关键词： 马立克氏病   马立克氏病病毒   α疱疹病毒   UL23   胸苷激酶  

摘要： 马立克氏病(Marek’s Disease,MD)是由马立克氏病病毒(Marek's Disease Virus,MDV)感染鸡引起的以严重的免疫抑制、神经症状和快速发病性淋巴瘤为主要特征疾病。MD可作为一种天然肿瘤的生物医学模型。MDV属于疱疹病毒科,α疱疹病毒亚科中的一员,基因组结构与α疱疹病毒亚型单纯疱疹病毒(HSV)相似。在α疱疹病毒中,UL23基因编码的胸苷激酶(Thymidine kinase,TK)是与病毒毒力相关的体外复制非必需蛋白,常作为抗疱疹病毒感染的治疗药物靶点以及抗肿瘤治疗中的自杀基因,也是基因工程疫苗研发的重要位点。作为HSV/TK的同系物,MDV UL23编码TK的功能仍然未知。本课题为了探究MDV/TK的结构和功能,开展如下研究内容:***/TK蛋白结构预测分析利用Meg Align和Pymol软件,进行MDV-1/TK、MDV-2/TK、HVT/TK、HSV-1/TK和PRV/TK氨基酸序列和三级结构比对,并利用Autodock软件将TK蛋白三级结构与核苷分子及其类似物进行对接分析,再利用POCASA在线软件对5种TK蛋白质表面或内部具有结合配体的合适性质的空腔(活性口袋)进行预测。结果表明这5种TK氨基酸序列同源性较低,但空间构象十分相似,尤其是功能相关氨基酸位点高度保守;通过对5种TK与底物分子胸腺嘧啶核苷(TR)和阿昔洛韦(ACV)对接,潜在的作用位点也高度保守;通过与HSV/TK的活性口袋进行比较分析,发现MDV/TK存在潜在的活性口袋,底物分子TR可包裹在预测的活性口袋中。由此,我们推测MDV/TK可能发挥与HSV/TK和PRV/TK相似的生物学功能。***-1/TK、MDV-2/TK、HVT/TK、HSV-1/TK和PRV/TK蛋白表达及纯化为了验证5种TK是否都发挥酶活性,首先通过构建原核表达质粒,在大肠杆菌种诱导表达MDV-1/TK、MDV-2/TK、HVT/TK、HSV-1/TK和PRV/TK蛋白。经过优化诱导表达温度及IPTG浓度,SDS-PAGE结果显示MDV-1/TK、MDV-2/TK、HVT/TK、HSV-1/TK和PRV/TK蛋白均能够在裂解细菌上清中可溶性表达。经GST-tag纯化柱和分子筛纯化,Western blot结果表明成功获得5种高纯度TK蛋白,为验证其体外酶活性打下材料基础。***-1/TK、MDV-2/TK、HVT/TK、HSV-1/TK和PRV/TK体外酶活性验证为进一步验证5种TK的酶活性,首先确定了TK催化反应条件,再以ATP和TR为底物,分别向体系加入MDV-1/TK、MDV-2/TK、HVT/TK、HSV-1/TK和PRV/TK蛋白,37℃反应1 h,利用高效液相色谱(HPLC)检测催化反应产物。结果发现5种蛋白催化反应体系均生成ADP和d TMP。再利用ACV为底物,模拟与TR底物分子相同的反应条件,HPLC检测催化反应产物均为ADP和ACV-MP。这些结果表明MDV-1/TK、MDV-2/TK和HVT/TK均发挥胸苷激酶的活性,能够催化核苷及其类似物发生磷酸化,与HSV-1/TK和PRV/TK酶活性功能一致。综上所述,本研究通过MDV与其他α疱疹病毒编码的TK结构和功能比较分析,揭示了MDV/TK与HSV-1/TK、PRV/TK三级结构及酶功能区结构相似性,证明其作为胸苷激酶的体外催化活性。为进一步探究其参与病毒致病机制和疫苗研发提供了新的思路,也为构建以α疱疹病毒编码的TK为研究靶点的病毒和肿瘤模型打下良好的基础。

