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关键词： 人类白细胞抗原   无效等位基因   碱基插入   移码突变   二代测序  

摘要： 目的:确认1例碱基插入产生无效等位基因HLA-C*08:127N的序列。方法:应用PCR-SSOP及PCR-SBT进行HLA常规检测,发现1例急性髓系白血病患者HLA-C的序列图谱均存在异常。应用二代测序技术对该位点序列进行确认。结果:HLA-C位点SSOP分型结果为C*03:04,C*08:01;SBT结果分析时发现序列在第3外显子疑似插入或缺失,二代测序确认结果为C*03:04,C*08:127N。结论:碱基插入产生HLA无效等位基因,SBT分析软件无法给出正确的结果,而二代测序技术可以更直观得到准确的HLA分型结果。

关键词： 慢性乙型肝炎   乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸   骨桥蛋白   白细胞介素-21  

摘要： 目的 观察血清骨桥蛋白(OPN)、白细胞介素-21(IL-21)在慢性乙型肝炎(CHB)患者中的表达及其与乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量的关系。方法 前瞻性选取医院确诊188例CHB患者,患者接受为期1年治疗,比较治疗6个月、1年时血清OPN、IL-21表达、HBV-DNA载量,分析血清OPN、IL-21表达与HBV-DNA载量的关系。结果 随着治疗的展开,患者血清OPN、HBV-DNA载量降低,IL-21升高(P<0.05);经Pearson相关系数检验并建立广义估计方程模型,CHB患者HBV-DNA病毒载量与血清OPN呈正相关(r>0,P<0.001),与IL-21表达呈负相关(r<0,P<0.001)。结论 CHB患者血清OPN、IL-21表达呈异常表达,且二者表达水平与CHB患者HBV-DNA载量有关。

关键词： 多重微球流式免疫荧光法   细胞因子   保存   影响因素  

摘要： 目的探讨多重微球流式免疫荧光法检测外周血细胞因子的影响因素,并分析优化策略。方法于2022年1月-2024年1月期间,收集我院外周血标本612例,采用多重微球流式免疫荧光法检测不同保存条件下外周血细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、IFN-γ、IFN-α和TNF-α)水平变化。结果对612例研究对象均采用EDTA-K2抗凝管和带分离胶促凝管抽取外周血,离心分离得血浆与血清标本。结果显示612例研究对象的血浆与血清样本中IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、IFN-γ、IFN-α和TNF-α水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。将612例EDTA-K2抗凝管血清标本置于4℃保存24h,分别于采集即刻及保存后1h、6h、12h、24h对血清标本细胞因子水平进行检测,结果发现血清样本中IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、IFN-γ、IFN-α和TNF-α水平呈现下降趋势,IL-5水平呈现上升趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05)。将612例带分离胶促凝管血浆标本置于4℃保存48h,分别于采集即刻及保存后1h、6h、12h、24h、48h对血浆标本细胞因子水平进行检测,结果发现24h内血浆样本中细胞因子水平呈现下降趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05)。而保存48h后血浆中细胞因子水平下降明显,与保存24h存在差异(P<0.05)。结论临床检测细胞因子推荐使用EDTA-K2抗凝血浆标本,4℃保存24小时内稳定。检测中应选择合适抗凝剂,避免溶血,减少干扰,优化检测流程。

关键词： 妊娠糖尿病   自发性早产   胎儿纤维连接蛋白   单核细胞趋化蛋白-1   白介素-6  

摘要： 目的探究血清胎儿纤维连接蛋白(fFN)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-6(IL-6)与妊娠糖尿病自发性早产的关系及预测价值。方法回顾性选取2021年5月至2022年12月选取平顶山市第一人民医院就诊的120例妊娠糖尿病患者为研究对象,根据其是否自发性的早产分为早产组(51例)和非早产组(69例),收集患者的一般资料[年龄、孕前体重指数(BMI)、月经初潮年龄、妊娠期感染史、孕次、流产史、剖宫产史、贫血、血压等信息],采集患者的清晨空腹外周血,通过酶联免疫吸附法检测血清fFN、MCP-1、IL-6水平,采用多因素logistic回归分析妊娠糖尿病发生自发性早产的危险因素,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析妊娠糖尿疾病者血清fFN、MCP-1、IL-6水平对发生自发性早产的预测价值。结果两组患者的年龄、孕前BMI、血压、月经初潮年龄、孕次、流产史、剖宫产史、贫血情况差异无统计学意义(P>0.05),两组患者的妊娠期感染史差异有统计学意义(P<0.05)。早产组的血清fFN、MCP-1、IL-6水平均高于非早产组(P<0.05)。多因素logistic回归结果显示,妊娠期感染史和血清fFN、MCP-1、IL-6是妊娠糖尿病发生自发性早产的危险因素(P<0.05),有妊娠期感染的患者和血清fFN、MCP-1、IL-6水平越高的患者,其发生自发性早产的风险越大。由ROC曲线分析可得,血清fFN、MCP-1、IL-6水平预测妊娠糖尿病发生自发性流产的AUC分别为0.798、0.685、0.746,灵敏度分别为74.5%、58.8%、62.7%,特异度分别为76.8%、84.1%、85.5%;3个指标联合预测的AUC为0.889,灵敏度为86.3%,特异度为91.3%。结论妊娠糖尿病自发性早产产妇的血清fFN、MCP-1、IL-6水平均升高,妊娠期感染和高水平的血清fFN、MCP-1、IL-6是妊娠糖尿病发生自发性早产的危险因素。血清fFN、MCP-1、IL-6对妊娠糖尿病发生自发性早产具有较高的预测价值,且联合预测的效能更高。

