焦亡  

摘要： 目的:探讨黄芪甲苷(ASIV)预处理的神经干细胞外泌体(EXOs)通过抑制经典细胞焦亡途径减轻缺血性脑卒中大鼠脑损伤的机制。方法:取出生24 h内胎鼠,提取神经干细胞并鉴定,培养3 d后加入ASIV继续培养5 d,收集细胞上清超速离心后获取纯神经干细胞EXOs及ASIV预处理的神经干细胞EXOs(ASIV-EXOs)。通过Western blot法检测EXOs特异性标志物四次跨膜蛋白CD63、肿瘤易感基因101(TSG101)及阴性指标calnexin的表达,并采用纳米颗粒跟踪分析检测粒径大小、电子显微镜下观察形态的方法对EXOs进行鉴定对比。取6~8周SD雄性大鼠随机分为假手术(sham)组、大脑中动脉梗阻/再灌注(MCAO/R)组、阳性对照药依达拉奉(EDA)干预组(MCAO/R+EDA组)、EXOs干预组(MCAO/R+EXOs组)和ASIV-EXOs干预组(MCAO/R+ASIV-EXOs组),MCAO/R模型成功后行尾静脉给药。采用Zea Longa法对各组大鼠的神经功能缺损状况进行评估;TTC染色观察脑组织梗死区域;HE染色观察脑组织病理改变;TUNEL和caspase-1免疫荧光双染法检测细胞焦亡;ELISA法检测各组大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的水平;Western blot法检测脑皮质缺血区组织caspase-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、消皮素D(GSDMD)和IL-18蛋白的表达。结果:(1)HE染色结果显示,MCAO/R组大鼠脑皮质缺血区出现明显筛网状梗死灶,坏死区域周围神经元细胞排列紊乱,尼氏小体减少或消失,核仁固缩或碎裂,胞质内有空泡产生,见大量红色神经元;各药物干预组大鼠脑皮质缺血区病理损伤较轻,神经元结构较清晰,红色神经元数量亦明显减少。(2)与sham组比较,MCAO/R组与各药物干预组大鼠的神经功能缺损评分显著升高(P<0.01),脑梗死体积明显增大(P<0.01),血清中IL-1β和IL-18水平显著增高(P<0.01),免疫荧光染色双阳性细胞数量显著增多(P<0.01),脑皮质缺血区caspase-1、NLRP3、ASC、IL-18和GSDMD蛋白表达显著升高(P<0.01);与MCAO/R组比较,各药物干预组大鼠的上述指标均下降或减少(P<0.05);与MCAO/R+EXOs组比较,MCAO/R+ASIV-EXOs组神经功能缺损评分无显著变化(P>0.05),脑梗死体积减小(P<0.05),血清中IL-1β和IL-18水平降低(P<0.05),免疫荧光染色双阳性细胞数量减少(P<0.05),脑皮质缺血区caspase-1、NLRP3、ASC、IL-18和GSDMD蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:黄芪甲苷预处理的神经干细胞外泌体可减轻缺血性脑卒中大鼠的脑损伤,其机制可能与减轻经典的NLRP3/caspase-1细胞焦亡途径有关。

关键词： Ti_(3)C_(2)T_(x)/聚酰亚胺复合薄膜   离心喷涂   原子氧   分子动力学模拟  

摘要： 聚酰亚胺(PI)材料因其优异的性能被广泛应用于低地球轨道(LEO)航天器,但易受到原子氧(AO)侵蚀。为解决这一问题,通过在PI中加入5 wt%的Ti_(3)C_(2)T_(x),应用连续离心喷涂技术制备了Ti_(3)C_(2)T_(x)/PI复合薄膜。在模拟的LEO环境下,对薄膜进行AO辐照实验。结果表明,Ti_(3)C_(2)T_(x)/PI复合薄膜在保持PI原有力学性能的同时,抗AO性能显著提升,其AO剥蚀率仅为PI薄膜的6.6%。实验和分子动力学模拟均证实,Ti_(3)C_(2)T_(x)与AO反应生成钛氧化物钝化层,有效保护材料免受进一步AO侵蚀。所制备的Ti_(3)C_(2)T_(x)/PI复合薄膜有望成为新型高性能抗AO侵蚀材料。

关键词： IL-1β   单克隆抗体   炎症治疗  

摘要： IL-1β可介导炎症病理,阻断IL-1活性具有重要抗炎治疗作用。本研究通过构建猪IL-1β原核表达质粒,进行大肠杆菌表达和蛋白纯化,制备重组蛋白。采用细胞杂交瘤技术制备获得4株稳定分泌IL-1β单克隆抗体杂交瘤细胞株(1E2、2H3、5H3及7E7);4株单抗腹水ELISA效价高达1∶1024000;5H3单抗识别的抗原表位为149 DLKREVVFCM 158;1E2、2H3和7E7单抗所识别的抗原表位为202 KRYPKRD 208。脂多糖(LPS)小鼠炎症模型抗炎试验结果显示,相对LPS对照组,IL-1β单抗处理组小鼠血清NO、TNF-α、IL-6和IL-1β含量及临床症状评分显著降低,表明4株单抗均有较好抗炎效果,其中1E2单抗抗炎作用最优,为猪IL-1β阻断药物研究奠定了重要基础。