关键词： 髌骨骨折   膝关节周围骨折   关节腔压力   急性下肢深静脉血栓  

摘要： 目的：比较髌骨骨折与其他膝关节周围骨折的关节腔压力及急性下肢深静脉血栓形成发生率。方法：选取我院2021年9月到2022年3月收治的40例髌骨骨折和40例其他膝关节周围骨折患者为研究对象，40例髌骨骨折为观察组，40例其他膝关节周围骨折为对照组，观察两组关节腔压力、急性下肢深静脉血栓形成发生率。结果：术后6～12 h复查彩超，两组腘静脉血流与胫前静脉速度都明显高于术前（P<0.05）;48 h后血浆D-二聚体含量对比，观察组更低（P<0.05）。术后14 d，观察组的下肢急性深静脉血栓发生率低于对照组（P<0.05）。结论：髌骨骨折的关节腔压力及急性下肢深静脉血栓形成发生率显著低于其他膝关节周围骨折。

关键词： 库布齐沙漠   土壤结皮   高通量测序   微生物群落   共现性网络  

摘要： 土壤结皮是沙漠生态系统中的重要组成部分,而微生物是土壤结皮形成和发育的主要驱动力,在土壤结皮中起着不可或缺的重要作用。本文利用q PCR和高通量测序技术,研究内蒙古库布齐沙漠藓类结皮与其他不同演替阶段的土壤结皮(物理结皮、藻类结皮)及下层土壤中微生物类群群落结构特征。主要结论如下:(1)随结皮发育,土壤有机质含量、全氮、速效氮、全磷等含量在藓类结皮中达到最高,说明藓类植物能够有效提高土壤养分含量。藓类结皮与其他不同演替阶段土壤结皮及下层土壤微生物群落中细菌群落绝对丰度最高,且藓类结皮细菌群落绝对丰度显著高于下层土壤。固氮菌群落绝对丰度在藻类结皮中最高。古菌群落绝对丰度在物理结皮中最高,且下层土壤中古菌群落绝对丰度显著高于藓类结皮。真菌群落绝对丰度呈现随着结皮的演替逐渐降低。(2)在演替过程中,细菌群落组成明显不同,蓝细菌门在物理结皮中相对丰度最高,物理结皮中的优势属包括norank＿f＿＿Chroococcidiopsaceae等,变形菌门在藻类结皮中相对丰度最高,藻类结皮中优势属为Rubellimicrobium等,放线菌门在藓类结皮中相对丰度最高,藓类结皮中优势属为Microvirga等。放线菌门在下层土壤中的相对丰度较藓类结皮有所增加,下层土壤中的优势属为Rubrobacter等。固氮菌群落中的变形菌门在物理结皮中相对丰度最高,蓝细菌门在藻类结皮中相对丰度最高。3种结皮中的优势属Skermanella,随着结皮的演替相对丰度逐渐下降。与藓类结皮层相比,下层土壤中变形菌门的相对丰度增加,蓝细菌门的相对丰度则明显降低,下层土壤中优势属为Azohydromonas等。古菌群落中的泉古菌门在3种结皮中相对丰度皆最高,且优势属皆为Candidatus＿Nitrocosmicus。在下层土壤中泉古菌门相对丰度也最高,下层土壤中的优势属为norank＿f＿＿Nitrososphaeraceae等。真菌群落中子囊菌门在3种结皮中相对丰度皆最高,且相对丰度逐渐增加。物理结皮中的优势属包括Cladosporium等,藻类结皮中优势属为unclassified＿p＿＿Ascomycota等,藓类结皮中优势属为Octosporella等。下层土壤中SAR＿k＿＿norank的相对丰度最高,下层土壤中的优势属为Gregarina等。(3)通过共现性网络分析发现细菌群落中演替初中期(物理结皮、藻类结皮)中关键类群较为复杂,在藓类结皮中转换为酸杆菌门中多个菌属共同作用,在下层土壤中又转变以放线菌门多个菌属为主。固氮菌群落中藻类结皮中关键类群为蓝细菌门的unclassified＿f＿＿Nostocaceae及Nostoc,物理结皮、藓类结皮与下层土壤中关键类群均属于变形菌门,以Skermanella和Azohydromonas为主。藓类结皮与其他不同演替阶段土壤结皮古菌群落中关键类群属于泉古菌门中的unclassified＿f＿＿Nitrososphaeraceae,或unclassified＿k＿＿norank＿d＿＿Archaea,下层土壤中关键类群则由unclassified＿k＿＿norank＿d＿＿Archaea转变为泉古菌门中的Candidatus＿Nitrocosmicus。藓类结皮与其他不同演替阶段土壤结皮真菌群落中关键类群均为子囊菌门中的多个菌属共同作用,在下层土壤中关键类群则由子囊菌门多个菌属转变为SAR超类群多个菌属(norank＿c＿＿Glissomonadida、Nudifila)。综上,本文为人工促成藓类结皮荒漠生态治理的研究,提供了基础数据和理论支持。