关键词： 黄连素   过敏性哮喘   Th1/Th2失衡   细胞因子   大鼠  

摘要： 【目的】探讨黄连素抗哮喘机制。【方法】将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、黄连素组、孟鲁司特组,每组8只。除正常组,其他各组大鼠采用卵清蛋白(OVA)诱导法构建过敏性哮喘模型。造模成功后,给药7 d。显微镜下对收集的支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞(包括淋巴细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和嗜酸性粒细胞)计数,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清卵清蛋白特异性免疫球蛋白E(sIgE)和总免疫球蛋白E(IgE)水平,采用ELISA法检测BALF中辅助性T细胞(Th)1相关细胞因子[干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2]及Th2相关细胞因子(IL-4、IL-5、IL-10和IL-13)含量,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肺组织中IFN-γ、IL-2及IL-4、IL-5、IL-10和IL-13 mRNA表达水平,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理形态。【结果】与正常组比较,模型组BALF中嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和总细胞数目升高,血清sIgE和总IgE水平升高,Th2相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-10、IL-13在BALF中的含量及在肺组织中的mRNA表达水平显著升高,Th1相关细胞因子IFN-γ和IL-2在BALF中的含量及在肺组织中的mRNA表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),肺组织HE病理染色结果可见支气管和肺泡细胞周围有大量炎症细胞浸润,平滑肌层和气道壁增厚。与模型组比较,黄连素组及孟鲁司特组上述各指标均得到改善(P<0.05或P<0.01),肺组织可见炎症细胞浸润减少,气道壁和平滑肌层变薄,且2个治疗组间比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】黄连素抗哮喘作用机制与调节Th1/Th2细胞因子失衡有关。

关键词： T淋巴细胞亚群   12(R)-脂加氧酶   高危型人乳头瘤病毒   持续感染   病情转归  

摘要： 目的探讨T淋巴细胞亚群联合12(R)-脂加氧酶(ALOX12B)预测高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染病情自然转归的价值。方法选择2020年1月至2021年2月该院收治的179例高危型HPV感染者作为研究对象,根据2年随访期内病情自然转归情况分为转阴组、持续阳性组。比较2组临床资料、CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞比例,以及CD4^(+)T淋巴细胞/CD8^(+)T淋巴细胞比值(简称CD4^(+)/CD8^(+))、ALOX12B mRNA。采用Logistic回归分析高危型HPV感染病情自然转归的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析T淋巴细胞亚群、ALOX12B mRNA预测高危型HPV感染病情自然转归价值。结果179例高危型HPV感染者,随访2年,失访1例,获访患者中,124例(69.66%)自然转阴,54例(30.34%)持续阳性(持续阳性组),持续阳性患者中5例(9.26%)病情发生进展。持续阳性组活检结果为宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ级、细胞学≥未明确意义的非鳞状上皮细胞患者占比及高危型HPV负荷量高于转阴组(P<0.05)。持续阳性组CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞比例,以及CD4^(+)/CD8^(+)低于转阴组(P<0.05),ALOX12B mRNA表达水平高于转阴组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,校正了活检结果后,CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞比例,以及CD4^(+)/CD8^(+)、ALOX12B mRNA是高危型HPV感染病情自然转归的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CD3^(+)T淋巴细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)、ALOX12B mRNA联合预测高危型HPV感染病情自然转归的曲线下面积为0.928(95%CI:0.879~0.961)。结论CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞比例,CD4^(+)/CD8^(+),ALOX12B mRNA是高危型HPV感染病情自然转归的影响因素,T淋巴细胞亚群联合ALOX12B检测可作为预测病情自然转归的方案,为临床决策提供参考信息。