关键词： 胃癌   胃癌前病变   转化生长因子-β   CC趋化因子配体20   干扰素γ   诊断价值   病理特征  

摘要： 目的探讨血清转化生长因子-β(TGF-β)、CC趋化因子配体20(CCL20)、干扰素γ(IFN-γ)对胃癌前病变与胃癌的联合鉴别诊断价值及与病情进展的关系。方法选取2020年8月至2023年1月南阳市中心医院收治的103例胃癌患者作为癌变组,103例胃癌前病变患者作为癌前病变组,比较两组患者的血清TGF-β、CCL20、IFN-γ水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TGF-β、CCL20、IFN-γ对胃癌前病变与胃癌的诊断价值,采用相对危险度分析血清TGF-β、CCL20、IFN-γ与胃癌发生风险的关系,并比较癌变组不同病理特征患者的血清TGF-β、CCL20、IFN-γ水平,采用Spearman相关系数分析血清TGF-β、CCL20、IFN-γ与胃癌病理特征的相关性。结果癌变组患者的血清TGF-β、CCL20水平分别为(40.78±6.44)pg/mL、(44.53±9.18)pg/mL,明显高于癌前病变组的(31.19±4.81)pg/mL、(33.76±6.47)pg/mL,IFN-γ水平为(31.47±10.03)μg/L,明显低于癌前病变组的(50.68±16.22)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清TGF-β、CCL20、IFN-γ诊断胃癌前病变与胃癌的AUC为0.796、0.806、0.810,联合诊断的AUC为0.905,敏感度为84.47%,特异度为83.50%,明显优于各指标单独诊断(P<0.05);相对危险度分析结果显示,血清TGF-β、CCL20β高表达患者的胃癌发生风险分别是低表达患者的2.758倍、3.101倍,IFN-γ低表达患者胃癌发生风险是高表达患者的2.668倍,差异均有统计学意义(P<0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者血清TGF-β、CCL20水平明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,IFN-γ水平明显低于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者血清TGF-β、CCL20水平高于无淋巴结转移患者,IFN-γ水平明显低于无淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(P<0.05);低分化患者血清TGF-β、CCL20水平明显高于中高分化患者,IFN-γ水平明显低于中高分化患者,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清TGF-β、CCL20与胃癌临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与分化程度呈负相关(P<0.05),IFN-γ与胃癌临床分期、淋巴结转移呈负相关(P<0.05),与分化程度呈正相关(P<0.05)。结论血清TGF-β、CCL20、IFN-γ可作为胃癌前病变与胃癌的辅助诊断指标,联合诊断价值较好,且均与胃癌病理进展密切相关,能为临床诊治提供相关信息。

关键词： 脑梗死   白介素   干扰素γ   肿瘤坏死因子α   神经功能   梗死面积   老年人  

摘要： 目的探究血清白介素(ILs)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)与老年脑梗死(CI)患者梗死面积及神经功能的关系。方法回顾性选取2019年1月—2024年12月滁州市第一人民医院神经内科收治的老年CI患者106例为CI组,根据神经功能损伤程度将患者分为轻中度亚组76例和重度亚组30例。另选取同期医院健康体检老年人50例为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清ILs(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10)、IFN-γ、TNF-α水平,磁共振成像(MR)评估梗死面积;Pearson相关性分析血清ILs、IFN-γ、TNF-α水平与梗死面积、神经功能(Barthel指数、mRS评分)的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清ILs、IFN-γ、TNF-α水平对老年CI患者预后不良的预测价值。结果CI组血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平均高于健康对照组(t=9.795、9.709、10.756、10.660、9.784、9.726,P均<0.001);预后不良亚组老年CI患者血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平及梗死面积、mRS评分均高于预后良好亚组,Barthel指数得分低于预后良好亚组(t=8.121、9.004、9.468、8.552、7.665、8.220、8.404、9.874、9.343,P均<0.001);Pearson相关性分析显示,血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平与梗死面积、mRS评分呈正相关(梗死面积:r=0.523、0.467、0.572、0.498、0.534、0.589,P均<0.001;mRS评分:r=0.475、0.423、0.518、0.455、0.491、0.541,P均<0.001),与Barthel指数呈负相关(r=-0.489、-0.439、-0.534、-0.471、-0.507、-0.562,P均<0.001);血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平及六者联合预测老年CI患者预后不良的AUC分别为0.963、0.934、0.908、0.921、0.862、0.885、0.999,六者联合的AUC大于各指标单独预测的AUC(Z=27.481、19.355、13.150、16.461、10.289、10.674,P均<0.001)。结论老年CI患者的血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平升高,且与梗死面积、神经功能密切相关,炎性因子水平越高,梗死面积越大,神经功能损伤越严重。