关键词： 民国   《新闻报》   异体字   汉字规范  

摘要： 本文以民国时期的《新闻报》为研究对象,整理《新闻报》的异体字组,以王宁的汉字构形学理论为指导,对《新闻报》的异体字进行分析描写,并在此基础上总结它的特点。文章主要分为六个部分。第一部分是绪论,首先对当前异体字的研究情况进行概述,其次是对研究对象、研究内容以及研究方法进行介绍。第二部分是对《新闻报》的异写字进行分类描写,从笔画和构件两个层面进行描写。第三部分主要研究《新闻报》的异构字,分为构意完整和构意半存的异构字,构意完整的异构字又分为构形模式不同和构形模式相同两大类。第四部分将《新闻报》的异体字与《校改国音字典》《第一批异体字整理表》《古籍印刷通用字规范字形表》进行对比,分析《新闻报》异体字的特点。第五部分在前文本体研究及对比分析的基础上总结《新闻报》异体字的特点。《新闻报》异体字数量繁多,种类丰富,其中异写字远远多于异构字;《新闻报》的异写字具有类推性,无论是笔画异写字还是构件异写字。《新闻报》的异体字体现出《新闻报》字形使用的不规范性和时代性。第六部分是文章的结语部分。

关键词： 重症社区获得性肺炎   儿童患者   混合感染   临床特征  

摘要： 目的:通过分析儿童重症社区获得性肺炎(SCAP)单纯病毒感染与病毒混合其他病原感染的病原学分布及临床特征，探讨识别混合病原感染，特别是混合细菌感染的临床特征，为更精准地使用抗感染药物提供依据。　　方法:以2018年1月至2018年12月深圳市儿童医院收治的479例1月～14岁重症社区获得性肺炎、需要进行支气管镜检查的患儿为对象，回顾性分析支气管肺泡灌洗液中经核酸扩增技术检测9种病毒、8种细菌和2种非典型病原体呈阳性患儿的病原体分布特征，以及单纯病毒感染与病毒混合感染患儿的临床资料,进行统计分析。　　结果:纳入研究的SCAP患儿共479例，至少检出一种病原375例(78.3％),检出病毒阳性者247例（51.6％),非典型病原检出阳性者111例(23.2％),细菌阳性者98例(20.5％);病毒检出最多的分别是腺病毒117例(24.4％)、鼻病毒62例(12.9％)、呼吸道合胞病毒23例(4.8％);细菌检出最多的分别是流感嗜血杆菌40例(8.4％)、肺炎链球菌37例(7.7％)、卡他莫拉菌20例(4.2％)。在所有检测阳性病例中，单一病原感染检出274例(73.1％),混合感染(≥2种病原)检出101例(26.9％),混合感染以病毒混合细菌感染为主共51例(51/101,50.5％),其次是病毒混合非典型病原感染20例(20/101,19.8％);混合感染率较高的病毒是副流感病毒(57.9％,11/19)、鼻病毒(51.6％,32/62)、呼吸道合胞病毒(43.5％,10/23)。不同性别患儿在不同类型病原的检出率无显著差异(F=7.344,P=0.266)。婴儿与幼儿均以病毒感染为主，感染率分别为45.1％、50.3％,学龄前儿童病毒感染率下降为29.2％,非典型病原体感染升高为27.4％,学龄期儿童非典型病原感染占比50.0％。病毒混合细菌感染、病毒混合非典型病原感染与单纯病毒感染在临床表现、体征、炎症指标、脏器功能指标、出现肺部并发症、抗生素的使用、糖皮质激素使用、静脉丙种球蛋白的使用、入住PICU比例、需要机械辅助通气及住院时长的比较上均无明显差异（P＞0.05）。　　结论:儿童SCAP以病毒感染为主，病毒混合细菌或非典型病原感染也占相当的比例;婴幼儿及学龄前儿童以病毒感染和病毒混合细菌感染为主，学龄期儿童以肺炎支原体感染和病毒混合肺炎支原体感染为主。对儿童SCAP,仅依靠临床特征及常规血液检查无法区别单纯病毒感染与病毒混合细菌或非典型病原感染，要实现针对性抗感染治疗，仍然依赖于敏感度高的多重病原学检测。

