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关键词： 萤叶甲亚科   跳甲亚科   低覆盖度基因组   线粒体基因组   单拷贝直系同源基因   系统发育分析  

摘要： 萤叶甲亚科(Galerucinae)和跳甲亚科(Alticinae)均隶属于鞘翅目(Coleoptera),叶甲科(Chrysomelidae),其成虫和幼虫均为植食性,且部分种类为农林牧等产业的重要害虫,具有重要的经济学和生态学意义。在叶甲科各亚科中,萤叶甲和跳甲两个类群的关系最密切,但两个类群的系统发育关系在很大程度上并未解决,跳甲类群是否为独立的亚科一直以来是叶甲科分类学家们关注的重点。萤叶甲亚科族级分类系统及其系统发育关系相对明确,然而其最大的族—根萤叶甲族(Luperini)的单系性及其内部“组(section)”的划分目前还存在争议;跳甲亚科目前尚无被大家认可的族级分类体系,仅以“组”划分,但是“组”内属的组成也存有争议。另外,这两个类群之间的“问题属”的系统地位也需要从不同维度进行探究。 本论文在前人研究的基础上(萤叶甲亚科主要依据聂瑞娥提出的8族分类体系,跳甲亚科主要依据葛德燕的18“组”的分类体系),以萤叶甲亚科和跳甲亚科代表性类群,特别是“问题属”相关类群为研究对象,利用二代基因组测序技术测定其低覆盖度基因组,从中获取2种数据类型(一是线粒体基因组数据,二是单拷贝直系同源基因),基于这2种数据类型,采用不同的建树策略重建这2个亚科的系统发育关系,以探讨它们的单系性及“问题属”的归属、族或“组”阶元的系统关系等问题。本研究的样本包括97个物种,内群包括2亚科共92个物种(萤叶甲亚科8族31属46种,跳甲亚科13“组”27属35种,“问题属”8属11种),外群为叶甲亚科共4属5种。主要研究结果如下: (1)本研究通过二代测序技术成功获得97个物种的低覆盖度基因组,其中93个为新测得,另外4个种类为Genbank上下载获得。基于覆盖基因组数据共获得两种数据类型: a.线粒体基因组数据,基于97个低覆盖度基因组数据成果共获得94个物种的线粒体基因组,长度为12～18Kb。所有线粒体基因组均包含37个基因:13个蛋白编码基因(protein coding gene,PCG),2个核糖体RNA(r RNA)、22个转运RNA(t RNA)和1个AT富集区(AT-rich region)或控制区(control region)。这些基因的排列顺序、方向与已测的大部分鞘翅目昆虫一致,无重排现象,且基因之间的排列非常紧凑。除ND1外,其余蛋白编码基因均以ATN(ATT、ATG、ATC)作为起始密码子,以TAA、TAG或单独的T碱基作为终止密码子。13 PCGs的同义替换位点替换次数(Ka)与同义替换位点替换次数(Ks)的比值(Ka/Ks)显示了所有蛋白编码基因均处于纯化选择状态,其演化速率依次为:ATP8>ND4L>ND4>ND2>ND6>ND5>ND3>ND1>ATP6>COIII>CYTB>COII>COI。本文对13个蛋白编码序列的密码子的3个位点及13PCGs进行了碱基替代饱和度分析,结果表明13个蛋白编码基因的3个位点都是不饱和的,在建树的过程中不需要去除任何一位密码子。 b.单拷贝直系同源基因,基于97个物种的低覆盖度基因组,以内翅亚目为参考库,采用隐马尔可夫模型(Hidden Markov Model,HMM)获取单拷贝直系同源基因(提取率阈值设定为40%,高于40%可用于建树,否则舍去),在此阈值下共获得77个物种的单拷贝直系同源基因,之后去除掉简约信息位点低于100 bp以下的序列,以其覆盖度为70%的单拷贝直系同源基因的不同数据类型(核苷酸和氨基酸)进行系统发育树的分析。去除掉简约信息位点低于100bp以下的序列,最终,获得包含215个单拷贝直系同源基因(长度介于104 bp至1,643 bp之间)的氨基酸序列以及346个单拷贝直系同源基因(其长度介于206 bp至1,100 bp之间)的核苷酸序列。 (2)萤叶甲亚科和跳甲亚科二类群的系统发育关系及其高级阶元系统关系的探究。基于线粒体基因与单拷贝直系同源基因2种数据类型,利用IQTree和Fast Tree建树软件,重建了萤叶甲亚科和跳甲亚科的系统发育关系。两种数据集和不同的建树方法生成的系统树的拓扑结构不完全一致,但是其亚科级别、族级和组级的属、种组成及系统发生关系大体一致。所有系统树都支持萤叶甲亚科和跳甲亚科各为单系群,且为姊妹群关系,其中“问题属”Hespera、Luperomorpha、Nonarthra和Stenoluperus镶嵌在萤叶甲亚科进化枝中,Hespera和Stenoluperus为姊妹群,Nonarthra聚类在Hylaspini族里,Luperomorpha位置不太稳定,“问题属”Clitea、Phygasia、Laotzeus和Trachyaphthona聚类在跳甲亚科中,其中Clitea位置相对稳定。萤叶甲亚科族级