关键词： 瓜蒌红花甘草汤   带状疱疹病毒感染   炎症   免疫   疼痛介质  

摘要： 目的 探讨瓜蒌红花甘草汤对带状疱疹病毒感染患者中医症候、T淋巴细胞亚群及微炎症状态的影响,并评估治疗安全性。方法 选取黑龙江中医药大学附属第一医院2020年12月-2023年12月收治的120例带状疱疹病毒感染患者,分为常规组(阿昔洛韦治疗)和联合组(阿昔洛韦+瓜蒌红花甘草汤治疗),各60例,两组均治疗2周。比较两组治疗2周后的临床疗效,症状控制时间,治疗前和治疗2周后的证候积分、T淋巴细胞亚群水平、疼痛介质及微炎症状态,治疗期间不良反应情况。结果 治疗2周后,联合组疗效优于常规组(P=0.028)。治疗2周后,两组主、次证评分、中医证候总分、CD_(8)^(+)、血清环氧化酶-2(COX-2)、C-反应蛋白(CRP)水平均降低,且联合组以上指标分别为(6.01±0.66)分、(3.96±0.41)分、(9.97±1.01)分、(25.26±3.02)%、(22.16±2.36)ng/ml、(8.62±0.87) mg/L,较常规组更低(P<0.05);CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)、血清β-内啡肽(β-EP)、白细胞介素(IL)-2水平在两组治疗2周后升高,且联合组以上指标分别为(68.29±6.56)%、(43.03±4.42)%、1.70±0.26、(129.93±13.02)μg/L、(13.96±1.40)pg/ml,高于常规组(P<0.05)。联合组止痛、止疱、结痂及脱痂时间均短于常规组(P<0.05)。两组治疗期间的不良反应发生率差异无统计学意义(P=0.509)。结论 瓜蒌红花甘草汤治疗带状疱疹病毒感染能有效地改善患者免疫功能,缓解疼痛介质及微炎症状态指标,进而有利于控制临床症状和提高临床疗效,且安全性良好。

关键词： 骨关节炎   外泌体   circ_0000615   软骨细胞损伤  

摘要： 目的:探讨外泌体介导的circ_0000615对IL-1β诱导的人软骨细胞CHON-001损伤的影响及分子机制。方法:IL-1β处理CHON-001细胞,构建骨关节炎(OA)体外模型;Western blot测凋亡相关蛋白的表达;RT-qPCR检测circ_0000615和miR-337-3p表达水平;流式细胞术测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因实验分析miR-337-3p与circ_0000615的相互作用;ELISA检测细胞炎症因子的表达;功能恢复实验观察circ_0000615/miR-337-3p轴对CHON-001细胞损伤的影响。结果:circ_0000615和miR-337-3p在OA软骨组织和细胞模型中分别表达升高和降低(P<0.05)。与Control组比较,IL-1β诱导的CHON-001细胞凋亡率、Bax蛋白及IL-6、TNF-α水平升高,Bcl-2及IL-10水平下降(P<0.05);外泌体介导的沉默circ_0000615可降低CHON-001细胞凋亡率、Bax蛋白水平以及IL-6、TNF-α水平,升高Bcl-2蛋白水平以及IL-10水平(P<0.05);circ_0000615靶向调控miR-337-3p表达(P<0.05),且下调miR-337-3p逆转了沉默circ_0000615对CHON-001细胞损伤的影响(P<0.05)。结论:外泌体介导的沉默circ_0000615可通过靶向上调miR-337-3p缓解IL-1β诱导的CHON-001细胞损伤。

关键词： asthma   Chronic rhinosinusitis with nasal polyps   comorbidity   nasal polyps   real world   severe asthma   SNOT-22   T2 inflammation  

摘要： Background: Chronic rhinosinusitis with nasal polyps (CRSwNP) and severe asthma (SA) are 2 frequently coexisting conditions that are, in most cases, associated with eosinophilic inflammation. The concurrence of both diseases has a negative synergistic impact on disease severity and patients’ health-related quality of life. Thus, a holistic, collaborative management of these patients is a critical unmet need. Mepolizumab, a systemic anti–IL-5 therapy, has been shown to be effective as an add-on treatment in both SA and CRSwNP, with more literature available on asthma outcomes than on CRSwNP. Objectives: The primary objective of the study is to evaluate the real-world effectiveness of mepolizumab in improving the health-related quality of life of comorbid patients at 12 months using the SNOT-22 questionnaire. Secondary objectives include safety and efficacy outcomes of mepolizumab treatment in the 2 populations, which are expected to have variable severity of the respective comorbid conditions. Methods: RESPONSE is a European real-world prospective cohort study designed to assess the effectiveness of mepolizumab in 2 cohorts of adult patients: one with SA as primary diagnosis with (secondary diagnosis) comorbid CRSwNP, and another with CRSwNP as primary diagnosis with (secondary diagnosis) comorbid asthma. Up to 350 patients receiving newly prescribed mepolizumab will be followed up for 12 months as per the investigators’ standard of care. Conclusion: This study will report the effects of anti–IL-5 therapy in both diseases investigated and the respective comorbidity, as well as the consequence of treating milder forms of asthma and CRSwNP with mepolizumab, supporting the emerging evidence on early treatment optimization. © 2024 The Authors