摘要： 新华社约翰内斯堡8月24日电（记者郝薇薇杨依军）当地时间8月24日上午，国家主席习近平在约翰内斯堡出席金砖国家同非洲国家及其他新兴市场和发展中国家领导人对话会。会议由南非总统拉马福萨主持，巴西总统卢拉、印度总理莫迪、俄罗斯总统普京（线上）和60多位非洲国家及其他新兴市场和发展中国家领导人或代表，以及联合国秘书长古特雷斯、新开发银行行长罗塞夫等国际和地区组织负责人出席。

摘要： 上海2022年工业机器人年产量预计达7.5万台，位居国内首位2023年1月17日，上海市经济和信息化委员会副主任汤文侃在《上海市智能机器人标杆企业与应用场景》媒体通气会上表示，2022年，上海工业机器人年产量将超过7.5万台，同比增长6%，产量居国内城市首位。从品牌来看，上海地区不仅有机器人四大家族——ABB、发那科、安川、

摘要： 一、案情简介某贸易公司于2017年6月5日申请“众某”商标（下称诉争商标），该诉争商标核定使用于第12类商品上。2019年6月10日，龙某向国家知识产权局提起无效宣告申请。国家知识产权局经审查认为，诉争商标的申请注册已构成2013年《商标法》第四十四条第一款规定的“以其他不正当手段取得注册”之情形，裁定：争议商标予以无效宣告。被诉裁定之所以适用《商标法》第四十四条第一款认定诉争商标构成“以其他不正当手段取得注册”之情形，主要基于以下几个因素：

