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关键词： 鸭疫里默氏杆菌   脂多糖   单克隆抗体  

摘要： 为制备鸭疫里默氏杆菌脂多糖特异性单克隆抗体,研究选择SDJ-80菌株经过灭活处理后的全菌作为抗原,对小鼠进行免疫接种,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合;细菌脂多糖包被酶标板,间接ELISA法检测细胞上清,获得抗体阳性细胞并进行亚克隆,将成功获得的阳性杂交瘤细胞株连续传10代,并进行抗体效价和特异性检测。结果显示:成功获得一株单克隆抗体1E6,制备的腹水单克隆抗体效价高于1∶204 800,该单克隆抗体与血清1、2、6、7和10型鸭疫里默氏杆菌均能发生特异性反应。研究表明,获得的单克隆抗体1E6为针对鸭疫里默氏杆菌脂多糖的特异性单克隆抗体,可用于鸭疫里默氏杆菌脂多糖分子结构和诊断新方法的研究。

关键词： 黄芪多糖   代谢相关脂肪性肝病   TNF-α   网络药理学   动物实验  

摘要： 目的基于网络药理学方法推测黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)治疗代谢相关脂肪性肝病(metabolic-associated fatty liver diseases,MAFLD)相关机制并开展动物实验进行验证。方法采用网络药理学方法找到APS的活性成分并利用数据库挖掘APS及MAFLD相关靶点并对以上靶点取交集,绘制交集靶点蛋白质相互作用网络图和核心靶点网络图。进行动物实验验证,将21只小鼠随机平均分为3组,分别为正常对照组、MAFLD模型组及MAFLD模型+APS干预组。MAFLD模型+APS干预组小鼠予以高脂饲料喂养8周,同时将APS以剂量为50 mg·kg^(-1)·d^(-1)对小鼠连续灌胃8周;MAFLD模型组及正常对照组小鼠分别以高脂饲料、标准维持饲料喂养8周,同时用等体积生理盐水对小鼠连续灌胃8周。给药结束后观察小鼠一般情况,计算肝指数,取小鼠肝脏组织进行HE染色,酶联免疫吸附实验测定小鼠血清及肝脏组织中TNF-α的含量,免疫组织化学方法分析小鼠肝脏组织中TNF-α的表达情况。结果通过网络药理学方法获得APS相关作用靶点292个,获得MAFLD相关作用靶点2254个,二者交集靶点104个。经过分析后筛选出22个APS治疗MAFLD的核心靶点,TNF为其中之一且节点大、颜色深,提示TNF是APS治疗MAFLD过程中重要的靶点之一。动物实验结果显示,与MAFLD模型组小鼠相比,APS的干预可以显著降低MAFLD小鼠的体质量、肝湿重及肝指数(P<0.01)。APS可以在组织病理学上改善MAFLD小鼠的肝脏组织。APS的干预还可以降低MAFLD小鼠血清及肝脏组织中TNF-α的浓度(P<0.05)。小鼠肝脏组织免疫组化实验结果显示,APS干预组小鼠阳性表达区域面积显著低于MAFLD模型组(P<0.001)。结论基于网络药理学及动物实验结果可知TNF是APS治疗MAFLD的重要靶点之一,APS可以通过拮抗TNF-α表达来减轻小鼠MAFLD。