关键词： 比例的基本性质   直径   圆周长  

摘要： 小学数学虽然是以数的运算为主，貌似简单，但在日常生活中还是有着大量的应用，如：人教版小学数学六年级教材中就提到了自行车中所蕴含的数学知识.事实上不仅如此，在日常生活的很多方面都使用了小学数学知识，本文探讨了小学数学在生活实践中的使用情况，以便可以提高学生学习数学的兴趣与热情.

关键词： 糖尿病性白内障   白内障超声乳化术   干眼症  

摘要： 随着我国白内障超声乳化手术尤其屈光性白内障手术的开展越来越广泛,患者对术后视觉质量的要求越来越高,但因术后干眼导致的眼红、眼干、异物感、视物模糊等症状,影响手术患者术后的视觉质量和满意度。我国是一个糖尿病大国,糖尿病患者大多都具有眼表功能紊乱,70%具有角膜异常,通常表现为角膜知觉减退,持续的角膜上皮缺损,角膜溃疡迁延不愈等,且糖尿病患者中,老年性白内障发病率更高,与非糖尿病者相比发病年龄更提前,白内障成熟更为迅速,术后并发症发生率更高。因此,白内障术后干眼,尤其糖尿病患者围手术期干眼的诊断与治疗日益引起大家的重视。 目的 分析白内障超声乳化摘除术后患者干眼、角膜上皮缺损加重程度;对比研究2型糖尿病性白内障患者组与单纯老年性白内障患者组之间白内障术后干眼、角膜上皮缺损程度以及愈合所需时间的不同;对比分析采用小牛血去蛋白提取物眼用凝胶治疗角膜上皮损伤患者的有效性及安全性。 方法 随机选取我院由同一医生主刀的行白内障手术的单纯老年性白内障患者39例(50眼)为对照组,2型糖尿病性白内障患者27例(35眼)为观察组,又将对照组和观察组随机分为单纯老年性白内障非小牛血去蛋白提取物眼用凝胶组(A1组36眼)、单纯老年性白内障小牛血去蛋白提取物眼用凝胶组(A2组14眼)、2型糖尿病性白内障非小牛血去蛋白提取物眼用凝胶组(B1组17眼)和2型糖尿病性白内障小牛血去蛋白提取物眼用凝胶组(B2组18眼),分别在术前1天、术日、术后1天、术后7天及术后30天对术眼进行眼科专科辅助检查,包括视力、眼压、裂隙灯显微镜、泪膜破裂时间(BUT)、表面麻醉下泪液分泌量(SIT)、角膜荧光素钠染色拍照及评分(FL)以及VAS评分(眼痛、畏光、流泪、异物感)。最后使用SPSS软件处理并分析数据。 结果 1.A1、A2、B1、B2四组患者组内比较眼压和FL值在手术前后不同时间点比较有显著性差异(P<0.05),眼压值在术日达到最高超过正常眼压范围,在术后第一天开始恢复正常眼压;FL分值在术日高于术前达到最高,且随着时间的延长,FL分值逐渐减小,于术后第30天接近于术前;其余各项检查组内比较均无显著性差异(P>0.05)。 2.A1和B1两组患者术前组间FL值比较差异有显著性差异(P<0.05),B1组平均分值大于A1组,其余各项检查组间比较均无显著性差异(P>0.05);术后当天BUT值和VAS评分(流泪)比较差异有统计学意义(P<0.05),B1组平均分值大于A1组,其余各项检查组间比较均无显著性差异(P>0.05);术后第1天FL、BUT值和VAS评分(眼痛、流泪)比较差异有统计学意义(P<0.05),其中FL、BUT值和VAS评分(流泪)B1组平均分值大于A1组,VAS评分(眼痛)A1组大于B1组,余各项检查组间比较均无显著性差异(P>0.05);术后第7天FL、BUT值和VAS评分(眼痛、流泪)比较差异有统计学意义(P<0.05),其中FL、BUT值和VAS评分(流泪)B1组平均分值大于A1组,VAS评分(眼痛)A1组大于B1组,余各项检查组间比较均无显著性差异(P>0.05);术后第30天FL值、SIt和VAS评分(眼痛)比较差异有统计学意义(P<0.05),B1组平均分值均大于A1组;余各项检查组间比较均无显著性差异(P>0.05)。 3.A2组术后使用小牛血去蛋白提取物眼用凝胶前BUT值和VAS评分(眼痛、流泪、异物感)与A1组比较有显著性差异(P<0.05),其中VAS评分(眼痛、流泪、异物感)A2组平均分值均远高于A1组,BUT值A2组低于A1组。在术后第7天、术后第30天,A2组VAS评分(眼痛、异物感)较前明显降低,BUT值较前明显升高,和A1组FL、SIt、BUT和VAS评分(眼痛、异物感)比较差异均无统计学意义(P>0.05);B2组术后使用小牛血去蛋白提取物眼用凝胶前各项检查与B1组比较无显著性差异(P>0.05);在术后第7天SIt值B2组低于B1组,VAS评分(畏光)分值B2组高于B1组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);术后第30天,B2组VAS评分(畏光)较前明显降低,和B1组比较差异无统计学意义(P>0.05),SIt值B2组仍低于B1组,与B1组比较差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 1.白内障超声乳化术后会导致患者干眼症状加重以及角膜上皮点状缺损,于术后当天最为严重,随着术后时间的延长干眼症状和角膜点状缺损逐渐减轻。 2.2型糖尿病性白内障患者较单纯老年性白内障患者术后干眼症状和角膜上皮点状缺损严重,愈合所需时间较长。 3.小牛血去蛋白提取物眼用凝胶可以改善患者术后眼部疼痛和异物感,延长泪膜破裂时间,减轻干眼症状。