关键词： 单位犯罪   其他直接责任人员   刑事责任根据   认定研究  

摘要： 长期以来,我国刑法学界关于单位犯罪的论述颇多,但多是站在“单位”视角讨论单位的整体刑事责任,再从单位承担刑事责任的根据中寻找单位成员承担刑事的根据,所以容易将单位成员当成是单位的构成要素或组成部分,来分担单位的整体刑事责任。“其他直接责任人员”相较于“直接负责的主管人员”主观犯意不明显,却是单位犯罪行为的实施者,在单位犯罪中具有特殊地位。司法实践中常存在客观归罪现象,忽略行为人的主观罪过,不仅不同类型的单位犯罪中其他直接责任人员的认定标准不一致,相同类型相似事实下法院的认定结果也有较大差异。本文从自然人犯罪角度出发,认为单位成员的身份并不会使行为人丧失自由意志,“执行职务行为或为公司利益”也不能成为免责的事由。“其他直接责任人员”的刑事责任本质上仍然是一种自然人刑事责任,只是犯罪主体的范围被限缩。“其他直接责任人员”的认定,应坚持主客观相统一原则,在符合纯粹自然人犯罪构成的基础上,再从身份、责任和作用角度排除直接负责的主管人员和一般参与人员。全文除掉绪论外,共分为四个部分:第一部分主要论述其他直接责任人员的基本问题。包括其他直接责任人员的概念、特征和单位犯罪的关系。本文认为,其他直接责任人员是指,“除直接负责的主管人员以外,积极参与单位犯罪实施或因存在明显过失,而对单位犯罪结果起较大作用的单位内部成员。”其他直接责任人员是单位犯罪制度下的特殊自然人犯罪主体,具有独立的犯罪主体地位。其他直接责任人员不能脱离单位犯罪而存在,不是因为他们的刑事责任来源于单位刑事责任,而是因为国家基于单位犯罪的特点和刑事政策的考虑,将他们的处罚范围作了限缩。第二部分主要论述其他直接责任人员的司法现状。包括现有司法解释对其他直接责任人员的规定较为混乱,无法为司法实践提供明确指导。生效判例中法院对其他直接责任人员的认定标准不统一,存在客观归罪现象。研究其他直接责任人员的司法现状有利于我国尽快出台统一的司法解释,明确其他直接责任人员的裁判标准。第三部分主要论述其他直接责任人员的刑事责任根据。包括理论依据和刑事政策依据。单位成员的身份并不会使自然人丧失独立意志,其他直接责任人员能认识到自己实施行为的内容、社会意义和危害结果,并能控制自己实施或不实施法律所禁止的行为,具有承担刑事责任的能力。其他直接责任人员在双重意志支配下实施的犯罪行为,首先是个人行为,满足特定条件才能上升为单位行为。惩罚其他直接责任人员能实现打击和预防犯罪的目的,限制其他直接责任人员认定范围是基于刑法谦抑制性原则的考虑。第四部分主要论述其他直接责任人员的认定。主要从主体要件、客观要件和主观要件三个方面进行论述。主体要件中,其他直接责任人员必须是单位内部人员。是否是单位内部人员要结合案件具体情况进行实质性判断。主观要件中,其他直接责任人员必须对单位犯罪有故意或明显过失。故意的判断要综合考虑行为人的专业背景、从业经验、岗位职责、犯罪目的、犯罪原因等情况。客观要件中,其他直接责任人员的行为必须对单位犯罪结果起重要作用。重要作用的判断可以采用排除法,结合行为、责任、因果关系排除对单位犯罪结果起次要作用的一般参与者。

关键词： 高中生物学   深度学习   教学设计   基因突变及其他变异  

摘要： 深度学习回答了时代发展对人才培养提出的诉求,是培养高素质人才的有效途径。深度学习响应了新课程标准提出的要求,是落实新课程改革,培养学生学科核心素养的重要方式。因此本研究以深度学习理论为基础,结合高中生生物学深度学习现状,对高中生物学深度学习的教学设计进行研究并展开实践。旨在回答如何对高中生物学进行深度学习的教学设计。本研究运用文献研究法,对深度学习的国内外研究现状进行了梳理,并对其内涵与本质、特征、评价方式以及理论基础进行了阐述。在实践调研阶段,通过调查问卷,以笔者实习期间任教的两个高一班级作为调查对象,调查高中生生物学深度学习现状。调研结果表明:学生的内部学习动机亟待加强;高阶思维有待提高;学习策略需要优化。并对教师进行访谈,总结得到了促进和阻碍学生深度学习的因素。在正式进入实践研究前,笔者详细解读了深度学习路线(DELC),并将深度学习路线(DELC)与“三段五环”深度教学过程模型进行融合,参考深度学习现状调查结果,提出促进高中生物学深度学习的教学设计模型。在实践研究阶段,依据上述提出的促进深度学习的教学设计模型,选取人教版“基因突变及其他变异”单元作为教学内容进行深度教学设计,对实习期间所任教的两个高一班级开展实践教学。教学实践结束后采用调查问卷、学生访谈和概念图评价法检测学生的深度学习水平是否得到提升。从调查问卷结果来看,学生在学习动机、学习策略、高阶思维和人际交往四个维度都有提升,且除高阶思维外都发生了显著变化。从概念图得分情况来看,B1#4班十分接近深度学习低水平,A1#1班已经达到深度学习低水平。通过学生访谈发现,学生的内部学习动机得到提高,知识整合能力得到提升,有部分学生的高阶思维得到发展。综合分析多种调查结果,在深度教学实践后两个班级学生的深度学习水平相较于实践前发生了一定的提升。基于上述调查结果可以得到如下研究结论:本研究提出的促进深度学习的高中生物学教学设计模型能够促进学生的深度学习。