关键词： 经皮颈部迷走神经刺激   重性抑郁障碍   焦虑症状   睡眠质量   炎性因子  

摘要： 背景 侵入性迷走神经电刺激被批准用于难治性抑郁症的治疗,其发挥疗效可能与迷走神经刺激(VNS)具有抗炎作用有关。无创的经皮颈部VNS(tcVNS)治疗重性抑郁障碍(MDD)的效果及其对血浆炎性因子水平的影响尚不明确。目的 观察艾司西酞普兰联合tcVNS对MDD患者抑郁、焦虑和睡眠质量的改善情况及其对血浆白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)水平的影响,以期为MDD患者的康复治疗提供参考。方法 选取2019年8月21日—2024年4月17日在空军军医大学第一附属医院心身科门诊就诊、符合《精神障碍诊断与统计手册(第5版)》中MDD诊断标准的45例患者为研究对象。采用随机数字表法分为研究组(n=23)和对照组(n=22)。两组均接受艾司西酞普兰治疗,研究组在此基础上接受为期4周、每天1次、每次30 min的tcVNS治疗,对照组接受相应的tcVNS对照刺激治疗,即在刺激30 s后停止刺激。于治疗前和治疗4周后,使用汉密尔顿抑郁量表17项版(HAMD-17)评定抑郁症状,以HAMD-17中的焦虑/躯体化因子和睡眠障碍因子分别评定患者的焦虑/躯体化症状和睡眠质量。采用酶联免疫吸附测定法检测血浆白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)水平。结果 广义估计方程结果显示,两组HAMD-17总评分、焦虑/躯体化因子及睡眠障碍因子评分的时间效应均有统计学意义(Wald χ^(2)=315.226、495.481、82.420,P均<0.01)。治疗4周后,研究组HAMD-17总评分及焦虑/躯体化因子评分均低于对照组,差异均有统计学意义(Wald χ^(2)=4.967、32.543,P<0.05或0.01);两组睡眠障碍因子评分比较,差异无统计学意义(Wald χ^(2)=0.819,P=0.366)。两组血浆IL-6和IL-10水平的时间效应均有统计学意义(Wald χ^(2)=21.792、5.242,P<0.05或0.01)。治疗4周后,两组血浆IL-6水平均低于治疗前,差异均有统计学意义(Wald χ^(2)=22.015、6.803,P均<0.01);研究组血浆IL-10水平高于治疗前,差异有统计学意义(Wald χ^(2)=5.118,P=0.024)。结论 艾司西酞普兰联合tcVNS可能有助于改善MDD患者的抑郁症状、焦虑/躯体化症状及睡眠质量,并有助于降低血浆IL-6水平、提高IL-10水平。

关键词： HLA‐DRB4*01:03:01:22   new allele   third‐generation sequencing  

摘要： HLA-DRB4*01:03:01:22 differs from HLA-DRB4*01:03:01:06 by one nucleotide change in intron 2. © 2025 John Wiley & Sons A/S. Published by John Wiley & Sons Ltd.

关键词： HLA‐C*14:02:41   next‐generation sequencing   synonymous substitution  

摘要： The HLA-C*14:02:41 allele is distinguished from HLA-C*14:02:01:01 by a single synonymous change at c.606G>C. © 2025 John Wiley & Sons A/S. Published by John Wiley & Sons Ltd.

关键词： 肺结核   白细胞介素-6   淀粉样蛋白A   C反应蛋白   重症  

摘要： 目的探讨重症肺结核患者白细胞介素(IL)-6水平、血清淀粉样蛋白A(SAA)/C反应蛋白(CRP)及其临床意义,为临床诊治提供参考。方法选取2021年1月至2023年8月昆明市第三人民医院收治的147例肺结核患者为研究对象,根据病情程度分为重症组、轻症组,比较不同程度肺结核患者临床资料、血清IL-6水平及SAA/CRP。分析重症肺结核的影响因素,以及血清IL-6、SAA/CRP与肺结核程度的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IL-6、SAA/CRP对重症肺结核的预测价值。结果轻症组、重症组红细胞沉降率(ESR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、血小板/白细胞比值(PWR)比较,差异均有统计学意义(P<0.05),重症组血清IL-6、SAA、CRP水平及SAA/CRP高于轻症组(P<0.05)。PWR、PLR、IL-6、SAA/CRP均是重症肺结核的影响因素(P<0.05)。血清IL-6、SAA/CRP与肺结核程度均呈正相关(r=0.560、0.483,P<0.05),血清IL-6水平与SAA/CRP水平呈正相关(r=0.657,P<0.05)。血清IL-6、SAA/CRP联合预测重症肺结核的曲线下面积为0.927(95%CI:0.872~0.963)。结论PWR、PLR、IL-6、SAA/CRP均是重症肺结核的影响因素,血清IL-6、SAA/CRP与肺结核病情程度相关,血清IL-6、SAA/CRP联合对肺结核进展至重症的预测价值较高。

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒   抗原表位   结构蛋白   非结构蛋白   次要囊膜蛋白   多表位定向疫苗  

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种基因组为单股正链的RNA病毒。PRRSV毒株不断发生突变和重组,在感染的猪体中一般为多种毒株并存,给我国的养猪业健康发展造成巨大的损失。免疫接种是预防PRRS最有效的措施,而PRRSV蛋白抗原表位是设计疫苗的重要靶点。以PRRSV的非结构蛋白、主要结构蛋白以及次要囊膜蛋白基因编码的不同区域为特征,对已鉴定并报道的PRRSV蛋白抗原表位,分别进行简要的综述,为深入探究PRRSV对机体细胞感染的过程找寻新的研究思路,同时也为针对性的多表位定向疫苗的研制工作奠定基础。