关键词： 羊草   紫花苜蓿   含水量   发酵品质   细菌群落  

摘要： 利用紫花苜蓿补播对草地进行改良和功能提升是国际上公认有效的草地管理办法,在松嫩平原羊草草甸补播紫花苜蓿可以达到生产生态双赢的目的。在雨热同季的地区,调制青贮饲料可以极大降低饲料的损失。本研究以羊草(Leymus chinensis)紫花苜蓿(Medicago sativa)混播草地第一茬饲草作为青贮原料,研究在不同添加(无添加、糖蜜、乳酸菌、糖蜜+乳酸菌)处理、不同含水量下,青贮60 d的混合青贮饲料发酵品质、营养成分以及微生物多样性的影响。主要试验结果如下: 1.含水量和添加剂均影响了青贮饲料发酵品质及营养成分,仅添加糖蜜或乳酸菌的处理中pH均不能降低至4.2以下,而同时添加糖蜜和乳酸菌可调制优质青贮。在降低pH的同时,饲料中的粗蛋白和可溶糖等营养物质得以保存,同时降低了不利于饲喂消化的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量。隶属函数综合评分中,青贮原料萎蔫处理添加糖蜜与乳酸菌的青贮饲料综合品质最佳。 2.通过16S测序对青贮饲料微生物多样性进行分析表明,在门水平上,青贮发酵后所有组别中厚壁菌门成为优势菌群;从属水平上来看,含水量下降进行青贮的不添加组(WCK)中肠球菌属(Enterococcus)丰度占比33.73%,相比新鲜青贮的不添加对照组CK显著提高(P<0.05)。同时所有组别中新鲜样品糖蜜添加青贮组(M)中的果乳杆菌属(Fructilactobacillus)和魏斯氏菌属(Weissella)占比最高,有糖蜜添加萎蔫处理组(WM)中乳球菌属(Lactococcus)占比最高。在有乳酸菌添加的组别中,乳酪杆菌属(Lacticaseibacillus)均成为了优势菌属,但糖蜜与乳酸菌混合添加组相比于单一添加乳酸菌的处理组乳酪杆菌属相对丰度更高,其中萎蔫处理添加糖蜜和乳酸菌的青贮饲料组(WML)中的乳酪杆菌属丰度占比最高为48.78%。 综合评价得出,紫花苜蓿与羊草1:1进行青贮,饲料品质以及微生物多样性均受到了含水量和添加剂的影响。青贮原料萎蔫处理添加糖蜜与乳酸菌的混合青贮饲料综合品质最高。恰当的糖蜜添加能够促进发酵过程中有益菌群的生长,而乳酸菌的引入则有效地加速了青贮饲料的酸化过程,两者共同作用显著提升了青贮的整体品质。研究结果对混播草地青贮利用提供了理论依据和技术支持。