关键词： 妊娠糖尿病   山柰酚   白细胞介素-6   信号转导与转录激活子3   炎症   胰岛素抵抗  

摘要： 目的探讨山柰酚(kaempferol,Kpf)调节白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)/信号转导与转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路对妊娠糖尿病(gestational dia-betes mellitus,GDM)大鼠炎症反应的影响。方法雌雄同笼与高脂高糖喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建GDM大鼠模型,将造模成功大鼠按照随机数字表达分为Model组、Kpf低、中、高剂量组、激活剂组(IL-6/STAT3通路激活剂rIL-6),每组12只,同批12只妊娠大鼠作为control组,各组腹腔注射相应药物,每天1次,直到妊娠19 d。罗氏血糖仪测量大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG);分析各组大鼠妊娠结局;ELISA法测定大鼠血清空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)及胎盘中白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;苏木精伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠胎盘组织中病理损伤;TUNEL染色检测胎盘组织细胞凋亡;蛋白质印迹测定胎盘中IL-6/STAT3通路蛋白表达。结果与control组比较,Model组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、胎鼠质量、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、胎盘组织IL-6、p-STAT3/STAT3水平及细胞凋亡率增加,活胎率、窝产子数下降(P<0.05);相较于Model组,Kpf低、中、高剂量组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、胎鼠质量、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、胎盘组织IL-6、p-STAT3/STAT3水平及细胞凋亡率下降,活胎率、窝产子数增加(P<0.05);相较于Kpf高剂量组,激活剂组上述指标变化均显著逆转(P<0.05)。结论Kpf可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路降低GDM大鼠胎盘炎症,减轻胰岛素抵抗。

关键词： 可替宁   急性呼吸窘迫综合征   磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路   白细胞介素-10  

摘要： 目的探讨可替宁对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺组织的保护作用及其机制。方法32只雄性普通级SD大鼠经适应性饲养3 d后随机分为四组:对照组、ARDS组、可替宁组和可替宁+LY294002组[磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路抑制剂],每组8只。除对照组外,其余组尾静脉注射油酸制备ARDS大鼠模型。模型构建后,可替宁组腹腔注射可替宁,可替宁+LY294002组腹腔注射可替宁+LY294002,对照组和ARDS组腹腔注射生理盐水。观察24 h后,检测四组大鼠动脉血氧分压(PaO_(2)),肺组织病理切片,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测血浆白细胞介素-10(IL-10)的浓度,免疫蛋白印迹分析(Westernblotting)测定肺组织磷酸化蛋白激酶B(pAkt)的表达水平。结果对照组PaO_(2)为(106.8±6.3)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),ARDS组为(81.6±2.3)mm Hg,可替宁组为(106.2±6.2)mm Hg,可替宁+LY294002组为(84.0±1.7)mm Hg。可替宁组高于ARDS组和可替宁+LY294002组,差异有显著性(P<0.05);与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。对照组IL-10为(54.80±5.55)pg/ml,ARDS组为(45.82±3.32)pg/ml,可替宁组为(54.23±5.64)pg/ml,可替宁+LY294002组为(44.55±1.46)pg/ml。可替宁组高于ARDS组和可替宁+LY294002组,差异有显著性(P<0.05);与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。四组中pAkt灰度值与内参比值的均数:对照组为(0.74±0.05),可替宁组为(0.75±0.05),可替宁+LY294002组为(0.62±0.04),ARDS组为(0.61±0.06)。可替宁组较ARDS组及可替宁+LY294002组灰度值明显增高,差异有显著性(P<0.05);与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。结论可替宁对ARDS大鼠肺组织有保护作用,其机制可能与通过PI3K-Akt信号通路有效地增加抗炎因子IL-10的浓度有关。

关键词： 冰冻血浆   补体系统   补体C3   冷冻电镜   三维重构  

摘要： 补体是血浆中存在的一组重要蛋白质,在机体遭受病原体感染或组织损伤时通过先天免疫途径被激活,发挥抗感染和清除损伤细胞的作用。补体C3是补体系统的核心成分,在三条补体激活途径中均起到至关重要的作用,且在血浆中的含量最为丰富。冰冻人血浆通常由健康志愿者献血后采集,通过迅速冷冻保存制备而成,广泛用于多种医学治疗。然而,关于冰冻人血浆的低温保存条件和时长对补体C3结构完整性的影响尚缺乏准确详细的评估。在本研究中,作者发现,冰冻人血浆在-20℃保存后转为-80℃的条件下保存长达5年,其中的补体C3组分仍能保持完整的结构,且通过冷冻电镜单颗粒重构达到了2.43Å的分辨率,其中ASN63和ASN917上发生的糖基化修饰亦可被解析。与已解析的C3晶体结构相比,RMSD值差异较大区域在α链末端的C345C结构域,与解析的ISG65-C3复合体冷冻电镜结构相比,C3部分的RMSD值差异较大处仅在C345C末端的一段α螺旋。结果表明,在严格的低温保存条件下,尽管保存时间较长,冰冻人血浆中的关键补体组分C3仍能保持结构完整性和稳定性,从而保障其生物学功能的发挥。由此推测,血浆中其他重要的补体组分在类似保存条件和时长下也可维持其天然构象。这一结论为实验室或工业中由冰冻人血浆提纯制备补体各组分蛋白时,对冰冻血浆的保存条件及期限的设定提供了一定的科学依据和参考。