关键词： 首发精神分裂症   糖脂代谢   白细胞介素-17   C反应蛋白   肿瘤坏死因子α   相关性  

摘要： 首发精神分裂症是一种复杂且严重的神经精神疾病[1]。该疾病不仅对患者个体的心理健康造成深远影响,同时也严重干扰其日常生活和社会功能[2-3]。近年来有研究表明,该疾病多伴糖脂代谢异常等一系列生物化学变化[4]。糖脂代谢异常可能影响大脑结构与功能,进而与精神疾病发生发展产生联系[5]。

关键词： 体外心肺复苏   急性肺损伤   瓜氨酸组蛋白H3   降钙素原   白细胞介素-10  

摘要： 目的探究血清瓜氨酸组蛋白H3(citrullinated histone H3,CitH3)、降钙素原(procalcitonin,PCT)及白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)对体外心肺复苏(extracorporeal cardiopulmonary resuscitation,ECPR)后急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的预测价值。方法择取2021年1月至2024年4月行ECPR的患者126例,入院次日空腹采血测定患者血清CitH3、PCT、IL⁃10水平。根据ECPR后ALI发生与否分为ALI组与非ALI组,对比两组临床资料及血清CitH3、PCT、IL-10水平,Logistic多因素回归分析ECPR后ALI发生的危险因素。另外受试者工作特征(receive operating characteristic,ROC)曲线分析血清CitH3、PCT、IL-10对ALI的预测价值。结果因6例患者未配合完成相关检查等被剔除,最终纳入120例患者,其中住院期间ALI发生28例(ALI组),ALI未发生92例(非ALI组)。ALI组入院时急性生理学和慢性健康状况评分(Acute Physiology and Chronic Health Scoring System,APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评估(Sequential Organ Failure Assessment,SOFA)、心肺复苏到自主循环恢复时间均大于非ALI组(P<0.05);ALI组血清CitH3、PCT、IL-10水平均高于非ALI组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示心肺复苏到自主循环恢复时间、血清CitH3、PCT及IL-10是ALI发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清CitH3、PCT、IL-10单一及3项联合预测ALI发生的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.886、0.837、0.852、0.951,3项联合的AUC均大于PCT、IL-10单一检测(P<0.05)。结论ECPR后ALI发生患者血清CitH3、PCT、IL-10水平上升,对ALI发生有一定的预测价值,特别是联合检测效能更显著。

关键词： 非洲猪瘟病毒   p22蛋白   单克隆抗体   抗原表位  

摘要： [目的]采用原核表达系统表达并获得非洲猪瘟病毒(ASFV)p22重组蛋白,并进一步制备、鉴定p22重组蛋白的单克隆抗体。[方法]采用PCR方法扩增ASFV p22蛋白编码基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-p22,并通过IPTG诱导表达p22蛋白。将纯化后重组蛋白免疫小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合制备单克隆抗体。通过Western blotting鉴定单克隆抗体特异性,通过ELISA方法测定腹水效价;利用在线软件预测p22蛋白抗原表位分布情况并合成重叠多肽,通过Dot blotting鉴定抗体识别的抗原表位。[结果]本研究成功构建了p22重组蛋白的原核表达质粒,获得原核系统表达的p22重组蛋白,分子质量约为22 ku。用纯化后p22蛋白作为免疫原免疫小鼠,成功筛选到4株阳性单克隆杂交瘤细胞株,分别为1G3D7G11、2G5H6H8、6D10G7D6和8F6F8B9,其腹水效价均达到1∶500 000。Western blotting结果显示,4株单克隆抗体均能与p22蛋白发生特异性反应。单克隆亚型鉴定结果显示,1G3D7G11、2G5H6H8和6D10G7D6株单克隆抗体的重链均为IgG1类,8F6F8B9株单克隆抗体的重链为IgG2a类,4株单克隆抗体轻链均为Kappa型。Dot blotting检测结果显示,1G3D7G11、2G5H6H8株单克隆抗体识别抗原表位位于第58—89位氨基酸处;8F6F8B9株单克隆抗体识别抗原表位位于第126—150位氨基酸处。[结论]本研究成功制备了4株ASFV p22蛋白的单克隆抗体,并初步鉴定了单克隆抗体所识别的B细胞表位区间。研究结果为p22蛋白的生物学功能研究和ASFV血清学检测提供了参考依据。